II.2.2.6 Détermination de la teneur en fibres
brutes
Le dosage des fibres brutes a été effectué
selon la méthode de Weende (Wolff, 1968). Elle consiste en une hydrolyse
à l'acide sulfurique suivie d'un traitement alcalin à la soude
d'une prise d'essai et incinération du résidu.
? Mode opératoire
1 g (P1) de la poudre a été mélangé
à 100 mL de H2SO4 (0,26N) et porté à ébullition
dans un bain marie d'eau régler à 95° C pendant 30 min. Le
mélange a été filtré et lavé trois fois 75
mL de l'eau distillée pendant 5 minutes. 100 mL de KOH 0,23N a
été ajouté au résidu puis porté en
ébullition pendant 30 min, ensuite filtré et lavé trois
fois à l'eau distillée et deux fois à l'acétone. Le
résidu de filtration a été séché à
100° C pendant 8 h et pesé (P2) puis incinéré pendant
3h à 500°C dans un four à moufle et pesé de nouveau
(P3).
? Expression du résultat
La teneur en fibres(Fb) brutes est donnée par la relation
:
|
??2-??1
Fb = ??1
|
100
X
MS
|
X 100
|
Rédigé par BOBE MALLAYE 38
Avec P1 : masse en grammes de la prise d'essai ; P2 : masse en
grammes de l'échantillon sec ; P3 : masse en grammes des cendres ; MS :
matière sèche.
2018-2019
Propriétés biologiques de la pulpe du
fruit de Detarium microcarpum (Guill. & Perr)
II.2.2.7 Détermination de la teneur en
composés phénoliques totaux.
> Extractions des polyphénols
totaux
0,025g de la poudre a été pesée dans 25
mL de mélange méthanol (70 : 30, V/V) et maintenue sous agitation
à température ambiante du laboratoire pendant 24 h. Le
mélanges a été filtré sur papier Whatmann N°1.
L'extrait obtenu a servi pour le dosage des polyphénols totaux.
Le dosage spectrophotométrique utilisant le
réactif de Folin-Ciocalteu décrite par Wafa et al.
(2014) a été utilisée pour la détermination
des polyphénols totaux.
> Principe
En milieu alcalin, les polyphénols réduisent le
réactif de Folin-Ciocalteu en oxyde de tungstène et de
molybdène de couleur bleue. L'intensité de cette coloration
renseigne sur le contenu en polyphénols totaux dans le mélange
(Dewanto et al.,2002). Les composés phénoliques totaux
présentent un maximum d'absorption à 760 nm et l'intensité
est proportionnelle à la quantité de polyphénols
présents dans la poudre.
> Mode opératoire
Une prise de 20 uL d'extrait convenablement dilué a
été mise dans un tube en présence de 2980 uL d'eau
distillée. Par la suite, 500 uL du réactif de Folin-Ciocalteu
1/10eme et 400 uL d'une solution de Na2CO3 à 20 % ont
été respectivement ajoutés. L'ensemble des tubes contenant
les échantillons et ceux du blanc a été agité au
vortex et laissé au repos pendant 20 min à température
ambiante du laboratoire et à l'obscurité, l'absorbance a
été mesurée à 760 nm. L'étalonnage (Annexes
1) a été réalisé à l'aide d'une solution
aqueuse d'acide gallique à différents concentration.
Les résultats exprimés en mg équivalent
d'acide gallique/g de matières sèches (EAG/gMS).
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