B. Pour les Entérobactéries
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
Nous avons utilisés d'abord l'identification basée
sur les caractères commun
des entérobactéries (bactéries à
Gram négatif, mobilité peritriche ou immobiles, catalase positif,
oxydase négative), la recherche de l'Oxydase a été faite
par la méthode des disques. Ensuite, Les caractères biochimiques
ont été déterminés par ensemencement de la galerie
Api 20E (Biomérieux )
C. Pour les levures :
Pour identifier le genre Candida albicans, Nous avons
utilisés la technique de filamentation dans le sérum.
Technique :
Quelques colonies ont été
prélevées et mises dans un tube contenant 0.5 ml de sérum
humain. Le mélange est incubé à 37°C pendant 3
heures. La lecture a été faite entre lame et lamelle à
l'objectif 40X.
Résultat : La présence d'un
tube germinatif ou filamentation indique la présence de C. albicans
et l'absence de filamentation signe la présence de Candida
spp.
3.1.11.5 ANTIBIOGRAMME DES SOUCHES DES SGB ISOLEES
Nous avons réalisé l'antibiogramme sur
gélose Müeller Hinton supplémentée de 5% de sang de
mouton defibriné (Plasmatec). La méthode de diffusion en
gélose a été utilisée.
Préparation de l'inoculum
Quelques colonies sont prélevées et
émulsionner dans un tube en verre contenant 5 ml de l'eau physiologique.
L'opacité de l'inoculum est ajusté à l'échelle 0,5
Mac Farland (environ 108 UFC/ml). Une autre dilution de l'inoculum au 1/10
à été réalisée conformément aux
recommandations du CA-SFM
Technique d'ensemencement
Nous avons utilisé la méthode de Kirby-Bauer ou
ensemencement par écouvillonnage sur des boites de pétri de 90 mm
de diamètre. Deux boites de pétri ont été
utilisées pour chaque souche. 5 disques imprégnés
d'antibiotique
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
sont déposés dans la première boite et 4
autres disques dans la seconde boite. La distance entre les disques
était de 2 cm.
Incubation
Les boites ensemencées sont mises dans une jarre et
incubées dans une étuve bactériologique à 37°C
en atmosphère enrichi de 5 à 10% de CO2 pendant 18 à
24h.
Le tableau 3 indique les disques d'antibiotiques
utilisés avec leurs concentrations et leurs valeurs critiques ainsi que
les diamètres critiques du Staphylococcus aureus ATCC 25923,
souche utilisée comme référence pour le contrôle de
nos disques et milieux.
Les disques sont choisis selon les recommandations du
Comité de l'Antibiogramme de la Société Française
de Microbiologie (CA-SFM édition de janvier 2008)
Tableau III : Antibiotiques utilisés et
diamètres critiques
|
ANTIBIOTIQUE
|
SYMBOLE (Oxoid)
|
CONCENTRATION
|
DIAMETRE CRITIQUE en mm
|
Staph aureus ATCC 25923
|
|
S
=
|
R
<
|
|
PENICILLINE G
|
P
|
10U (6tg)
|
29
|
8
|
31-38,5
|
|
AMOXICILLINE
|
AML
|
25 tg
|
21
|
14
|
|
|
AMPICILLINE
|
AMP
|
10 tg
|
19
|
14
|
27-35
|
|
CEFOTAXIME
|
CTX
|
30 tg
|
26
|
23
|
25-31
|
|
CLINDAMYCINE
|
Da
|
2 tg
|
15
|
15
|
24-30
|
|
ERYTHROMYCINE
|
E
|
15 tg
|
22
|
17
|
26,5-31,5
|
|
PRISTINAMYCINE
|
PT
|
15 tg
|
22
|
19
|
26,5-32,0
|
|
CEFUROXIME
|
CXM
|
30 tg
|
25
|
22
|
|
|
GENTAMYCINE
|
CN
|
10 tg
|
18
|
16
|
19-27
|
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
Tous les disques utilisés sont de marque OXOID sauf la
Pristinamycine qui est de marque BIO-RAD.
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