Memoire Online - Faune anophélienne du nord de la Mauritanie et sensibilité d'an. gambiae s.l à la perméthrine (0,75%) et à la déltamethrine (0,05%) dans les sites sentinelles du programme national de lutte contre le paludisme.

Faune anophélienne du nord de la Mauritanie et sensibilité d'An.
gambiae s.l. à la perméthrine (0,75%) et à la deltaméthrine (0,05%)
dans les sites sentinelles du Programme National de Lutte contre le
Paludisme.

Le tout puissant t'a arraché de notre affection. Nous aurions bien voulu vous avoir à nos côtés aujourd'hui car ce travail est le résultat de tant de sacrifices pour la réussite de vos enfants. Que la terre de Nouakchott te soit légère.

Je n'oublierai jamais tout ce que tu as sacrifié pour notre réussite. L'éducation que tu nous as inculquée nous comble de fierté et de sécurité dans un monde où les dérives font loi. Nous prions DIEU de ne jamais te décevoir.

J'admire votre courage et compréhension. Sans vous ce travail n'aura pas vue le jour.

Ramatoulaye Niang, Bintat Ibra Niang, Coumba younouss Niang, Mariane Niang et Aminata Niang.

Ambroise Dioum Ahouidi, Abdoulaye diop Dieng & Awa, John Logbo, Abdoulaye Ba, Mamadou Ousmane Ndiatt & Marie, Diao Diallo, Badara Samb, Daouda Seck.

A tous ceux qui de prés ou de loin ont participé à la réalisation de ce travail.

AU Dr Lassana ^KonatéC'est l'occasion pour nous de vous exprimer tout le respect que nous portons à votre

personne et l'excellent cadre de travail du laboratoire d'Ecologie Vectorielle et Parasitaire de l'UCAD que vous dirigé avec brio. Votre disponibilité indéfectible ainsi que votre rigueur scientifique ont beaucoup contribué dans notre formation universitaire. Tous nos remerciements pour avoir accepté de diriger ce travail.

Les mots nous manquent pour vous remercier. Vos grandes qualités humaines et surtout intellectuelles, vos esprits d'ouverture font de vous des hommes qui inspirent l'estime et l'admiration. Nous garderons de vous l'image de chercheurs modèle.

Merci pour la qualité des enseignements que vous nous avez donnés et également d'avoir accepté de présider le jury d'examen. Nous garderons de vous l'image d'un homme toujours disponible, qui a su donner au département de Biologie Animale ces lettres de noblesse.

L'homme qui a sus cultiver en nous l'amour de l'entomologie. Ma présence au LEVP de l'UCAD fait suite à la collaboration que vous avez établie entre le LEVP et l'INRSP (ex CNH). Nous avons pu apprécier tout au long de ces années votre sens profond du devoir, votre disponibilité et votre humanisme. Mon cher GAMOU, merci pour les conseils...

Tous nos remerciements pour avoir accepté sans hésitation de juger ce travail. Nous avons pu mesurer depuis la première année (SN1) votre rigueur scientifique qui a fortement contribué dans notre formation universitaire. Trouvez ici l'expression de notre profonde gratitude.

Vous vous êtes toujours comporté comme un aîné. Merci d'avoir accepté de faire partie du jury.

1er Partie
INTRODUCTION	2
CHAPITRE I : GENERALITES
I- Présentation sommaire de la République Islamique de Mauritanie	4
1. Situation géographique	4		2. Relief
4		3. Hydrographie
4		4. Population
4
II- Situation actuelle du paludisme en Mauritanie6
1. Vecteurs		6
2. Morbidité		6
3. Faciès épidémiologiques		8
4. Espèces plasmodiales		8
5. Prise en charge des accès		8
6. Lutte antivectorielle		9
CHAPITRE II : MATERIELS ET METHODES
I- Sites d'étude		11
1. Akjoujt		11		2. Atar
	11	3. Tergite
	11	4. Zouerate
	13	5. Nouadhibou
	13
II- Méthodes d'étude		15
1- Echantillonnages des imagos de moustiques		15
1-1. Captures par pièges lumineux avec dormeurs		15
1-2. Récolte de la faune résiduelle matinale		15
2- Echantillonnage des larves de moustique		16
3. Traitement du matériel biologique		16
3.1 Traitement sur le terrain		16
3.1.1. Identification des imagos de moustiques		16
3.1.2. Conservation des imagos de moustiques		16
3.1.3. Conservation des larves de moustiques		16
3.2 Traitement au laboratoire		16
3.2.1. Montage des larves de moustique		16
3.2.2. Identification des Larves de moustiques		17

CHAPITRE III : RESULTATS

II- Les moustiques adultes

CHAPITRE I : MATERIELS ET METHODES

2.1.5. Identification des formes moléculaires et de la fréquence du gène Knock Down (Kdr) au sein d'Anopheles gambiae s.s 42

CHAPITRE II : RESULTATS

KDT50 : temps pour lequel 50% des spécimens présente une paralysie ou sont morts KDT95 : temps pour lequel 95% des spécimens présente une paralysie ou sont morts MSAS : Ministère de la Santé et de Affaires Sociales

INTRODUCTION

L'épidémiologie du paludisme dans le Sahara algérien et nigérien, milieu désertique, a été bien étudiée (BENZEROUG & JANSSENS 1985 ; DEVELOUX et al., 1994). Par contre, très peu d'études ont été conduite sur le paludisme dans le Sahara mauritanien. Dans ces milieux saharo-saheliens le faciès épidémiologique du paludisme peut être très différent d'une année à l'autre. Il est assujetti aux importantes variations écologiques du milieu. Coincée entre l'Afrique du Nord et l'Afrique sub-saharienne, la partie nord de la Mauritanie se trouve à la lisière de la faune paléarctique Nord et de la faune afrotropicale Sud (MONOD, 1932 in EDWARS, 1941).

Sur les 400 espèces d'anophèles connues, environ une vingtaine sont vectrices du paludisme (MOUCHET & CARNEVALE, 1991). Malgré les nombreuses affections à transmission vectorielle rencontrées en Mauritanie, peu d'études entomologiques y ont été conduites. Les seules études entomologiques publiées datent des années 1960 (HAMON et al., 1964 ; Maffi, 1964). Ces enquêtes ont principalement porté sur l'inventaire faunistique des vecteurs potentiels du paludisme.

Dans les régions du sud et du sud-est du pays, An. arabiensis, An. gambiae s.s et An. funestus (HAMON et al., 1964 ; MOLEZ & FAYE, 1996 ; PETRARCA et al., 1987 ; DIA et al., 2003 soumis) ont été récoltés à la suite d'enquêtes transversales. Cependant les modalités de la transmission du paludisme n'ont pas encore été étudiées. Seul An. gambiae s.l. a été incriminé dans la transmission du paludisme (DIA et al., soumis). L'absence de données sur les limites de répartition de ces vecteurs rend énigmatique l'interprétation de certains cas de paludisme et de fièvres hémorragiques (SALUZZO et al., 1987 ; ZELLER et al 1995 ; NABETH et al., 2001 ; DIALLO et al.,2005) fréquemment signalés dans le pays.

Des cas présumés de paludisme sont rapportés dans toutes les structures sanitaires du nord de la Mauritanie (MSAS, 2002). En l'absence de toute donnée sur la transmission de Plasmodium, l'analyse et l'interprétation de certains cas de paludisme posent problème du fait que les vecteurs classiques sont supposés être absents de ces zones (CORTES et al., 2003). En effet, du fait de la rareté d'études entomologiques, la réponse à cette interrogation reste difficile dans le contexte nord mauritanien. C'est dans ce cadre que le Programme National de Lutte contre le Paludisme a entrepris d'effectuer deux études entomologiques ; l'une dans le nord et l'autre dans le sud de la Mauritanie. L'objectif de l'étude menée dans le nord est de voir si le Sahara mauritanien renfermait les vecteurs classiques du paludisme du Sahara central et septentrional et/ou de l'Afrique sud-saharien.

L'étude effectuée dans le sud avait pour objectif la détermination du statut des populations anophéliennes vis-à-vis de la perméthrine et de la deltaméthrine dans les sites sentinelles du Programme National de Lutte contre le Paludisme, en vue de l'élaboration d'une bonne politique des insecticides au niveau national.

