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à‰tude de la relation entre des bactéries legionella et des amibes isolées d'un écosystème aquatique à  Marrakech.

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par HICHAM JEDIYI
Faculté des Sciences Semlalia - Master  2016
  

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II-5-2. Kératites amibiennes

Dans les pays développés sont en forte augmentation à cause du port des lentilles de contact. Les kératites amibiennes se développent également chez des personnes immunocompétentes. Les atteintes par Acanthamoeba sp sont actuellement les plus fréquentes des kératites amibiennes (80% des cas sont des porteurs de lentilles de contact, les autres cas étant liés

Etude de la relation entre des bactéries Legionella et des amibes 7

Chapitre 1: Aperçu bibliographique

à un traumatisme oculaire ou ne retrouvant pas de cause évidente). Elles sont dues aux trophozoïtes qui adhèrent et se développent sur l'épithélium cornéen. Après dépôt des amibes sur la cornée, l'incubation est brève. Les trophozoïtes sécrètent différentes protéases, en particulier collagénolytiques provoquant un abcès cornéen (Kim et al, 2006).

Etude de la relation entre des bactéries Legionella et des amibes 8

Etude de la relation entre des bactéries Legionella et des amibes 9

Chapitre 2: Matériel et méthodes

MATÉRIEL ET MÉTHODES I- Souches des micro-organismes

I-1. Legionella pneumophila sérogroupe 1 et Escherichia coli

La souche de Legionella pneumophila sérogroupe 1 et d'Escherichia coli utilisées dans cette étude proviennent d'une collection de souches isolées et identifiées par sérotypage d'une étude antérieure, dirigé par le Professeur B. IMZILN du laboratoire de biologie et de biotechnologie des micro-organismes de la Faculté des Sciences Semlalia de Marrakech.

I-2. Les amibes

Différentes souches amibiennes ont été isolées à partir de différents écosystèmes aquatiques à Marrakech. La souche amibienne (SA1) a été isolée à partir des eaux usées rejetées par la station d'épuration de Marrakech, alors que La souche amibienne (SA2) a été isolée à partir de l'eau de puits de la Faculté des Sciences Semlalia (FSSM) de Marrakech.

Deux méthodes d'isolement ont été utilisées. La première consiste à filtrer les eaux prélevées par une pompe à vide sur une membrane de 0,22um à raison d'un litre d'échantillon par membrane. Le filtre est ensuite déposé sur de la gélose non nutritive « NN-Agar » recouvert d'un tapis d'Escherichia coli et incubée à 28°C pendant 10 jours. La deuxième méthode consiste à centrifuger un litre de l'échantillon d'eaux à une vitesse de 1200tpm pendant 10 min et à remettre le culot en suspension dans un volume précis d'eau distillée stérile. 500 ul de cette suspension sont ensemencés par étalement dans des boîtes de pétri contenant de la gélose non nutritive recouvert d'un tapis d'Escherichia coli. L'incubation a été faite à 28°c pendant 10 jours. Ci-dessous, le tableau 1 résume l'ensemble des souches utilisées dans ce présent travail ainsi que leurs origines.

Tableau 1: Souches bactériennes et amibiennes utilisées lors de l'étude et leur origines

Souches des microorganismes Origines

Escherichia coli LBBM

Legionella pneumophila sérogroupe 1 LBBM

Souche Amibienne 1 (SA1) Rejets eaux usées step de Marrakech

Souche Amibienne 2(SA2) Puits FSSM

Chapitre 2: Matériel et méthodes

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"Enrichissons-nous de nos différences mutuelles "   Paul Valery