3-Paramètres affectant
l'électrophorèse (5, 12)
3.1- Le courant électrique
Allant d'un bac à l'autre pour compenser la perte de
liquide par évaporation.
3.2- La charge de la molécule
Pour que la protéine se déplace dans un champ
électrique, il est indispensable qu'elle soit ionisée soit par
son groupement carboxyle soit par son groupement.
3.3- La nature du tampon
La composition du tampon est importante du fait des
interactions possibles entre certaines molécules le constituant et la
protéine.
3.4- La diffusion
Les particules incluses dans le gel ayant tendance à
diffuser des régions les plus concentrées vers les moins
concentrées, ce qui gêne la bonne séparation des zones.
3.5- La taille des particules
Car à charge égale, une molécule plus
petite migrera plus vite. Cet effet de tamisage moléculaire est surtout
important pour les gels de polyacrylamide.
3.6- Le Choix du support
Le support ayant été longtemps utilisé
est le papier, remplacé ensuite par la membrane d'acétate de
cellulose puis par le gel d'agarose qui permet une meilleure séparation
et la détection des protéines monoclonales de faible
concentration. Le gel de polyacrylamide a un très fort pouvoir
séparateur exploité dans la séparation de
lipoprotéines et des apoprotéines.
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