II/ METHODOLOGIE DE L'ETUDE PARASITOLOGIQUE
L'étude a été réalisée
entre Juin 2003 et Mai 2005 durant les différentes saisons de
l'année et dans chaque site la prévalence, la morbidité et
la transmission du paludisme ont été évaluées.
1. Etude de la prévalence
Elle a concerné les enfants âgés de 0
à 15 ans pour lesquels l'endémicité palustre a
été évaluée par des mesures de la prévalence
parasitaire effectuées en saison sèche, fin saison sèche,
saison des pluies et fin saison des pluies. A chaque passage un sondage est
fait chez 100 à 150 enfants de chaque village, consistant en un
prélèvement sanguin au niveau de la pulpe du doigt pour la
réalisation de frottis et de gouttes épaisses. Le taux de portage
parasitaire est estimé par la proportion de GE positives parmi le nombre
de GE examinées. Les charges parasitaires des formes sexuées et
asexuées ont été exprimées en nombre moyen de
parasites par micro litre de sang.
2. Etude de la morbidité
Toute personne se présentant au poste de santé
pour consultation avec des signes évocateurs de paludisme (hyperthermie,
céphalée, arthralgies, troubles digestifs, frissions ...) est
incluse dans l'étude. Des prélèvements de sang ont
été effectués pour la confection d'étalements
(frottis et GE) en vue de déceler la présence
d'hématozoaires, ceci permet d'évaluer la morbidité
palustre. Toutes les lames confectionnées ont été
colorées et lues quotidiennement au niveau de chaque village
d'étude pendant toute la durée des enquêtes.
3. Traitement des lames
confectionnées
Les étalements sanguins réalisés ont
été colorés par la méthode de Giemsa. Après
la fixation des frottis au méthanol et la
déshémoglobinisation de la goutte épaisse, on recouvre
entièrement la lame d'une solution de Giemsa diluée (3 gouttes de
Giemsa pour 2ml d'eau distillée) pendant 20 minutes avant de laver
à l'eau et d'égoutter en position verticale.
La recherche des parasites et l'estimation de la
densité parasitaire ont été faites sur la goutte
épaisse par l'examen d'un nombre de champs microscopiques suffisant pour
dénombrer 200 leucocytes, du nombre de parasites observé on en
déduit le nombre de parasites par microlitre (mm3) de sang.
Ce calcul est fait sur la base d'une leucocytémie moyenne de 8000
leucocytes par microlitre de sang. La densité parasitaire a
également été estimée sur certains
étalements à partir du frottis par l'examen systématique
de 50 champs microscopiques et le comptage des globules rouges
parasités. La charge parasitaire est calculée sur la base de 5
millions d'hématies par microlitre de sang, en considérant que
chaque champ contient 200 globules rouges, la parasitémie est
exprimée en nombre de globules rouges parasités par microlitre de
sang (GRP/mm3).
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