II-2-CONTROLE DE STERILITE
Après la préparation des milieux, nous avons
incubé une de chacune des boîtes coulées à
l'étuve pendant 24 heures.
La présence de souillure entraîne le rejet de la
gélose.
II-3- REPIQUAGE DES SOUCHES
A partir des souches précédemment retenues,
sept boites de gélose chocolat du laboratoire ont été
ensemencées. L'inoculum utilisé a été
ensemencé de telle sorte que le tiers de chaque plaque de gélose
ait été ensemencé en stries serrées puis le reste
en stries de manière à obtenir des colonies isolées. Les
plaques de gélose ont été placées en
anaérobiose et incubées à 35°C pendant 24 heures.
II-4- CONTROLE DES SOUCHES
Un contrôle a été réalisé
sur les colonies qui se sont développées sur la gélose
chocolat. Pour ce faire des frottis ont été
réalisés puis colorés au Gram.
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Présenté et soutenu par Antoine A. DANSOU et
Jacques Fêmi SETONDJI
Utilisation comparée de la gélose chocolat à
base d'hémoglobine en granulées et de la gélose chocolat
à base de sang de mouton défibriné pour la culture de
trois espèces bactériennes méningées
II-5- REALISATION DES SUSPENSIONS ET CULTURES
II-5-1- Réalisation des suspensions
Pour chacune des espèces, nous avons
réalisé une suspension en prenant une colonie qui a
été émulsionnée dans 10mL d'eau physiologique
stérile. A partir de cette suspension deux dilutions dont l'une à
10-1 et l'autre à 10-2 ont été
réalisées (Figure 3 page 25).
10mL d'eau
9mL d'eau
1mL 1mL
9mL d'eau
Physiologique physiologique physiologique
stérile stérile stérile
Suspension Suspension Suspension
initiale au 1/10ème au 1/100ème
Figure 1 : Réalisation de suspension et
des dilutions 10-1 et 10-2
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Présenté et soutenu par Antoine A. DANSOU et
Jacques Fêmi SETONDJI
Utilisation comparée de la gélose chocolat
à base d'hémoglobine en granulées et de la gélose
chocolat à base de sang de mouton défibriné pour la
culture de trois espèces bactériennes méningées
II-5-2- Culture
A partir de chacune des suspensions et des dilutions, nous
avons ensemencé des plaques de gélose chocolat à base de
l'hémoglobine en granulées et de gélose chocolat à
base du sang de mouton défibriné.
Technique
-Disposer les plaques de gélose à ensemencer sur
la paillasse.
-Diviser les plaques de gélose par le dos de la boite de
Petri en trois bandes parallèles au moyen d'un marqueur.
-Numéroter les bandes : 1, 2 et 3.
-Ensemencer la suspension initiale sur la bande 1, la dilution
10-1 sur la
bande 2.et la dilution 10-2 sur la bande 3.
-Incuber à 35°C en anaérobiose pendant 24
heures.
Après incubation, la densité des colonies sur
les plaques de gélose a été évaluée à
l'aide d'une carte modèle d'identification de la densité des
colonies pour la numération des bactéries (Voir annexe1).
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Présenté et soutenu par Antoine A. DANSOU et
Jacques Fêmi SETONDJI
Utilisation comparée de la gélose chocolat
à base d'hémoglobine en granulées et de la gélose
chocolat à base de sang de mouton défibriné pour la
culture de trois espèces bactériennes méningées
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