Dans ce travail, nous présenterons en première partie les résultats des enquêtes entomologiques menées dans le nord du pays et en seconde partie, ceux de la sensibilité d'An. gambiae s.l. aux insecticides dans les sites sentinelles du Programme National de Lutte contre le Paludisme de la Mauritanie.

I- Présentation de la République Islamique de Mauritanie

La population totale résidente en novembre 2000 est de 2.508.159 habitants. Un des phénomènes les plus significatifs des changements profonds intervenus dans le pays est celui de la sédentarisation. En effet, la proportion de nomades qui était de 33% en 1977, est passée à 12% en 1988 pour tomber à 5% en 2000 (ONS, 2000). La répartition de la population est très inégale. La densité de la population est de 1 habitant au km² dans le Nord et le centre du pays. Elle est de 8 à 11 habitants au km² dans le sud du pays.

Figure 1 :
Carte de la République Islamique de Mauritanie montrant les différentes zones géo-
climatiques et l'emplacement des sites d'études. (Source, Programme National de Lutte
contre le Paludisme)

II- Situation actuelle du paludisme en Mauritanie.

pouvant toucher la quasi-totalité de la population du sud et du sud-est du pays où il représente la première cause de morbidité et de mortalité (MSAS, 1998). Dans une enquête conduite en 1987, GASQUET a trouvé un taux moyen de splénomégalie de 12,7% dans la région du fleuve, s'élèvant à 24,4% chez les enfants âgés de 1 à 9 ans. Le nombre de cas de paludisme diagnostiqués est très variable selon les années (Figure 2). La morbidité proportionnelle a été évaluée à 16,5% (ANONYME, 1999).

Figure 2
Nombre de cas annuels de paludisme (présumés et confirmés) enregistrés dans les
centres de santé de la Mauritanie. (MSAS, 2002).

Des flambées épidémiques de fièvres supposées d'origine palustre avec 30 à 40% de cas d'accès graves et un taux de létalité de 15% ont été notées ces dernières années dans plusieurs régions du sud du pays, faisant ainsi du paludisme un véritable problème de santé publique.

En République Islamique de Mauritanie, le traitement de première intention des accès palustres simples repose sur l'administration de la chloroquine à la dose totale de 25 mg/kg, répartie sur trois jours à raison de 10 mg/kg le premier et deuxième jour et 5mg/kg le troisième jour. La chimioprophylaxie avec la chloroquine est réservée aux seules femmes enceintes. En cas d'intolérance ou d'échec thérapeutique, la chloroquine est remplacée par la sulphadoxine/pyriméthamine (Fansidar®). Les sels de quinines sont réservés aux accès graves et compliqués. GUIGUEMDE et al., (1990) écrivaient : « tous les pays de l'OCCGE sont atteints par la chloroquinorésistance de P. falciparum, exceptée la Mauritanie, pays où le paludisme est rare...». Depuis cette date, deux études sur la chloroquino-résistance in vivo de P. falciparum ont été réalisées en Mauritanie. Elles ont révélé un taux d'échec thérapeutique inférieur à 10% à Boghé, dans le sud du pays (région du Brakna) (GASQUET et al., 1994) et 33% (PENALI et al., 1998) à Aïoun, dans le sud-est du pays (région du Hodh el garbi).

En 2001 à Aïoun une étude centrée sur la recherche de gènes mutant de la dihydrofolate reductase (DHFR) et la dihydropteroate synthetase (DHPS) responsable de la résistance de P. falciparum à la sulphadoxine/pyriméthamine montre une prévalence de 41,97% (EBERL et al., 2001).

L'introduction de moustiquaires imprégnées d'insecticides conduits par le Programme National de Lutte contre le Paludisme date de 1995 dans la région du Guidimakha et de l'Assaba et de 1997 dans la région du Hodh el Garbi et le Trarza (COULIBALY, 1999). Elle est largement répandue dans tout le sud et sud-est du pays où les résultats sur la sensibilité des vecteurs de paludisme aux insecticides seront présentés dans la seconde partie de ce travail.

Chapitre II :

I- Sites d'étude

La figure 2 montre l'emplacement des sites d'étude qui sont tous situés au nord de Nouakchott la capitale, en zone saharienne et oasienne. Le climat, de type saharien, est caractérisé par de grands écarts entre les températures moyennes mensuelles minimales et maximales (Figure 4a et 4b). Les sites d'étude sont : Akjoujt, Atar, Tergîte, Nouadhibou et Zouérate. EMBERGER et al., en 1963 distinguent quatre zones bioclimatiques en Mauritanie. Ils classent les localités étudiées dans la "zone à climat désertique, avec 300 à 355 jours biologiquement secs par an".

Tergîte présente les mêmes caractéristiques climatiques qu'Atar dont il n'est distant que de 40 km. Tergîte abrite la plus grande palmeraie et l'oasis le plus visité de la Mauritanie. Environ 100 personnes vivent à Tergîte et s'adonnent aux activités maraîchères et touristiques de l'oasis.

Figure 3:
Pluviométrie moyenne mensuelle à Atar, Akjoujt, Nouadhibou et Tergîte. Source
Asecna- Mauritanie 2002.

Tableau 1 :
Pluviométrie moyenne annuelle et nombre de jours de pluie dans les
localités d'étude en 2002.

Nouadhibou est situé à 700 km au nord de Nouakchott sur le littoral. Nouadhibou abrite les ports de pêche et minéralier ainsi que la quasi-totalité des usines de transformation des produits halieutiques. Sa population est de 72 337 habitants, venus pour la plupart de l'intérieur du pays et même de la sous-région, à la recherche de travail. La pluviométrie annuelle à Nouadhibou en 2002 est de 27,5 mm (Figure 3). La rareté des pluies est compensée par une humidité relative très élevée dont la valeur minimale est de 60%. Réduite à quelques Euphorbiacées sur le littoral, la végétation est très rare.

Figure 4:
Variation de la température (T°C) moyenne mensuelle minimale (a) et maximale (b) au
cours de l'année 2002 à Akjoujt, Atar, Nouadhibou et Zouérate.(Source, ASECNA
Mauritanie 2002).

II- Méthodes d'étude

Deux enquêtes de terrain ont été effectuées en février et en septembre 2002.

Deux techniques d'échantillonnage de moustiques adultes ont été utilisées: la capture aux pièges lumineux et la collecte de la faune au repos dans les habitations humaines.

En raison d'un phototactisme positif, l'échantillonnage des populations de moustiques peut être effectué à partir de captures aux pièges lumineux. Des pièges de type CDC (Center of Disease Control, Atlanta) associés avec un dormeur sous moustiquaire ont été utilisés. Les moustiques attirés par la lumière et/ou le dormeur, sont aspirés par un ventilateur et expulsés dans une cage en tulle. Les pièges ont fonctionné de 19 heures à 6 heures du matin. Le piège est composé d'une nasse en tulle moustiquaire. L'ouverture de la nasse est reliée à un système d'aspiration muni d'une source lumineuse. L'ensemble est alimenté par une batterie de six volts. Les pièges ont été placés à 1,50 m du sol, au dessus de la tête du dormeur sous moustiquaire. Dans chaque localité, 18 pièges ont été utilisés par nuit et ont permis de collecter les moustiques au cours de 3 séances consécutives de capture durant chaque enquête, soit un total de 36 pièges-nuits pour les deux enquêtes effectuées dans chaque localité au cours de l'étude.

Cette méthode d'échantillonnage consiste à collecter les moustiques dans leurs lieux de repos, tôt le matin avant l'ouverture des portes et fenêtres des chambres et salons sélectionnés la veille. La technique utilisée est celle des récoltes après pulvérisation de pyrèthre. Après avoir recouvert le plancher de draps blancs et fermé toutes les issues de la pièce, on procède à une pulvérisation de pyréthrinoïdes (YOTOX^®). Au bout de 10 minutes d'attente, les moustiques tombés sont prélevés à l'aide de pinces souples dans des boîtes de pétri. Sur chaque boîte sont reportés un numéro et un indice correspondant respectivement à la localité et à la chambre. Dans chaque localité, 10 chambres ont été prospectées lors de chacune des deux enquêtes, soit un total de 20 chambres prospectées par site pendant les deux enquêtes.

