3.4.2. Méthode de dilution des huiles
végétales
Les différentes dilutions ont été faites
sur la base de la conservation de quantité de matière dans le
solvant. On fait des dilutions successives dans l'éthanol pour les tests
larvaires, dans l'acétone pour les tests en tubes OMS puis dans du jus
sucré pour les tests d'ingestion.
Ainsi ni=nf où (ni=ci×vi)
représente la quantité de matière à l'état
initial c'est-à-dire avant la dilution (huiles végétales
pures) et (nf=cf×vf) représente celle à l'état final
c'est-à-dire après la dilution (huiles végétales
diluée) ce qui permettra de déduire le volume de l'huile
végétale pure dans la solution diluée à l'aide de
la formule suivante :
Vi = Volume d'huile végétale pure
à prélever en millilitre ;
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Ci = Concentration de l'huile
végétale pure en pourcentage ; on suppose par convention que
quand l'huile végétale est pure, sa concentration est
égale à 100% donc 1
Cf = Concentration de l'huile
végétale diluée exprimée en pourcentage,
Vf = Volume final de la solution
diluée en millilitre ; nous avons supposé qu'il est égal
à 100ml pour toutes les dilutions.
3.4.3. Les Tests larvaires
Les tests ont consisté à évaluer la
mortalité des larves d'Anopheles et Culex en
présence des solutions diluées d'huiles végétales
suivant une méthodologie inspirée du protocole de l'Organisation
Mondiale de la Santé (OMS, 2005). Des expériences
préliminaires ont permis de retenir une gamme de concentrations devant
servir aux tests proprement dits. Les expérimentations ont
été réalisées dans des gobelets avec 20 larves de
moustiques au 3ème stade. Dans chaque gobelet a
été versé, un mélange d'eau distillée et
d'huile végétale. Le volume du mélange d'eau
distillée additionnée avec de l'huile végétale est
de 100ml par gobelet exception faite du contrôle qui ne contient
uniquement que l'eau distillée et le solvant. Chaque expérience
à été répétée 5 fois. Les
différentes doses expérimentées sont les suivantes :
Thevetia peruviana: 0,125% ; 0,25% ; 0,5% ; 1% ; 2% ; 3%
et 4% Azadirachta Indica : 0,0625% ; 0,125% ; 0,25% ; 0,5% et 1%
Ricinus. Communis : 0,5% ; 1% ; 2% ; 4% et 6%
Jatropha curcas : 0,03125% ; 0,0625% ; 0,125% ; 0,25% ;
0,5% et 1%
Le temps d'exposition des larves aux différentes
concentrations est de 24h. Après 24h d'exposition, l'efficacité
de chaque dose a été déterminée en relevant dans
chaque gobelet le nombre de larves mortes.
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3.4.2.1. Test en cage par ingestion
Cinquante à 60 moustiques femelles âgées de 3
jours ont été introduit à l'aide
d'un aspirateur dans une cage. Du coton imbibé d'un
mélange de jus sucré et d'huile végétale est
placé au dessus de la cage en fonction des doses désirées
(Photo 12). Les morts sont comptés et retirés des cages tous les
jours. Les doses appliquées sur les adultes en cage ont
été :
Thevetia peruviana: 0,5% ; 1% ; 2% ; 3% et 4%
Azadirachta Indica : 0,125% ; 0,25% ; 0,5% ; 1% et 2% Ricinus.
Communis : 0,5% ; 1% ; 2% ; 4% et 6% Jatropha curcas : 0,125% ;
0,25% ; 0,5% ; 1% et 2%
Photo 12 : Disposition des cages lors des
expérimentations
Source : cliché AGBIZOUNON, 2010
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