C- Les anticoagulants
Le citrate est l'anticoagulant de choix car il permet une
meilleure conservation des facteurs de la coagulation.
L'oxalate tend à être abandonné car il
n'assure pas une bonne conservation du facteur V (facteur
Proaccélérine). Il ne faut jamais utiliser l'oxalate pour le
temps de céphaline activée. L'EDTA est à proscrire.
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Importance de la qualité du
prélèvement sanguin en hémostase : Observations
faites
au Centre National Hospitalier Universitaire Hubert Koutoukou MAGA de
Cotonou
I- PRESENTATION DU CNHU
Le Centre Hospitalier et Universitaire Hubert Koutoukou Maga
de Cotonou (CNHU-HKM) est situé au Sud de la ville de Cotonou et plus
précisément dans le douzième arrondissement. Il
s'étend sur près de dix hectares.
Le CNHU-HKM est limité au Nord-est par le camp
militaire Guézo ; au Sud par la Présidence de la
République du BENIN, de laquelle il est séparé par
l'avenue Jean-Paul II ; à l'Ouest par le Ministère de
l'Intérieur, la Faculté des Sciences de la Santé (FSS) et
l'Institut des Sciences Biomédicales Appliquées (ISBA).
Le CNHU, inauguré le 30 octobre 1962 et
rénové le 10 janvier 1973, est actuellement dirigé par le
Professeur Idrissou ABDOULAYE. Il est constitué de nombreux services
médicaux et paramédicaux.
Ce centre a pour missions :
- d'assurer en permanence l'accueil et les soins
- l'hospitalisation des malades et parturientes dans les
services
- assurer une mission de formation clinique des
étudiants et médecins spécialistes en médecine, en
chirurgie, en gynécologie, en analyses biomédicales, ...
Le laboratoire d'analyses biomédicales est
composé des services suivants :
1- LA BIOCHIMIE
Le service de Biochimie est situé en face de celui de
BactériologieVirologie et comprend deux laboratoires : le petit
laboratoire et le grand laboratoire. Entre ces deux laboratoires, se trouvent
l'accueil et le bureau du Chef-Service. En Biochimie, les appareils
utilisés sont entre autres des automates, des centrifugeuses, des
pipettes.
a-/ Le prélèvement
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Importance de la qualité du
prélèvement sanguin en hémostase : Observations
faites
au Centre National Hospitalier Universitaire Hubert Koutoukou MAGA de
Cotonou
Il s'effectue à la salle de prélèvement
entre huit heures et dix heures du matin et quatre postes de
prélèvement y sont installés. On y reçoit les
patients externes.
Pour les échantillons destinés à la
Biochimie, les prélèvements se font dans des tubes secs avec gel
ou/et des tubes avec anticoagulant (héparine). Ils sont au fur et
à mesure acheminés vers le laboratoire où ils sont
étiquetés, centrifugés et distribués suivant les
paillasses :
b-/ Les paillasses
- Paillasse bilan standard : Glycémie ; urée ;
créatinine ; calcium ; magnésium ; phosphate
- Paillasse bilan lipidique et enzymatique :
Cholestérol total ; HDL ; uricémie ; triglycérides ;
bilirubine totale et conjuguée ; transaminases ALAT et ASAT ;
phosphatase alcaline ; phosphatase acide ; CPK
- Paillasse bilan ionique : Sodium ; calcium ; chlorures
- Paillasse électrophorèse : Electrophorèse
de l'hémoglobine ;
électrophorèse des protéines
sériques ; dosage enzymatique de l'activitéde la G6PD
- Paillasse des urines : Dosage des protéines ; glycosurie
; recherche des pigments et sels biliaires ; bilan ionique ; ...
c-/ Description de quelques examens
- Electrophorèse de l'hémoglobine
Au laboratoire de Biochimie du CNHU,
l'électrophorèse se fait sur du gel d'agarose fourni par le kit
HYDRAGEL HEMOGLOBIN H2O. Cette technique permet de séparer les
hémoglobines normales A et de détecter les variants
hémoglobinémiques anormaux S, C, E et D.
Le principe du test est simple. L'hémoglobine est un
pigment de couleur rouge qui se trouve dans les hématies.
L'hémoglobine est chargée négativement
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Importance de la qualité du
prélèvement sanguin en hémostase : Observations
faites
au Centre National Hospitalier Universitaire Hubert Koutoukou MAGA de
Cotonou
au pH utilisé et c'est la différence de la vitesse
de migration qui permet de séparer les différents types
d'hémoglobine.
Les variants de l'hémoglobine sont dus à des
mutations d'acides aminés sur l'une ou l'autre des chaînes.
Près de deux cents variants sont connus mais du point de vue
médical, quatre seulement ont un intérêt particulier : S,
C, E et D. Ces variants sont dus à une mutation au niveau de la
chaîne â et en position 6 par remplacement de l'acide glutamique
par un autre acide aminé ; ce qui contribue à une diminution de
charge de la protéine globale et donc de sa mobilité.
Placées dans un champ électrique, les
hémoglobines se déplacent en fonction de leur taille, des acides
aminés qui les constituent, de la nature des liaisons peptidiques, du pH
du tampon et même de la nature du support.
La technique se fait en quatre étapes essentiellement
à savoir la migration ; la fixation ; la coloration-décoloration
et la lecture au densitomètre à 570 nanomètres.
Pour chaque série d'électrophorèse, il est
recommandé de faire un contrôle de qualité des
réactifs utilisés.
- Dosage du potassium et du calcium
Ce dosage est réalisé par un automate. Il suffit
de présenter le sérum à l'appareil et celui-ci se charge
de prélever la quantité adéquate par aspiration et
présente les résultats. En fait, l'automate, de marque ILYTE
mesure le sodium, le potassium dans les produits biologiques, utilisant la
technologie des électrodes sélectives d'ions. La lumière
de l'électrode de sodium est constituée d'un tube de verre
formulé spécialement pour être sensible aux ions sodium. La
lumière de l'électrode de potassium est constituée d'un
tube en plastique à base de valinomycine, élément
sélectif. Une électrode sélective d'ions développe
un voltage qui varie en fonction de l'ion auquel elle est sensible.
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