Sur le terrain, les moustiques capturés ont été identifiés morphologiquement sous la loupe binoculaire à partir de clés de détermination (GILLIES & DE MEILLON, 1968 ; GILLIES & COETZEE, 1987 ; HUANG, 2001).

Après identification, les moustiques adultes récoltés ont été placés individuellement dans des tubes numérotés contenant du silicagel.

Pour chaque gîte, les larves de moustiques récoltées au cours des séances de prospection larvaire ont été conservées dans des tubes à hémolyse bouchés contenant de l'alcool 70°. Le lieu et la date de capture des larves ont été indiqués sur les tubes. Les larves d'Anophelinae ont été séparées de celles de Culicinae.

Les larves de moustiques de stade 3 et 4 ont été montées au laboratoire entre lame et lamelle et déterminées sous le microscope.

- Sur une lame porte objet, déposer une goutte de PVA (Polyvinylalcool). - Prélever une larve de stade 3 ou de stade 4.

- Inscrire au crayon sur la plage polie de la lame le lieu, la date et le gîte prospecté. - Garder dans une étuve à 30 ou 35°C pendant 72 heures.

Les larves montées entre lame et lamelle ont été morphologiquement identifiés (genre et espèce) sous la loupe binoculaire à partir de clés de détermination (GILLIES & DE MEILLON, 1968 ; GILLIES & COETZEE, 1987 ; HUANG, 2001).

Chapitre III :

I- Etude Larvaire

Six types de gîtes larvaires différents ont été observés dans les localités visitées. A chaque type de gîte décrit, nous avons attribué la lettre G suivie d'un indice allant de 1 a 6.

2. Distribution des différents types de gîtes prospectés selon les localités

Aucune des localités visitées n'a présenté a la fois les six types de gîtes décrits ci-dessus. Au total, 68 gîtes larvaires ont été prospectés, 11 a Akjoujt, 26 a Zouerate, 10 a Nouadhibou, 8 a Atar et 13 a Tergîte (Tableau 2).

Tableau 2 :
Nature et nombre de gîtes prospectés par localité visitée. Mauritanie 2002.

Nombre de gîtes larvaires prospectés et proportion de gîtes positifs selon la localité
visitée. Mauritanie 2002.

Au total, 248 larves et 37 nymphes de moustiques ont été collectées dans les 6 gîtes trouvés positifs. Le montage et la détermination des larves a permis d'identifier 198 (79,8%) larves de Culicinae et 50 (20,2%) larves d'Anophelinae (Tableau 4). Toutes les larves d'Anophèles ont été récoltées à Tergîte. Les 198 larves de Culicinae ont été collectées à partir 3 différents types de gîtes : G1, G2 et G5 (Tableau 4). A Tergite, les larves d'anophèles représentent 37,9% des collectes de stade pré-imaginaux de moustiques (50/147).

Nombre de larves et de nymphes récoltés dans chaque type de gîte, selon la localité.

	Gîtes larvaires			Récoltes larvaires		TOTAL
localités	Nbre de gîtes positifs	Type de gîte positif	larves de culicidés	larves Anophélinés	nymphes	TOTAL
Zouérate	0	_	0	0	0	0
Nouadhibou	2	G1	16	0	4	20
Akjoujt	1	G2	68	0	18	86
Atar	1	G2	32	0	0	32
Tergîte	2	G2, G5	82	50	15	147
TOTAL	6		198	50	37	285

II- Les moustiques adultes

Les deux méthodes d'échantillonnage utilisées ont permis de récolter un total de 1016 moustiques appartenant à 3 genres (Aedes, Anopheles et Culex). Le genre Anopheles, représenté par An. rhodesiensis, a constitué 16,3% (166/1016) des collectes. Les genres Culex et Aedes étaient respectivement représentés par Culex quinquefasciatus et Aedes vexans et correspondaient à 78,9% (801/1016) et 4,8% (49/1016) des collectes.

A Atar, 246 Culex quinquefasciatus, 50 Anopheles rhodesiensis et 17 Aedes vexans ont été capturés. A Tergîte, les valeurs correspondantes ont été de 34, 116 et 32 respectivement pour Culex quinquefasciatus, Anopheles rhodesiensis et Aedes vexans. Seul Culex quinquefasciatus a été collecté à Akjoujt (46), Nouadhibou (279) et Zouérate (196) (Tableau 5).

Tableau 5 :
Richesse spécifique et abondance des espèces capturées selon les sites d'étude.

Des 1016 moustiques collectés, 696 ont été récoltés en faune résiduelle (Zouérate : 130; Nouadhibou : 250; Atar : 214 et Tergîte : 102) et 320 capturés aux pièges lumineux (Akjoujt : 46; Zouérate : 66; Nouadhibou : 29; Atar : 90 et Tergîte : 88) (Tableau 6).

A Akjoujt, Nouadhibou et Zouérate, Cx. quinquefasciatus a représenté 100% des collectes de moustiques à la fois dans les récoltes de la faune matinale résiduelle et dans les captures aux pièges lumineux. A Atar, la proportion de Cx. quinquefasciatus dans les captures aux pièges lumineux et dans les récoltes de la faune au repos a été respectivement de 62,2% et 88,7%. A Tergîte, les valeurs correspondantes ont été de 9,1% et 24,5% (Tableau 6).

La proportion de Aedes vexans à Atar dans les captures aux pièges lumineux et dans les récoltes de la faune au repos a été respectivement de 8,8% et 0,0%. A Tergîte les proportions correspondantes ont été de 22,4% et 20,6% (Tableau 6).

A Atar, la proportion de An. rhodesiensis dans les captures aux pièges lumineux et dans les récoltes de la faune au repos a été respectivement de 28,8% et 11,2%. A Tergîte, les valeurs correspondantes ont été de 67,4% et 55% (Tableau 6).

Tableau 6 :
Richesse spécifique et abondance relative d'An. rhodesiensis, Cx quinquefasciatus et Ae. Vexans selon la méthode de collecte.

		Piége lumineux			Faune au repos
Localités	Cx. quinquefasciatus	An. rhodesiensis	Ae. vexans	Cx. quinquefasciatus	An. rhodesiensis	Ae. vexans
Atar	56 (62,2)	26 (28,8)	8 (8,8)	190 (88,7)	24 (11,2)	0
Tergîte	9 (10,1)	60 (67,4)	20 (22,4)	25 (24,5)	56 (54,9)	21 (20,6)
Akjoujt	46 (100)	0	0	0	0	0
Zouérate	66 (100)	0	0	130 (100)	0	0
Nouadhibou	29 (100)	0	0	250 (100)	0	0
Effectif/espéces	206	86	28	595	80	21
Total		320			696

Sur les 1016 espèces culicidiennes capturées durant cette étude, 671 (66,04%) l'ont été en février 2002 et 345 (33,95%) en septembre 2002. En février 2002, Cx. quinquefasciatus, An. rhodesiensis et Ae. vexans ont représenté respectivement 93,7%, 4,2% et 2,1% (Tableau 7). Les proportions étaient respectivement de 50,0%, 40,0% et 10,0% en septembre 2002 (Figure 5).

Figure 5 :
Variations saisonnières (toutes localités confondues) de l'abondance relative de An.

A Akjoujt, Nouadhibou et Zouérate, seules les captures effectuées en fin de saison des pluies (octobre 2001) ont été productives (Tableau 7). Des 314 moustiques collectés à Atar, 122 (38,8%) et 192 (61,2%) l'ont été respectivement en février et en septembre. A Tergîte, 28 (15,5%) et 153 (84,5%) moustiques ont été collectés respectivement durant les même période (Tableau 7). A Tergîte et à Atar les captures de septembre ont été plus productives.

Cx. quinquefasciatus a représenté 100% des captures en février à Akjoujt, Nouadhibou et Zouérate. A Atar, Cx. quinquefasciatus a représenté 85,2% et 74,5% des moustiques collectés respectivement en février et en septembre. A Tergîte, les proportions de Cx. quinquefasciatus en février et septembre étaient respectivement de 14,3% et 19,0% (Tableau 7).

