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Mise en évidence d'échangeurs


par Vladimir DARIC
Université Paris 7 - Département des sciences de la nature et de la vie -  1998
  

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Copyright (c) Vladimir DARIC

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UNIVERSITE PARIS VII

DEPARTEMENT DES SCIENCES DE LA NATURE ET DE LA VIE

Tour 24-34, 2éme étage

STAGE: Initiation à la recherche

BC 169 - BC 269

Daric Vladimir

Mise en évidence d'échangeurs

Cl-/HCO3- dans la branche large ascen-

dante médullaire du rein chez le rat

Soutenu : 03/1998

Stage effectué à l'Institut des Cordeliers, Laboratoire de physiologie et endo-
crinologie cellulaire et moléculaire rénale, INSERM U356
Dire cteur: Profe sseur Michel PAILLARD

Responsable de stage:

Professeur Pascal HOUILLIER Dr Anne BLANCHARD

SOMMAIRE

L e rein

.4

Structure et fonctions

.4

Glomérule

.6

Tubule rénal

7

Tubule proximal

.7

Tubule intermédiaire

7

Anse de Henle

7

Tubule distal

.8

Tubule contourné distal

.9

Tubule connecteur et collecteur initial.

.9

Canaux collecteurs

10

Canal collecteur cortical

10

Canal collecteur médullaire externe

10

Canal collecteur médullaire interne

11

Le système à contre-courant.

.11

L a branche large ascendante, mécanismes des transports ioniques.....12

Introduction

.12

La microperfusion in vitro

.13

Résumé

.13

Les avantages et les limites de la méthode.

14

Le matériel et méthodes

14

Protocole

16

Résultats

.18

Discussion

.20

Mise en évidence et caractérisation d'échangeurs Cl-/HCO3- sur les vésicules

des membranes plasmiques luminales et basolatérales.

.21

Résumé

.21

Les avantages et les limites de la méthode

.21

Méthode

.22

Les mesures des transports ioniques

.22

La filtration rapide

.23

Résultats

.23

Interpretation des résultats

.24

Le rein

Structure et fonctions

Le rôle du rein est de maintenir stable la composition du milieu intérieur. On pourrait même dire que la composition de ce milieu n'est pas déterminée par ce qu'on mange mais par ce que le rein retient et élimine. En filtrant le sang pour le libérer des produits du métabolisme tout en empêchant une trop grande fuite d'eau et d'ions de l'organisme, le rein joue un rôle très important dans le système de régulation de la composition du milieu intérieur. Il assure, donc, de bonnes conditions pour le fonctionnement des autres organes.

Les reins sont entourés d'une fine capsule protectrice fibreuse. Leur forme rappelle celle d'un haricot. Sur la coupe transversale du rein on distingue trois zones: à l'extérieur le cortex qui entoure la médullaire de laquelle se dégage le calice regroupant l'ensemble des tubes collecteurs par lesquels s'écoule l'urine définitive.

Figure 1: Coupe transversale d'un rein.

1, calice

2, bassinet

3, graisse du sinus

4, artère intralobulaire

5, pyramide de Malphigi

6, cortex

7, rayon médullaire

8, colonne de Bertin

La majorité des études a été faite sur des reins animaux, plus faciles à obtenir donc mieux connus. Le rein humain a une médullaire composé de 4 à 18 cônes ou pyramides de Malphigi tandis que le rein du rat correspondrait à un rein formé par une seule pyramide de Malphigi et par le cortex qui l'entoure; le rein de ce type est dit unipapillaire. Du pourtour des pyramides vers la périphérie du cortex qui les entoure s'étendent les rayons médullaires. Le parenchyme cortical situé entre les rayons médullaires forme le labyrinthe.

Le rein humain est composé d'environ 1 300 000 unités fonctionnelles, ou néphrons. Les néphrons sont enrobés de tissu interstitiel où cheminent vaisseaux et nerfs. Chaque néphron est com-

posé d'un glomérule et d'un tubule qui lui fait suite. Le tubule urinifère comporte chez les mammifères au moins 12 segments successifs différents morphologiquement et fonctionnellement: Partie proximale qui comprend le tubule proximal avec ces trois segments ( S1,S2,S3 ).

Partie intermédiaire comprend la branche fine descendante et la branche fine ascendante de l'anse de Henle.

Partie distale comprend la branche large ascendante médullaire et corticale de l'anse de Henle, le tubule contourné distal et les canaux collecteurs ( avec successivement le tubule connecteur, le canal collecteur cortical, le canal collecteur médullaire externe et le canal collecteur médullaire interne ).

Figure 2. Répartition et segmentation de deux types de néphrons: superficiel ou cortical à anse de Henle courte, profond ou juxtamédullaire à anse de Henle longue.

1, Glomérule

2, tube contourné proximal

3, tube droit proximal

4, branche descendante fine

5, branche ascendante fine

6, branche large ascendante

7, macula densa

8, tube contourné distal

9, tube connecteur et collecteur initial

10, canal collecteur cortical

11, canal collecteur médullaire externe

12, canal collecteur médullaire interne

De plus les néphrons se repartissent en trois groupes en fonction de l'emplacement de leur glomérule. On a donc des néphrons superficiels, corticaux moyens et juxtamédullaires. Cette classification se fait selon la position du glomérule et la profondeur de l'anse de Henle. Il n'est pas moins vrai que cette classification reste schématique car les néphrons quelle que soit la situation de leur glomérule, peuvent avoir une anse de Henle courte ou longue.

Ces différents segments des néphrons occupent une place particulière dans le lobe rénal.

Dans le labyrinthe on trouve les glomérules. Les tubes contournés proximaux et distaux se trouvent autour et au-dessus du glomérule dont ils sont issus.

Les rayons médullaires contiennent la partie initiale des tubes droits proximaux, la partie terminale des tubes droits distaux des néphrons superficiels et moyens et le canal collecteur cortical.

Les tubes droits proximaux et distaux des néphrons se trouvent dans la couche externe médullaire.

La portion descendante des tubes intermédiaires, la partie initiale des tubes droits distaux se trouvent dans la couche interne de la médullaire externe.

La médullaire interne contient les tubes de Bellini ( canaux collecteurs ), la partie fine descendante et ascendantes tubes intermédiaires des néphrons à anse longue.

Les canaux collecteurs traversent tout le lobe rénal. Dans la zone des rayons médullaires le tube contourné distal se jette dans un tube collecteur qui, traversant la medulla, rejoint la papille.

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