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Méthodes de diagnostic des maladies parasitaires dans le laboratoire de l'hopital de district de Dschang


par Emmanuel Boris Gomseu Djoumsie
Université de Dschang - Stage Master 1 2013
  

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III- EXAMEN BACTERIOLOGIQUE

A- PRELEVEMENT CERVICO-VAGINAL (PCV) 1- Matériels et réactifs

Les matériels nécessaires pour ce prélèvement sont les suivants : - Spéculum (usage unique)

Rapport de stage rédigé par GOMSEU DJOUMSIE Emmanuel Boris 18

Méthodes de diagnostic des maladies parasitaires dans le laboratoire de l'hôpital de district

de Dschang.

- Lamelles - Ecouvillon stérile

- Lame - Un microscope

Les colorants sont ceux utilisés pour la coloration de Gram on a : le violet de gentiane, une solution de lugol, de l'alcool 950 c, la fuchine basique (poudre) ou fuchine de Ziehl diluée au 1/10e (liquide).

2- Prélèvement

Ce prélèvement se fait uniquement au niveau du col de l'utérus soit au cours de la consultation par le médecin ou par l'infirmier soit par le laborantin au laboratoire. Ce prélèvement ce fait chez les femmes n'étant par sur la prise des antibiotiques, n'ayant par fait la leur toilette vaginale. Delors On procède de la façon suivante :

- installer le patient sur le lit de prélèvement après qu'elle se soit mise dans les conditions de prélèvement,

- poser doucement le spéculum dans le vagin, presser sur le poignet de la main gauche afin d'ouvrir le vagin et mieux observer le col de l'utérus,

- de la main droit et à l'aide d'un écouvillon faire un premier prélèvement au niveau du col, faire un frottis qui sera coloré au Gram,

- avec un second écouvillon, faire un deuxième prélèvement au niveau des culs de sac vaginaux et faire un état frais à examiner au microscope.

3- Technique de l'examen

Cet examen a deux étapes dont une observation à l'oeil nu de l'état du col avant les prélèvements et un examen au microscope (état frais et coloré)

a- L'état frais

Il se fait directement après le prélèvement des secrétions des culs de sac de la manière suivante :

- déposer une goutte d'eau physiologique sur une lame stérile.

Rapport de stage rédigé par GOMSEU DJOUMSIE Emmanuel Boris 19

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de Dschang.

- triturer l'écouvillon contenant les sécrétions des culs de sac vaginaux dans la goutte d'eau pour avoir un mélange homogène,

- recouvrir la préparation avec une lamelle et observer au microscope à l'objectif 40.

b- L'état coloré (coloration de Gram)

Cette coloration se fait comme suit :

- fixer l'étalement à la chaleur et le laisser refroidir,

- recouvrir la lame du violet de gentiane et le laisser agir pendant 1minute,

- rincer à l'eau de robinet, recouvrir ensuite du lugol 45 secondes après, laver à l'eau, égoutter,

- bien décolorer la préparation à l'alcool pendant 30 secondes, - bien rincer et sécher à l'air,

- une fois la préparation séchée y égoutter une goutte d'huile à immersion et observer au microscope à l'objectif 100.

B- PRELEVEMENT URETRAL

1- Matériels

Pour ce prélèvement nous avons besoin de :

- Anse de platine ou écouvillon - Lame

- Une compresse colorant - L'eau physiologique

Le matériel et les colorants sont les même que pour l'examen précédent.

2- Prélèvement

Il doit se faire très tôt le matin avant que le malade ait uriné afin de ne pas éliminer une certaine quantité de bactéries cultivées dans l'urètre. La procédure est la suivante :

- nettoyer le bout du pénis avec une compresse imbibée d'eau physiologique,

Rapport de stage rédigé par GOMSEU DJOUMSIE Emmanuel Boris 20

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de Dschang.

- presser légèrement le trajet de l'urètre pour faire apparaitre le méat,

- prélever une goutte de sécrétion urétrale avec une anse de platine flambée ou un écouvillon et déposer sur la lame. La goutte est prélevée deux fois, le premier prélèvement étalé sur une lame bien étiquetée de sorte que l'étalement soit aussi mince que possible pour l'examen à l'état coloré. Le second prélèvement pour l'état frais est dilué dans une goutte d'eau physiologique sur une autre lame et recouvert d'une lamelle et examiné au microscope.

3- Technique de l'examen

L'examen de la préparation à l'état frais se fait immédiatement après le prélèvement au microscope à l'objectif 40 et on peut trouver dans l'échantillon de PU (pour un patient malade) les Trichomonas (rare), les leucocytes et les filaments mycéliens.

L'état coloré présente les diplocoques Gram négatifs signe de gonococcie, des cocci en staphe signe de staphylocoque si la préparation présente un nombre très élevé de polynucléaires et pas autres germes pathogènes, on déduit que le patient est atteint de chlamydia.

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