A Atar, Ae. vexans a représenté respectivement 8,2% et 3,6% des moustiques collectés en février et septembre. A Tergîte, cette espèce a représenté 14,3% et 18,3% des moustiques collectés au même période (Tableau 7).

A Atar, An. rhodesiensis a représenté 6,6% et 21,9% des moustiques collectés respectivement en février et septembre. A Tergîte, les proportions correspondantes ont été aux mêmes périodes de 71,4% et 62,7% (Tableau 7).

Pour les 36 pièges-nuits et les 20 chambres traitées, le nombre moyen de femelle de moustiques par piège-nuit (FPN) et par chambre prospectée (FRC) a été respectivement de 8,9 FPN et 34,8 FRC. Le ratio FRC/FPN est 3,9.

Le nombre moyen de femelle de Culex quinquefasciatus par piège-nuit et par chambre prospectée était respectivement de 5,7 FPN et 29,7 FRC. A Akjoujt, Nouadhibou, Zouérate, le nombre moyen de femelles par piège-nuit a été respectivement de 1,2 FPN, 0,8 FPN et 1,8 FPN. Le nombre moyen de femelles par chambre prospectée a été de 0,0 FRC, 12,5 FRC et 6,5 FRC. A Atar et Tergîte, le nombre moyen de femelles par piège-nuit a été respectivement de 6,8 FPN et 0,9 FPN et le nombre moyen de femelles au repos par chambre prospectée a été 12,3 FRC et 1,6 FRC (Tableau 10). Les variations du nombre de femelles d'An. rhodesiensis par piège-nuit et par chambre prospectée en février et septembre sont indiquées dans le (Tableau 8).

Tableau 7 :
Abondance relative de Cx. quinquefasciatus, An. rhodesiensis et Ae. Vexans selon la localité et la période de capture des moustiques.

		Février		TOTAL		Septembre		TOTAL
	Cx. quinquefasciatus	An. rhodesiensis	Ae. vexans		Cx. quinquefasciatus	An. rhodesiensis	Ae. vexans
Atar	104 (85,2)	8 (6,6)	10 (8,2)	122	143 (74,5)	42 (21,9)	7 (3,6)	192
Tergîte	4 (14,3)	20 (71,4)	4 (114,3)	28	29 (19,0)	96 (62,7)	28 (18,3)	153
Akjoujt	46 (100)	0	0	46	0	0	0	0
Nouadhibou	279 (100)	0	0	279	0	0	0	0
Zouérate	196 (100)	0	0	196	0	0	0	0
TOTAL	629	28	14	671	172	138	35	346

Le nombre moyen de femelles d'Ae. vexans par piège-nuit et par chambre prospectée pour toutes localités confondues a été respectivement de 0,7 FPN et 0,6 FRC A Atar, les valeurs correspondantes ont été respectivement de 0,2 FPN et 0,4 FRC. A Tergîte les valeurs correspondantes ont été respectivement de 1,1 FPN et 2,0 FRC (Tableau 10). La variation du nombre de femelles d'An. rhodesiensis par piège-nuit et par chambre traitée lors de chaque sortie est indiquée dans le tableau 8.

Le nombre moyen de femelles par piège-nuit et par chambre prospectée a été respectivement de 2,4 FPN et 4 FRC. A Atar, le nombre moyen de femelles par piège-nuit et par chambre prospectée a été respectivement de 1,4 FPN et 2,5 FRC. A Tergîte, les valeurs correspondantes ont été de 3,2 FPN et 5,8 FRC (Tableau 10). La variation du nombre de femelles d'An. rhodesiensis par piège-nuit et par chambres traitées lors de chaque sortie est indiquée dans le tableau 9.

Variation du nombre moyen de femelles de Cx. quinquefasciatus par piège-nuit et par
chambre traitée selon la localité et la période de collecte des moustiques.

	Faune matinale résiduelle			Pièges lumineux
	février	septembre	TOTAL	février	septembre	TOTAL
Atar	86 (8,6)	109 (10,9)	195 (9,75)	18(1,0)	34 (1,8)	52 (1,4)
Tergîte	4 (0,4)	20(2,0)	24 (1,2)	0 (0,0)	9 (0,5)	9 (0,6)
Akjoujt	0 (0,0)	0 (0,0)	0 (0,0)	46 (2,5)	0 (0,0)	46 (1,3)
Zouérate	130 (13,0)	0 (0,0)	130 (6,5)	66 (3,6)	0 (0,0)	66 (1,8)
Nouadhibou	250 (25,0)	0 (0,0)	250 (12,5)	29 (1,6)	0 (0,0)	29 (0,8)

Variation du nombre moyen de femelles d' Ae. vexans par piège-nuit et par chambre
traitée selon la localité et la période de capture des moustiques.

Variation du nombre moyen de femelles d'An. rhodesiensis par piège-nuit et par
chambre traitée selon la localité et la période de capture des moustiques.

A Akjoujt, Nouadhibou et Zouérate où une seule espèce culicidienne Cx. quinquefasciatus a été capturée, le ratio faune matinale/pièges lumineux est respectivement de 0, 15,6 et 3,6. A Atar ce ratio a été de 1,8, 1,7, et 2 pour respectivement Cx. quinquefasciatus, An. rhodesiensis et Ae. Vexans. A Tergîte, les valeurs correspondant étaient 1,8, 1,8 et 1,8 (Tableau 11).

Comparaison des densités moyenne des femelles d'An. rhodesiensiss, d'Ae. vexans et de
Cx. quinquefasciatus par pièges lumineux et par chambres selon la localité d'étude.

FPN : nombre moyen de femelle par pièges et par nuit. FRC : nombre moyen de femelle au repos par chambres traitées

Ratio des densités moyennes d'An. rhodesiensiss, d'Ae. vexans et de Cx. quinquefasciatus
à Atar et Tergîte.

Les cas de paludisme enregistrés dans les centres de santé du nord de la Mauritanie posent la question de leur origine autochtone ou allochtone. En effet, puisqu'il est admis que le paludisme sans anophélisme n'existe pas, seules des investigations entomologiques pourraient aider à élucider cette situation. Le travail présenté dans ce mémoire s'inscrit dans cette optique. Le recours à la combinaison pièges lumineux/dormeur sous moustiquaire a été préféré à la classique méthode de captures sur homme adulte volontaire d'une part pour des raisons éthiques (exposition aux piqûres infectantes des moustiques) et d'autre part, des études comparatives récentes ont montré une bonne corrélation entre ces deux techniques d'échantillonnage. La méthode de récoltes après pulvérisation intradomiciliaire de pyréthrinoïdes permet de mieux cibler les espèces endophiles. La prospection des gîtes larvaires potentiels a été réalisée dans le but de mieux décrire, inventorier et établir une relation entre le type de gîte et le genre de larve de moustique qui y est rencontré. Cette relation pourra être utile dans la perspective de la mise en place d'une politique de lutte antilarvaire à grande échelle en milieu désertique de la Mauritanie. D'ailleurs, une telle lutte à petite échelle a déjà été initiée par la GTZ (Coopération Allemande) dans le sud-est du pays, en utilisant la poudre de Neem (Azadirachta indica, Meliaceae). Cette intervention dont les résultats ont été très nuancés n'a pas été précédée d'études de terrain détaillées sur les potentiels gîtes larvaires de moustiques.

