Préparation de nos
échantillons
Nous avons apprêté les échantillons
à frais et à sec, l'échantillon à frais
était destiné pour l'extraction d'huile essentielle et une autre
partie a été séchée sur la paillasse à la
température ambiante du laboratoire de chimie de la faculté des
sciences pour le screening chimique et d'autres expériences.
Les méthodes que nous avons utilisées
sont : le screening chimique, l'hydrodistillation et la méthode
statistique (test student) pour comparer nos échantillons.
2.2.1. SCREENING
CHIMIQUE
Le screening chimique est une méthode d'analyse
chimique qui a pour but de mettre en évidence les groupes phytochimiques
contenus dans une plante donnée.
Nous avons effectué le screening chimique des
alcaloïdes, des tanins, des saponines, flavonoïdes, des
stérols et terpènes.
2.2.1.1. Détection des alcaloïdes
1g de l'organe végétal laissé en
macération dans 10 ml de solution de HCl 1% pendant 24 heures. Le
macéré est filtré et testé avec quelques gouttes de
réactif de MAYER et de DRAGENDORFF. Les alcaloïdes forment avec un
précipité blanc avec le réactif de MAYER, tandis qu'ils
forment un précipité rouge avec le réactif de DRAGENDORFF
(WOME, 1985).
2.2.1.2. Détection des flavonoïdes
a) Réactifs :
Eau distillée ;
Alcool chlorhydrique (Ethanol 95%, eau distillées HCl
concentré à parties égales en volume)
Coupeaux de Magnésium ;
Alcool iso amylique.
b) Matériel : Tube à essai, pipettes
graduées, seringue, bécher, entonnoir et papier filtre.
c) Mode opératoire :
5 g de matière végétales broyée
finement ou grossièrement sont infusée dans 50 ml
l'éthanol 95%, 2 ml de l'eau et 2 ml de l'acide chlorhydrique
concentré.
A 5ml de l'infusé, on ajoute 5ml d'alcool
chlorhydrique, environ 0,5 g de coupeau de magnésium et quelques gouttes
d'alcool iso amylique.
L'apparition d'une coloration rose, orange ou violacé
dans la couche surnageant d'alcool iso amylique indique la présence d'un
flavonoïde libre.
2.2.1.3. Détection des tanins
A 5 ml du décocté précédent, on
laisse tomber quelques gouttes de chlorure ferrique 1%. L'apparition d'une
coloration particulière ou d'un précipité indique la
présence de tanins dans la plante (DISASI, 1988 ; DELAUDE,
1969).
2.2.1.4. Détection des quinones
5 g de matière végétale
grossièrement broyée, imbibée de quelques gouttes de HCl
au 1/5, sont mis en macération dans 30 ml du mélange
chloroforme-éther (1/1) dans une fiole bouchée pendant 24 heures.
Après filtration 2 ml filtrat sont agités avec 2 ml de la
solution de soude au 1/10. La présence de quinone est traduite par le
virement de la coloration du rouge au violet de la phase aqueuse (FOURNET,
1979).
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