8-prélèvement
des abeilles
Pour l'étude de chaque stade de développement, nous
avons prélevé 20 abeilles à partir de chaque cagette
Les abeilles sont tuées à l'aide du chloroforme.
9- Pesage des
abeilles
Les abeilles sont pesées dans une balance de
précision puis placées ces abeilles dans des eppendorphes
numérotés
10- dissection des
abeilles
·
Matériels et réactifs :
Ø une loupe binoculaire
Ø ciseau très pointu
Ø cuvette à dissection
Ø des épingles entomologiques
Ø pince
Ø Solution de Ringer : composé de :
· Chlorure de sodium
· Chlorure de potassium
· Bicarbonate de sodium
· Chlorure de calcium
· Eau distillée
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8,5 g
0,25 g
0,20 g
0,30 g
1000 g
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Ajouter le chlorure de calcium, seulement après
dissolution des autres sels (PH 7- 7,4), stériliser par filtration ou
autoclavage, Conservation limitée (MARCHAL et al, 1987).
Figure 14 : La cire
Figure 13 : Stéréoscope
binoculaire
Figure 15 : Des épingles
entomologiques
Ø
Méthodes
La dissection
La dissection a été effectuée sous une loupe
binoculaire. L'abeille ouvrière est fixée à l'aide
d'aiguilles entomologiques dans une boite de pétri de 9 cm de
diamètre contenant la cire solidifiée.
L'abeille doit être couverte d'une solution physiologique,
le Ringer.
Après la fixation on pratique une incision de chaque
coté de l'abdomen par un ciseau pointu, et à l'aide de pince on
enlève les huit segments abdominaux. Il apparaît la masse
énorme de l'intestin postérieure, le rectum, l'intestin
grêle et une partie de l'intestin moyen qui de chaque coté de
celui-ci. On trouve les ovaires au niveau du huitième au neuvième
sternite (KOUDIL et DOUMANDJI, 2008) alors que chez les glossines on le trouve
au niveau du sixième sternite (WILFRID et al, 2005).
Cire naturelle
Épingle dans le thorax
Epingle dans le dernier segment
Figure 16: la dissection de l'abeille
Biométrie des
ovaires
Pesage des ovaires
La paire d'ovaires est coupée à la base de
l'oviducte médian, essoré et pesé dans une balance de
précision.
Mesure de la longueur
Après étalonnage du stéréoscope
binoculaire monté d'un micromètre objectif, les longueurs de
l'ovariole et de l'ovocyte basal le plus développé sont
mesurées
Dénombrement des ovarioles
Sous un microscope, de grossissement (X10), on dénombre
les ovarioles par ovaire gauche ainsi que par ovaire droit.
Dénombrement des follicules : on
dénombre les follicules par l'ovariole le plus
développé
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