Six types de gîtes larvaires ont été décrits dans cette étude. Une attention particulière a été portée aux réservoirs métalliques d'eau et aux bassins des jardins maraîchers qui sont dans certains pays, d'excellents gîtes larvaires pour les anophèles. En effet, L'urbanisation galopante observée dans les régions tropicales attire l'attention sur le paludisme urbain. Ainsi en Inde, il existe un paludisme urbain alors que la campagne environnante en est indemne. Le vecteur de ce paludisme urbain est An. stephensi dont les larves se développent dans les citernes d'eau des maisons (MOUCHET & BELLEC, 1990). Au Sénégal, les céanes (puits sans margelle utilisés pour les activités maraîchères) de la région de Dakar constituent des gîtes hébergeant les stades préimaginaux d'An. arabiensis (AWONO-AMBENE, 1996). Au cours de ces prospections, aucune des localités visitées n'a renfermé à la fois les six types de gîtes larvaires décrits. Le taux de positivité des gîtes larvaires n'a été que de 8,8%. La productivité moyenne des gîtes larvaires (nombre moyen de larves récoltées par coup de bac) la plus faible a été enregistrée à Nouadhibou (0,4 larve/coup de bac) et la plus élevée à

Akjoujt (1,7 larves/coup de bac). Une explication possible à ces observations serait la prédominance de gîtes larvaires défavorables au développement larvaire en milieu désertique où seuls quelques rares gîtes sont colonisés par les larves de moustiques. En effet, des 6 types de gîtes décrits, seuls 3 renfermaient des gîtes larvaires positifs avec un taux de positivité d'environ 1/8. Toutes les larves d'anophèle proviennent d'un seul et même gîte de type G5 où aucune larve de Culicinae n'a été prélevée. Les gîtes de type G2 ont été plus productifs que les gîtes de types G1 (92% des larves proviennent de gîtes de type G2 contre seulement 8% de gîte de type G1). Ces deux types de gîtes (G1 et G2) sont quelque fois rencontrés dans les mêmes milieux. Leur différence de productivité pourrait être due à la présence de flore constituée d'algues et de champignons observés à la surface des gîtes de type G1. L'analyse de la qualité (physico-chimique) de l'eau de ces deux types de gîtes fournirait de plus amples informations.

Jusqu'en 1962, seul An. dthali était connu à Atar. HAMON et al., (1964) signalent la présence An. pharoensi et An. squamosus. Les moustiques récoltés durant ces investigations appartenaient à 3 genres, chaque genre étant représenté par une espèce. De 3 espèces à Atar et Tergîte, la richesse spécifique est tombée à une espèce à Akjoujt, Nouadhibou et Zouérate. La pauvreté spécifique de la faune culicidienne des régions du nord de la Mauritanie pourrait être due en partie à l'aridité du climat saharien qui y sévit. Les températures trop élevées, l'humidité relative très basse pendant une bonne partie de l'année et l'irrégularité de la pluviométrie constituent entre autres, les principaux facteurs limitants la colonisation de ces milieux. Cette pauvreté spécifique avait été révélée par MOLEZ & FAYE (1996) qui avaient noté une diminution de l'abondance et de la biodiversité culicidienne le long d'un transect allant de la vallée du fleuve Sénégal au plateau du Tagant, région située au sud de l'Adrar. Culex quinquefasciatus dont la présence semble être liée aux activités humaines, a été récolté dans toutes les localités. A Akjoujt, cette espèce n'a pas été récoltée en faune matinale alors qu'elle a été capturée par piège lumineux. An. rhodesiensis, Ae. vexans et Cx. quinquefasciatus coexistent à Atar et Tergîte. Ces prospections qui n'ont pas permis de retrouver An. dthali, An. pharoensis et An. squamosus, ont néanmoins confirmé la présence d'An. rhodesiensis dans l'Adrar, présence qui avait été personnellement communiquée à HAMON par Maffi (HAMON et al., 1964). Cependant, Hamon et al (1964) situaient la limite nord d'An. rhodesiensis dans le Tagant, région limitrophe de l'Adrar. Le nord de la Mauritanie serait ainsi caractérisé par l'absence à la fois des vecteurs classiques de

Plasmodium du Sahara central et septentrional (An. hispaniola Theobald, An. multicolor cambouliu et An. sergenti Theobald) et de ceux de l'Afrique subsaharien (An. arabiensis, An. gambiae s.s et An. funestus) et surtout par la présence d'une population d'An. rhodesiensis. C'est probablement l'absence des classiques vecteurs du Sahara central et septentrional qui explique la faiblesse de l'endémicité palustre dans les régions désertiques du nord de la Mauritanie. Dans le contexte géo-climatique nord mauritanien, l'existence d'une transmission anophélienne de Plasmodiums humains par An. rhodesiensis, seule espèce trouvée dans l'Adrar, n'est pas à exclure.

Avec 68,5% des spécimens collectés dans la faune matinale résiduelle contre 31,5% capturés aux pièges lumineux, le rendement a varié avec la méthode d'échantillonnage. La tendance endophile des moustiques du nord de la Mauritanie est manifeste à partir de ces résultats. En effet, le ratio FRC/FPN est d'environ 4. Cette forte densité de moustiques endophiles en milieu désertique peut s'expliquer par la recherche d'humidité et de fraîcheur dans les habitations humaines. Ce comportement peut être une forme d'adaptation écologique propre aux espèces de ce milieu aride. Le caractère endophile des moustiques du nord de la Mauritanie pourrait justifier une politique de lutte antivectorielle par pulvérisation intradomiciliaire d'insecticide. L'abondance des moustiques a varié selon les périodes de capture. Le maximum de moustiques a été récolté en février mais An. rhodesiensis et Ae. vexans ont été plus abondants en septembre. Une justification possible de cette observation est que le mois de février fait suite aux pluies tardives de janvier tandis que le mois de septembre, correspond à la saison des pluies dans l'Adrar où, contrairement au sud de la Mauritanie, il n'est pas aisé de délimiter dans le temps la saison sèche de la saison des pluies.

Introduction

En dépit des efforts consentis depuis les travaux de ROSS (1897) et de MANSON (1898) sur la transmission vectorielle, le paludisme demeure un problème de santé publique avec 300 à 500 millions de cas cliniques dont 1,5 à 2,7 millions de décès annuels. Il constitue aussi un obstacle au développement des pays endémiques. L'estimation des pertes directes ou indirectes dues au paludisme en Afrique est de 2000 millions de dollars (WHO, 2000). La lutte pour son éradication a jadis ciblé la destruction de l'agent pathogène et la suppression du vecteur. L'apparition de la résistance de P. falciparum aux antimalariques (CHARMOT et al., 1991) ainsi que celle des vecteurs au DDT et à la dieldrine (COOSEMANS & CARNEVALE, 1995) ont rendu difficile l'atteinte de cet objectif. Toutefois, la découverte de nouveaux médicaments (Artheméther et Pyronaridine) a redonné de l'espoir dans la chimiothérapie du paludisme. Le contrôle des vecteurs à travers la réduction du contact homme/vecteur est aujourd'hui une composante importante de la stratégie de lutte contre le paludisme. Le recours à un insecticide efficace permet un tel contrôle comme en témoigne les campagnes de lutte contre l'invasion du Brésil par An. gambiae s.l (KILLEEN et al., 2002) et contre l'onchocercose en Afrique de l'Ouest (DADZIE et al., 1990). Cependant l'utilisation croissante des pyréthrinoïdes s'est heurtée à des phénomènes de résistance du vecteur dont les premières observations ont été faites en Côte d'Ivoire et au Kenya (ELISSA et al., 1993; VULULE et al., 1994). Par la suite, la résistance d'An. gambiae s.l. aux pyréthrinoides a été notée dans d'autres pays d'Afrique de l'Ouest, notamment au Burkina Faso et au Bénin (CHANDRE et al., 1999 ; AKOGBETO & YAKOUBOU, 1999). Au Sénégal, on note une relative baisse de rapidité d'action des pyréthrinoïdes sur An. gambiae s.l, plus marquée pour la deltaméthrine (KONATE et al., 2002). L'extension de cette résistance à d'autre pays n'est pas à exclure en raison de la pression de sélection induite par les pesticides en agriculture (CHANDRE et al., 2001) d'une part et d'autre part, de la survenue à plus ou moins long terme d'une résistance des cibles aux insecticides utilisés dans tout programme de lutte antivectorielle basé sur des applications répétées d'insecticides.

