III.3. Contrôle de stérilité du
milieu de culture et des additifs
Le milieu de culture DMEM (0%, 2%, 5% et 10% SVF) et les
autres additifs doivent subir un test de stérilité avant
d'être utilisé en culture cellulaire.
1 ml de chaque lot (milieu DMEM et des additifs) est
ajouté dans 5ml des milieux de contrôle de stérilité
(Thioglycolate, Bouillon Trypto-caséine soja et gélose sabouraud)
avec un témoin de chaque solution. La lecture des tubes pour la
vérification de la contamination se fait pendant 14 jours à
37°C dans l'étuve.
Figure 17: Contrôle de
stérilité du milieu de culture et additifs
? Bouillon Trypto- caséine soja
Le Bouillon Trypto-caséine soja (BIOKAR Lot/Batch 9M577)
(annexe 2) permet de détecter et révéler une contamination
par des germes aérobies.
La lecture pour le contrôle de stérilité se
fait quotidiennement pendant 14 jours.
? Thioglycolate
Le bouillon Thioglycolate (Scharlau Ref.03-187) (annexe 2)
est utilisé pour le contrôle et la détection d'une
éventuelle contamination par les bactéries anaérobies.
La lecture pour le contrôle de stérilité se
fait aussi quotidiennement pendant 14jours.
? Gélose Sabouraud
La Gélose Sabouraud a été
préparée est fournie par le Laboratoire général de
L'institut Pasteur de Tunis. C'est un milieu solide utilisé pour
détecter une éventuelle contamination par les champignons
(levures et moisissures).
ISTMT-IPT 2012-2013
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L'incubation de la gélose sabouraud se fait entre 20
à 25 °C. La lecture du test de stérilité se fait
chaque jour pendant 14 jours.
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