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Cytotoxicité larvaire et activités antimicrobiennes des extraits de Adansonia digitata L., Tamarindus indica L. et de Acacia nilotica L. delile sur des souches microbiennes multirésistantes au Bénin


par Afoussatou AMADOU
Universite d'Abomey Calavi - Master en Microbiologie Moleculaire et medicale 2022
  

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2.2.3. Matériel technique et équipements

Dans le déroulement des activités, plusieurs matériels ont été utilisés. Parmi ceux-ci, les milieux de culture, les réactifs, les solvants organiques et les colorants.

Pour l'isolement, le repiquage et la réalisation de l'antibiogramme, les milieux Mueller Hinton, Mac Conckey, Potatose Dextrose Agar et Eosine Methylen Blue ont été utilisés. De même, les réactifs à savoir : les colorants de Gram, le Bleu de Méthylène et le PBS (lavage cellulaire) ont été utilisés. Quant aux solvants, l'eau distillée et l'éthanol à 96° ont servi à préparer les extraits. D'autres petits matériel ont servi aux manipuations à savoir : les cônes, les micropipettes, les pipettes pasteurs, les boîtes de Pétri et les microplaques de 96 puits. Par rapport aux consommables, les disques d'antifongiques et d'antibiogrammes : Fluconazole (100 ug), Amphoteìricine B (50 ug), Keìtoconazole (10 ug), Clotrinazole (10 ug), Itraconazole (10 ug), Nystatine (100 ug) ont été utilisés pour les champignons. De même que, AMC (Amoxiclave), AMX (Amoxiciline), CTX(Ceftriaxone), CTR(Cotrimoxazole), ATZ(Aztréoname), IPM(Imipénème), ETP(Ertapénème), GEN (Gentamicine), CIP(Ciprofloxacine),... ont été utilisés pour les bactéries. D'autre matériel à savoir : les tubes aÌ heìmolyse de 5 ml steìriles, les eìprouvettes, les fioles jaugeìes, les beìchers, le bec bunsen, la bouteille de gaz, les boîtes de Peìtri, les tubes Eppendorf, les eìcouvillons, les lames et lamelles, les ensemenceurs steìriles, le papier aluminium, les écouvillons, etc ont également été utilisés.

Plusieurs eìquipements ont servi dans la reìalisation de nos manipulations. Il s'est agi de : le microscope à cameìra, le lecteur de plaque, le PSM, l'eìtuve, le congeìlateur, la centrifugeuse, la balance de preìcision, l'autoclave, l'agitateur et le vortex.

2.3. MÉTHODES

2.3.1. Extraction et préparation des extraits

Les extraits totaux aqueux et éthanoliques ont été obtenus par une adaptation des méthodes mise au point par '-Guédé-Guina et al. (1995) et Baxter et al., (1998) utilisée par 'Klotoé et al. (2020). Cinquante (50) grammes de poudre ont été macérés dans 500 ml d'eau distillée/éthanol. Le mélange est mis sous agitation continue de marque «?Stuart Bioblock Scientific Fisher?» pendant 72 heures à la température ambiante.

L'homogénat obtenu a été filtré trois fois sur du coton hydrophile et une fois sur le papier Wattman No1. Ce filtrat a été ensuite séché à 45 °C au four. La poudre ainsi obtenue est l'extrait total aqueux utilisé.

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