La stratégie de lutte antivectorielle du Programme National de Lutte contre le Paludisme (PNLP) est basée sur l'utilisation des moustiquaires imprégnées de pyréthrinoïdes. Les campagnes de vulgarisation de cet outil ont été lancées depuis 1995 dans les cinq sites sentinelles du PNLP où le paludisme est stable et où aucune étude n'a été réalisée à ce jour sur la sensibilité des vecteurs du paludisme aux insecticides. Ceci a conduit le PNLP à procéder à l'évaluation de la sensibilité des vecteurs du paludisme à la dose diagnostique de la perméthrine (0,75%) et de la deltaméthrine 0,05%) dans ses sites sentinelles. La détermination

de la susceptibilité des vecteurs aux produits promus et vulgarisés ainsi que celle des implications opérationnelles qui l'accompagnent sont nécessaires à l'élaboration d'une bonne politique des insecticides. C'est dans ce cadre que s'inscrit la présente étude.

CHAPITRE I :

I- Sites d'étude.

Boghé, Sélibaby, Kankossa, Aïoun et Rosso (Figure 2) sont les cinq sites sentinelles du PNLP de la Mauritanie et ont été choisis pour cette raison.

Boghé, Rosso et Sélibaby sont respectivement à 280 km, 205 km et 700 km au sud de Nouakchott, en zone de paludisme stable. Il n'existe pas de station météorologique à Sélibaby. La pluviométrie moyenne annuelle à Boghé et Rosso était de 300 - 800 mm avant les années de sécheresse. En 2002, année de l'étude, elle était respectivement de 120,3 mm et 156,3 mm pour 9 et 18 jours de pluies à Boghé et Rosso (Figure 1a). Boghé est dans la moyenne vallée du fleuve Sénégal tandis que Rosso situé à 75 km du barrage de Diama, est dans le delta du fleuve Sénégal. A Boghé et Rosso la riziculture irriguée est dominante tandis que la polyculture vivrière sous pluies prédomine à Sélibaby situé sur la frontière mauritanomalienne.

Kankossa et Aoïun sont respectivement à 750 km et 850 km au sud-est de Nouakchott, loin du fleuve Sénégal. Ces sites sont situés en zone sahélienne. La pluviométrie moyenne annuelle variait de 100 à 300 mm à Aïoun avant les années de sécheresse. Il n'existe pas de station météorologique à Kankossa qui est traversé par le Karakoro, un affluent du fleuve Sénégal en Mauritanie. A Aïoun, la pluviométrie moyenne annuelle en 2002 était de 187,6 mm (Figure 1b). Cette quantité d'eau est tombée en 26 jours. C'est une zone de pâturage où on pratique l'élevage et l'agriculture sous pluie.

Carte montrant les sites d'étude et les différentes zones bioclimatiques du Sud et sud-est
de la Mauritanie. S1 : Rosso, S2 : Boghé, S3 : Sélibaby, S4 : Kankossa et S5 : Aïoun.

Figure 1 :
Variation de la pluviométrie moyenne mensuelle à Boghé et Rosso (a) et à Aïoun (b).
Source ASECNA Mauritanie, 2002.

II- Méthode d'étude

Les kits de l'OMS ont été utilisés pour la réalisation des tests de sensibilité. Ce kit est composé de :

Lors du test, les cylindre-tests OMS ont été maintenus en position verticale. Les moustiques récoltés sur le terrain ont été regroupés dans une cage cubique de 50 cm de côté recouverte de tulle. Après identification à l'aide d'une loupe à main, les moustiques à tester ont été prélevés délicatement avec un aspirateur à bouche et transférés dans le tube d'attente dépourvu de papier imprégné pour une période de 1 à 2 heures (période de pré-test), ce qui permet de ne prendre en compte que les spécimens aptes au test. Ces derniers sont répartis par lots de 25 femelles exposées pendant 60 mn à un papier imprégné placé dans un tube. Quatre papiers de perméthrine ont été utilisés dans chaque site. Les tests avec la deltaméthrine ont été effectués à Boghé et Rosso. Après 10 mm d'exposition, les tubes sont délicatement soulevés pour compter le nombre de spécimens knock down (KD) qui sont au fond du tube. Le décompte des femelles KD a été effectué après 10, 15, 20, 30, 40, 50 et 60 mm d'exposition. A la fin de l'exposition, les moustiques sont transférés dans les tubes d'observation où ils restent pendant 24 heures (période d'observation). Au cas ou il y'a moins de 80% de KD à la fin des 60 mm d'exposition, un autre décompte de KD est effectué 20 mm après le début de l'observation (soit 80 mm après le début de l'exposition). Le décompte du KD à différentes périodes a permis de déterminer la droite de régression sur papier log-probit et de déterminer graphiquement les _KDT50^et_KDT95 qui indiquent le temps pour lequel 50% et 95% des moustiques testés sont respectivement abattus.

Les tests de perméthrine ont portés sur des échantillons d'An. gambiae dans tous les sites sauf à Kankossa en raison d'un effectif insuffisant. Pour An. pharoensis les tests de perméthrine ont été effectués sur des femelles capturées à Boghé et Rosso. Les tests de deltaméthrine ont été réalisés sur des femelles d'An. pharoensis récoltées à Boghé. Pour An. gambiae s.l le nombre de répliques avec la perméthrine a été de 4 à Boghé et Rosso, et 5 à Sélibaby et Aïoun. Pour An. pharoensis, il a été de 4 répliques par site. Le nombre de répliques effectuées avec la deltaméthrine a été de 3 répliques à Boghé. Tous les tests de sensibilité ont été réalisés sur le terrain où un lot de 25 moustiques de la même espèce que ceux testés a servi de témoin.

III- Traitement des moustiques.

La détermination des espèces du complexe Anopheles gambiae, la fréquence des formes moléculaires M et S et la recherche du gène Knock down résistance (kdr) chez An. gambiae s.s ont été effectuées. Par ailleurs, la recherche d'infection chez les spécimens d'An. gambiae s.l. testés a été effectuée par ELISA-CSP.

La recherche d'infection a été effectuée par la technique ELISA selon le protocole décrit par BURKOT et al., (1984) et modifié par WIRTZ et al., (1987). Cette technique consiste a bloquer l'antigéne circumsporozoïtique (CSP) entre un anticorps monoclonal de capture antiCSP et un autre anticorps monoclonal anti-CSP conjugué à la peroxydase. L'identification est faite en deux phases. La première est un screen qui permet d'identifier les moustiques infestés sans tenir compte de l'espèce plasmodiale. La seconde dite monospécifique, permet de confirmer l'infestation et d'identifier l'espèce plasmodiale en cause. En raison de la présence probable de P. vivax en Mauritanie, la recherche de la CSP a été faite pour P. falciparum, P. malariae, P. vivax et P. ovale. Trois étapes sont nécessaires pour la mise en évidence de cette protéine :

2.2. Principe de l'identification des espèces du complexe Anopheles gambiae par PCR

La détermination spécifique des membres du complexe An. gambiae a été effectuée par PCR (réaction de polymérisation en chaîne) selon le protocole décrit par SCOTT et al., (1993). Cette technique consiste à copier jusqu'à un milliard de fois le fragment de génome que l'on désire étudier en utilisant le principe de la duplication observé in vivo dans la cellule : la

duplication de l'ADN dans le cellule a lieu juste avant la mitose sous l'action d'une enzyme ; l'ADN polymérase. Après séparation des deux brins complémentaires (dénaturation), les fragments d'ARN ou amorces s'apparient à leur séquence complémentaire au niveau de chaque brin d'ADN. L'ADN polymérase ajoute des nucléotides à chaque amorce, aboutissant à la formation d'une copie complémentaire de chaque brin d'ADN. On obtient ainsi deux nouvelles molécules d'ADN identique à la molécule initiale : on parle de polymérisation.

La PCR utilisée repose sur le même principe, à la différence qu'elle utilise deux amorces sous formes de brin simple d'ADN. Cette technique comprend trois étapes principales :

- la dénaturation de l'ADN qui se fait à des températures variant entre 90 et 97°C pendant 15 à 30 secondes.

- l'extension des amorces sous l'action des ADN polymérases. Au cours de cette phase, la température est portée à 72°C. Cette température favorise l'ouverture de la double hélice d'ADN. l'ADN polymérase thermostable : la taq polymérase ajoute des nucléotides. Cette enzyme est tirée d'une bactérie Archéobactérie, Thermus aquaticus vivant dans les sources thermales entre 80 et 90°C (KAPLAN & DELPECH, 1993).

