Screening chimique et extraction d'huile essentielle : scordoplhoeus zenkeri harms et croton haumanianus j. leonard

2.2.1.5. Détection des saponines

5 g de matière végétale grossièrement broyée on fait une décoction dans 50 ml d'eau pendant 15 minutes, on prélève dans un autre tube à essai 10 ml de filtrat qu'on agite vigoureusement, on laisse reposer le tube pendant 10 minutes, la persistance de mousse après 10 minutes indique, la présence de saponines dans l'échantillon (FOURNET, 1979).

2.2.1.6. Détection des stérols et terpènes

1g de poudre de matériel végétal est mis en macération pendant 24 heures dans une fiole bouchée contenant 20 ml d'éther diéthylique. 5 gouttes de la solution sont évaporées sur le verre de montre. Les résidus sont repris par 2 gouttes d'anhydride acétique. L'addition de 1 goutte de l'acide sulfurique concentré donne des composés stéroliques ou terpéniques, une coloration mauve virant au vert. Un résultat négatif à ces deux tests indique l'absence des produits stéroliques et terpéniques (LUNANULA et al, 1984).

2.2.2. HYDRODISTILLATION

Nous avons opté pour la méthode d'hydrodistillation car elle est la seule méthode d'extraction faisable avec notre moyen de bord.

a) Principe de l'hydrodistillation de plante aromatique

Les espèces chimiques odorantes sont faites de molécules peu ou pas solubles dans l'eau mais souvent volatiles. Initialement mélangées à de l'eau, les cellules végétales libèrent, sous l'effet de la chaleur, ces molécules odorantes qui se vaporisent en même temps que l'eau et sont entraînées par la vapeur d'eau vers un réfrigérant où elles se condensent (ainsi que l'eau). A la sortie du réfrigérant on recueille un liquide, le distillat : il est en général formé de 2 phases liquides non miscibles :

· la phase aqueuse, la plus abondante, constituée d'eau dans laquelle est dissoute une faible quantité de molécules odorantes

· la phase organique, ou l'huile essentielle, constituée des molécules odorantes

FIGURE 6 : L'appareillage type d'une hydrodistillation

- Calcul de rendement.

Rendement % =

b) Quelques paramètres d'hydrodistillation

Dans cette partie nous allons présenter les différents paramètres que nous avons pu définir pour une hydrodistillation d'huile essentielle.

Nous avons donc réalisé quelques expériences pour pouvoir appuyer notre étude en tenant compte de ces paramètres :

· La durée de distillation

· Le morcellement de la plante

· Le ratio plante/eau

· Le taux d'hydratation la plante ou l'humidité

· La température

1) La durée de la distillation

La durée de la distillation est celle qui correspond à la durée minimale permettant d'extraire toutes les fractions, c'est-à-dire une durée qui se termine dès que la rentabilité de l'extraction commence à diminuer.

Une huile essentielle est composée de plusieurs types de molécules. Ainsi, pour qu'une hydrodistillation soit complète, il faut récupérer toutes les catégories de constituants aromatiques (" totum " des molécules). Ce qui implique souvent une durée relativement longue et variable selon les organes distillés. ( http://tpe-huile-essentielle.e-monsite.com/pages/ii-optimisation-du-rendement-de-l-hydrodistillation/le-temps-de-distillation.html)

Nous allons chercher à déterminer le temps optimal pour maximiser le rendement en huile essentielle.

2) Le morcellement de la plante

Lors d'une hydrodistillation, la vapeur d'eau traverse le matériel végétal pour emporter avec lui dans le réfrigérant toutes les substances aromatiques. Mais la vapeur traverse une couche plus ou moins importante de végétaux.

Nous allons procéder à la recherche de forme du matériel végétal qui pourra faciliter le contact entre l'eau et les molécules d'huile essentielle.

3) Le ratio plante/eau

Lors d'une hydrodistillation, la vapeur d'eau est un véhicule permettant le transport des substances aromatiques contenues dans la plante.

C'est pourquoi nous allons chercher la quantité optimale d'eau pour la rentabilité du rendement en huile essentielle.

4) Le taux d'humidité

Mode opératoire

- Peser l'échantillon avant le séchage

- Peser après le séchage

Calcul :

H en % = Ph = P1 P2

Avec:

- H : humidité en pourcentage;

- Ph : poids humide ;

- P1 : poids de l'échantillon avant séchage

- P2 : poids de l'échantillon après séchage

5) La température de distillation

L'eau et les substances végétales, mélangées dans des proportions définies, forment un mélange azéotrope ou azéotropique, c'est-à-dire dont la température d'ébullition commune est inférieure à leurs températures d'ébullition respectives et reste constante jusqu'à la disparition totale d'un de 2 composés.

Lorsque l'on chauffe le mélange et que celui-ci atteint la température d'ébullition de l'azéotrope, qui est la plus basse, l'eau et l'huile essentielle s'évaporent en même temps.

Nous allons chercher à voir l'influence de la température sur notre rendement en fixant une température d'ébullition autre que celle de l'azéotrope.

2.2.3. MODELE STATISTIQUE

Pour faire nos comparaisons, nous avons préféré utiliser le test t parce que nous l'avons trouvé plus fiable pour dégager la différence nette entre les rendements de nos espèces avec un niveau de confiance de 0.95.

2.2.3.1. Le test student

a) Définition

Le test de Student, ou test t, est un ensemble de  tests d'hypothèse paramétriques où la statistique calculée suit une  loi de Student lorsque l' hypothèse nulle est vraie.

b) Principe

Le principe du test de Student est le suivant : on veut déterminer si la valeur d' espérance ì d'une population de  distribution normale et d'écart type ó non connu est égale à une valeur déterminée ì₀. Pour ce faire, on tire de cette population un  échantillon de taille n dont on calcule la  moyenne  et l'écart-type empirique s. ( https://fr.wikipedia.org/wiki/Test_de_Student)

Pour notre cas nous avons utilisé le logiciel R commander (C'est un logiciel conçu spécialement pour le test statistique et nous avons utilisé la version : 2.10.0).