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Diversités phénotypique et moléculaire des microsymbiotes du Sulla du nord (Hédysarum Coronarium L. ) et sélection de souches rhizobiales efficientes

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par Sana Dhane Fitouri
Institut national agronomique de Tunisie - Doctorat en sciences agronomiques 2011
  

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5. Evaluation de l'efficience symbiotique des isolats de la collection

Dans le but d'évaluer les performances symbiotiques des isolats de la collection, 30 souches ont été testées pour leur efficience.

5. 1. Conduite de l'essai

L'évaluation de l'efficience symbiotique des souches a été réalisée en association avec Hedysarum coronarium L. variété Bikra 21. Les graines ont été désinfectées par imbibition à l'hypochlorite de sodium (1 %) et à l'alcool (95°) respectivement pendant 8 min et 15 secondes.

Ces dernières ont été ensuite rincées 8 fois à l'eau distillée stérile et immédiatement semées le 12 novembre 2007 dans des gobelets de 33 Cl, à raison d'une graine par gobelet. L'ensemble des gobelets a par la suite été placé sous serre vitrée. A l'apparition des cotylédons, les plants ont été inoculés avec 1 ml d'une solution bactérienne fraîchement préparée (108 bactéries/ml). Des plantes non inoculées ont été utilisées comme témoins : un premier témoin absolu (T0) et un deuxième (TN) avec un apport azoté de 60 unités fractionné en deux. Le premier apport a été réalisé au stade cotylédonaire et le second au stade 3 feuilles uni-foliolées. Quatre répétitions ont été réalisées pour chaque traitement.

Les plantes ont été arrosées 3 fois par semaine alternativement avec de la solution nutritive dépourvue d'azote (Vadez et al., 1996) (Annexe 2) et de l'eau distillée stérile.

5. 2. Paramètres mesurés

Douze semaines après inoculation, et au stade 6ème feuille pluri foliée du sulla, les paramètres de nodulation (nombre et poids) ont été évalués selon les techniques précitées. La croissance en hauteur a été réalisée à l'aide d'une règle graduée. La surface foliaire cumulée pour l'ensemble des feuilles constituant une seule plante a été estimée en Cm2/ plante et déterminée au moyen d'un planimètre de marque LICOR.

Les rendements en biomasse sèche par plant de sulla ont été estimés après dessiccation de la partie aérienne des plantes à l'étuve ventilée à 70°C pendant 72 h puis mesure des poids secs par une balance.

Le dosage des protéines brutes aériennes par plante a été réalisé par la méthode Kjeldhal, à partir de la poudre végétale des plants desséchés, selon le même protocole préalablement cité.

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"Soit réservé sans ostentation pour éviter de t'attirer l'incompréhension haineuse des ignorants"   Pythagore