2.3. Identification des formes moléculaires et recherche du gène Knock Down (Kdr) au sein d'Anopheles gambiae s.s.

Dans le cadre d'une collaboration entre le PNLP de la Mauritanie et le Malaria Research and Training Cennter (MRTC, Bamako, Mali), les échantillons d'An. gambiae s.l ont été analysés à Bamako. Les résultats des analyses pour la forme moléculaire et la recherche du gène Kdr nous ont été envoyés.

CHAPITRE II:

I- Faune anophélienne

Seul An. gambiae s.l a été capturé dans tous les sites. A Rosso et à Boghé, il était associé à An. pharoensis (tableau 1).

Tableau 1 :
Composition et proportion respective des différentes espèces dans l'échantillon
d'anophèles capturés et testés dans chaque localité.

Espèces Localités	*An. gambiae s.l*		*An pharoensis*		Total
Espèces Localités	effectif	pourcentage	Effectif	pourcentage	Total
Sélibaby	125	100	0	0	125
Rosso	100	36,4	175	63,6	275
Boghé	100	50	100	50	200
Aioun	125	100	0	0	125
Kankossa	11	100	0	0	11
Total	461	62,6	275	37,4	736

Aucune infection n'a été notée chez les 461 femelles d'An. gambiae sl récoltés qui ont toutes été testées en PCR pour la détermination des espèces qui composent ce complexe. An. arabiensis a représenté 97,2% (448/461) des spécimens dans les échantillons testés contre seulement 2,8%(13/461) pour An. gambiae s.s. (tableau 2). Avec 10 des 13 spécimens (77%) récoltés à Boghé contre seulement 3 récoltés à Aioun, An. gambiae s.s. est concentré dans la vallée du fleuve Sénégal. Seule la forme moléculaire M homozygote S/S (absence du gène kdr) d'An. gambiae s.s. a été trouvée.

Tableau 2 :
Résultats de la PCR des 461 An. gambiae sl récoltés dans les cinq sites d'étude.
Fréquence d'An. arabiensis et An. gambiae ss touts sites confondues et pour chaque sites
d'étude.

Sites	Sélibaby	Rosso	Boghé	Aïoun	Kankossa
Nombre An. gambiae s.l capturés	125	100	100	125	11
Nombre An. gambiae s.l testés	125	100	100	125	11
Nombre An. gambiae s.s identifiés			10	3
Nombre An. arabiensis identifies	125	100	90	122	11
% An. gambiae s.s			10%	2,4%
% An. arabiensis	100	100	90	97,6	100

II. Sensibilité à la perméthrine (0,75%) et à la deltaméthrine (0,05%)

La température et l'humidité relative ayant prévalu dans chaque site pendant les tests sont représentées dans le tableau 3. A Sélibaby, une augmentation de 3°C de la température a été notée au cours de la période d'observation (tableau 3).

Tableau 3:
Variation de la température et de l'humidité relative au cours de l'exposition et de la
période d'observation des femelles d'An. gambiae sl et d'An. pharoensis. Octobre 2002.
Mauritanie.

A la dose discriminante de 0,75% la mortalité a été totale pour tous les spécimens d'An. gambiae s.l. exposés à la perméthrine, excepté à Boghé où sur les 100 femelles testées, une était vivante après 24 heures d'observation.(Tableau 4).

A Boghé et Rosso, la mortalité était totale pour les femelles d'An. pharoensis testées. (Tableau 4).

Les tests à la deltaméthrine ont été effectués seulement à Rosso. Ils ont porté sur les seules femelles d'An. pharoensis dont la mortalité a été totale à la dose discriminante de 0,05% (Tableau 5).

Tableau 4 :
Taux de mortalité d'An. gambiae sl et d'An. pharoensis obtenus 24 heures après une
heure d'exposition à la perméthrine 0,75%, à Boghé, Sélibaby, Aïoun et Rosso. Octobre
2002 Mauritanie.

		*An. gambiae sl*			*An. pharoensis*
	Boghé	Sélibaby	Aioun	Rosso	Boghé	Rosso
Témoins Morts Vivants Mortalité % Effectif testé KD après :	25 0 25 0% 100	25 0 25 0% 125	25 0 25 0% 125	25 0 25 0% 100	25 0 25 0% 100	25 0 25 0% 100
10 mm	55	42	23	49	55	47
15 mm	73	95	71	82	69	70
20 mm	95	116	112	93	96	99
30 mm	97	121	122	98	100	100
40 mm	99	125	125	100	100	100
50 mm	99	125	125	100	100	100
60 mm	99	125	125	100	100	100
Morts après 24 heures	99	125	125	100	100	100
Vivants après 24 heures	1	0	0	0	0	0
Mortalité %	99%	100%	100%	100%	100	100%
Mortalité corrigée %	NR*	NR*	NR*	NR*	NR*	NR*

Les temps de Knock Down (KDT) ont été déterminés à partir de la droite de régression obtenue sur papier log probit. Les _KDT50^et_KDT95 correspondent respectivement au temps pour lequel 50% et 95% des spécimens sont abattus (Knocked down).

Taux de mortalité d'An. pharoensis,obtenus 24 heures après une heure d'exposition à la
deltaméthrine 0,05%, à Rosso. Octobre 2002 Mauritanie.

	An. pharoensis
	Rosso
Témoins	25
Morts	0
Vivants	25
Mortalité %	0%
Total testé	75
KD après :
10 mm	52
15 mm	75
20 mm	75
30 mm	75
40 mm	75
50 mm	75
60 mm	75
Morts après 24 heures	75
Vivants après 24 heures	0
Mortalité %	100
Mortalité corrigée %	NR*

Le KDT50 minimum obtenu avec la perméthrine était de 10 mn à Boghé. Il était de 15 mn dans les autres sites (Tableau 6).

La valeur du _KDT95 a été le double de celle obtenue pour le _KDT50 dans chaque site.

Temps de Knock Down et taux de mortalité d'An. gambiae sl obtenus avec la perméthrine 0,75% selon la localité d'origine des femelles. Octobre 2002 Mauritanie.

Le _KDT50 obtenu avec la perméthrine a été relativement plus faible à Boghé (10 mn) qu'à Rosso (15 mn) où le _KDT50 obtenu avec la deltaméthrine a été de 10 mn (Tableau 7).

Dans chacun des deux sites, la valeur du _KDT95 a été supérieure de 5 mn à celle du KDT50 obtenue.

Tableau 7 :
Temps de Knock Down et taux de mortalité d'An. pharoensis obtenus avec la
perméthrine 0,75% (Boghé et Rosso) et la deltaméthrine 0,05% (Rosso), Octobre 2002,
Mauritanie.

Pour la perméthrine, le ratio KDT _95/KDT50 a été de 2 pour An. gambiae s.l. dans tous les sites étudiés. Les valeurs correspondantes pour An. pharoensis ont été de 1,5 et 1,3 respectivement à Boghé et Rosso (Tableau 8).

Tableau 8
Ratio KDT95 / KDT50 d'An. gambiae sl et An. pharoensis selon l'insecticide et la ^localitéd'origine des femelles.

La sensibilité aux insecticides peut être étudiée sur les larves ou les adultes des vecteurs anophéliens. En raison du faible recours aux mesures de lutte antilarvaire en Mauritanie (un seul site pilote à Aïoun), le choix a été porté sur les moustiques adultes sauvages récoltés sur le terrain. Pour ces tests, les kits de l'OMS ont été préférés à la bouteille d'essai mise au point par le CDC d'Atlanta (Center for Disease Control). Les deux insecticides testés dans cette étude sont des pyréthrinoïdes de synthèse. Un seul des deux aurait pu servir pour les tests, du fait que toute résistance constatée avec un insecticide induit en général une résistance croisée avec tous les insecticides de la même famille et/ou agissant sur le même site (CHANDRE et al., 1999b). La connaissance du statut de chaque vecteur vis-à-vis des différents insecticides est nécessaire à l'élaboration d'une bonne politique des insecticides par le PNLP. La nécessité de cette connaissance explique la réalisation des tests avec les deux insecticides.

