1.Mesures de la photosynthèse et de la
transpiration
Les mesures de la photosynthèse et de la transpiration
ont été effectuées à l'aide d'un analyseur de gaz
« CO2 » à infrarouge. Il s'agit d'un
appareil portable de marque (CID 301 PS, Vancouver, Washington-USA),
calibré automatiquement et fonctionnant par absorption de la
lumière. Seule la feuille est introduite dans la chambre de mesure
après avoir estimé sa surface foliaire selon la méthode
proposée par Mabrouk et Carbonneau (1996).
2.Peroxydation lipidique
La peroxydation lipidique a été
évaluée par la mesure des substances réagissant avec
l'acide thiobarbiturique (TBARS), qui comprennent des aldéhydes (dont le
MDA) et des lipides hydroperoxydés. 125 ul d'extrait, 50 ul de TBS et
125 ul de TCA 20% BHT 1% ont été mélangés pour
déprotéiniser les extraits. Après agitation et
centrifugation (1000g pendant 10 min), le surnageant a été
prélevé. 200 ul du surnageant ont été
mélangés avec 40 ul de HCl (0,6 M) et 160 ul de Tris-TBA (Tris 26
mM, acide thiobarbiturique 120 mM). Après agitation, incubation à
80?C (10 min), la densité optique a été mesurée
à 530 nm. La quantité des TBARS a été
calculée en utilisant un coef?cient d'extinction de 0,156
mM-1 cm-1.
3.Dosage de la proline
La détermination du contenu des feuilles en proline est
effectuée selon la méthode Bates et al., (1973).
4. Dosages des pigments chlorophylliens
L'extraction des pigments chlorophylliens est effectuée
par broyage de 50 mg de matière fraiche suivi d'une centrifugation
à 2700 tr/mn pendant 10 min. Le surnageant est prélevé et
une lecture de son absorbance dans les longueurs d'onde suivantes :
663nm ; 645 nm et 470nm.
Les teneurs en chlorophylles sont déterminées
suivant l'équation de Lichtenthler1987 :
Chla= (11, 24*Do663) - (2, 04 *Do645)
Chlb = (20, 13* Do645) - (4, 19*
Do663)
Chl(a+b) = (7,05* Do663) +(18,09*
Do645)
Caroténoides = 1000* Do470-(1, 9* Chla -63,
14*Chlb)/214
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