La technique de capture directe à l'aide d'aspirateur à bouche utilisée lors de cette étude ne cible que les moustiques endophiles. Seuls An. gambiae sl et An. pharoensis ont été récoltés. An. funestus dont le retour dans la vallée du fleuve a été signalé (KONATE et al., 2001) n'a pas été récolté. Cependant sa présence a été notée dans le Trarza (DIA et al., soumis). Deux (An. gambiae ss et An. arabiensis) des trois espèces ouest Africaines du complexe An. gambiae ont été pour la première fois formellement identifiées dans les sites sentinelles de la Mauritanie. Ces deux vecteurs majeurs du paludisme en Afrique de l'ouest (MOUCHET & CARNEVALE, 1991, FAYE et al., 1993, 1994, 1995 ; KONATE et al., 1994 ; FONTENILLE et al., 1997a,b) ont présenté une répartition spatiale hétérogène. Présent dans tous les sites, An. arabiensis couvre ainsi le sud et le sud-est du pays. Par contre, An. gambiae s.s, représenté par la forme M, semble être confiné à l'extrême sud du pays (Boghé). La zone de recouvrement de ces deux espèces ne semble pas être importante en Mauritanie. Cependant, selon COZ (1973), la zone de recouvrement de ces deux vecteurs est très importante et on les trouve souvent en sympatrie. La prédominance d'An. arabiensis au sein du complexe An. gambiae était attendue en Mauritanie (bordure du Sahara). Elle confirme les observations faites sur la distribution des espèces du complexe An. gambiae (COETZEE et al., 2000).

Aucune femelle infectée n'a été trouvée. En 1963 l'indice sporozoïtique d'An. gambiae s.l ;, dans le Hodh el Garbi (région englobant le site d'Aïoun) était de 0,45% (2/444). Son évaluation avait été faite après dissection des glandes salivaires des femelles (HAMON et al., 1964). En 2003 DIA et al trouvent dans l'Assaba (région englobant le site de Kankossa) un indice de 0,42% (1/239) après des tests d'Elisa-csp, l'unique espèce anophèlienne positive à P. falciparum était An. arabiensis. L'évaluation fiable des indices sporozoïtique dans les sites du PNLP (bordure du Sahara) où la transmission du paludisme est supposée être saisonnière courte nécessite d'une part de tester un grand effectif d'An. gambiae s.l. collecté à différant moment et par différentes techniques et d'autre part de vérifier l'hypothèse de l'existence d'une transmission anophélienne de Plasmodiums humains par des espèces d'Anopheles autres que les classiques vecteurs par exemple An. pharoensis ou An. rhodesiensis. La prédominance d'An. pharoensis dans les récoltes de femelles endophiles dans le delta (63,6% des captures de Rosso) et la moyenne vallée (50% des captures de Boghé), confirment les observations faites sur la rive sénégalaise (FAYE et al., 1995 ; CARNEVALE et al., 1999). La probable implication d'An. pharoensis dans la transmission de P. falciparum dans le delta (CARRARA et al., 1990) explique la détermination de sa sensibilité par rapport aux insecticides testés.

Sensibilité d'An. gambiae s.l. et d'An. pharoensis à la perméthrine et à la deltaméthrine Avant cette étude, le seul cas de résistance à un insecticide documenté en Mauritanie est celui d'An. gambiae sl à la dieldrine à Kaedi (HAMON et al 1964). Les échantillons testées ont présenté une bonne sensibilité tant à la perméthrine qu'à la deltaméthrine. Dans tous les sites, le taux de mortalité obtenu avec les deux insecticides a été quasi-totale, sauf à Boghé où 24 h après exposition à la perméthrine, un spécimen d'An. gambiae sl (An. gambiae ss) a survécu. En raison de l'absence de la mutation kdr chez les tous les spécimens, ce dernier n'a probablement pas été suffisamment en contact avec l'insecticide pour être resté au repos sur l'une des deux parois horizontales du tube. En effet, en position verticale, le papier imprégné d'insecticide est accolé à la paroi verticale du tube.

En zone endémique d'Afrique, l'efficacité expérimentale de la perméthrine et de la deltaméthrine sur papiers imprégnés, en prélude à l'imprégnation des moustiquaires pour la réduction du contact homme vecteur, a été fréquemment démontrée (COOSEMANS et al 2001, KONATE et al., 2002 et BERZOSA et al., 2002).

Les populations d'An. gambaie s.l et d'An. pharoensis de Boghé, testées ont présenté une plus grande sensibilité que ceux de Sélibaby, Aïoun et Rosso par rapport à la perméthrine 0,75%. Dans l'ensemble, les populations d'An. gambiae s.l. de Boghé ont présenté les _KDT50 et KDT95 les plus faibles. Cependant, à mortalité égal, le _KDT95 des populations d'An. pharoensis est plus faible que celui d'An. gambiae s.l. Il apparaît ainsi que les populations anophèliennes de Boghé sont plus sensibles aux insecticides utilisés d'une part et d'autre part, que les populations d'An. pharoensis sont relativement plus sensibles que celles d'An. gambiae sl à la perméthrine 0,75%.CHANDRE et al., (1999) ont trouvé que le temps de Knock down est un bon indicateur pour la détection précoce de la résistance. Il augmente significativement avant l'observation de changement dans le taux de mortalité. Cette observation nécessite la mise en place d'une surveillance de routine dans les sites sentinelles. Néanmoins, les taux de mortalités élevés ainsi que l'absence de la mutation kdr chez An. gambiae s.l. observés au cours de cette étude sont en faveur de la continuation de la stratégie de lutte antivectorielle du Programme National de Lutte contre le Paludisme basée sur l'utilisation de moustiquaires imprégnées de perméthrine et deltaméthrine. Cependant les coûts d'acquisition et de réimprégnation des moustiquaires imprégnées ainsi que le refus de certaines populations à dormir sous moustiquaire constituent des obstacles à la bonne mise en oeuvre de cette stratégie de contrôle du vecteur. Le suivi de la sensibilité des vecteurs ainsi que de leur comportement de piqûre et de repos sont également nécessaires à l'élaboration d'une bonne politique d'insecticides.

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Titre : Faune anophèlienne du Nord de la Mauritanie et sensibilité d'An. gambiae s.l. à la perméthrine (0,75%) et à la deltaméthrine (0,05%) dans les sites sentinelles du Programme National de Lutte contre le Paludisme.

Soutenu le 29 juillet 2005 à 10H dans la salle des travaux pratiques de Biologie Animale

Résume

A la suite du signalement de nombreux cas de paludisme dans les régions du Nord de la Mauritanie, un inventaire de la faune culidienne y a été réalisé. Trois espèces de moustiques non encore incriminées dans la transmission du paludisme ont été récoltées. Il s'agit d'An. rhodesiensis, d'Ae. vexans et Cx. quinquefasciatus. Les gîtes larvaires, peu nombreux et peu productifs, sont constitués de bassins maraîchers et de marelles alimentées par l'eau de sources ou de pluies. Malgré son caractère d'espace transitionnel, le Nord de la Mauritanie serait ainsi caractérisé par l'absence à la fois des vecteurs classiques de Plasmodium du Sahara central et septentrional (An. hispaniola, An. multicolor et An. sergenti) et de l'Afrique sud saharienne (An. arabiensis, An. gambiae s.s. et An. funestus).

Dans les régions du sud et sud-est abritant les sites sentinelles du PNLP, An. arabiensis et An gambiae s.s. ont été les espèces identifiées au sein du complexe An. gambiae. La détermination du taux d'infection n'a révélé aucune infection. An. arabiensis présente une large répartition tandis que An. gambiae s.s., représenté par la forme moléculaire M, est principalement confiné dans l'extrême sud du pays. An. gambiae s.l., vecteur majeur du paludisme dans ces sites, a présenté un taux de mortalité quasi-totale à la perméthrine (0,75%) et la deltaméthrine (0,05%). La caractérisation moléculaire de la mutation Kdr montre que la population d'Anopheles gambiae s.s. est sensible (S/S). L'absence de toute mutation kdr justifie la vulgarisation des moustiquaires imprégnées de pyréthrinoïdes par le PNLP.

Mots clés : An. rhodesiensis, An. gambiae s.l., Sensibilité (Kdr), Pyréthrinoïdes, Sites sentinelles, Mauritanie.