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Validation de procédé de production d'antigène viral sur culture cellulaire BHK21

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par Ghaith Ben Messaoud
Institut supérieur des technologies médicales de Tunis - Licence appliquée en biotechnologies médicales 2013
  

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IV.5.Génome du virus de la rubéole

Le virus de la rubéole est le seul virus dans la famille des Togaviridae à avoir un génome qui contient un seul brin d'ARN de polarité positive, son génome est d'environ 10 kilobase (kb) (Yumei et al., 2007), soit environ 9764 nucléotides.

Le génome contient deux trames de lecture (ORF):

? ORF 5' proximal codant pour 2 protéines non structurales est qui sont p150 et p90. L'ORF 5' proximal contient environ 6345 nucléotides.

? ORF 3' proximal codant pour les trois protéines structurales E1, E2 qui sont les protéines de l'enveloppe et enfin C qui est une protéine de la capside. L'ORF 3' proximal contient environ 3189 nucléotides. Ainsi l'ordre des gènes pour l'ARN 40S (coefficient de sédimentation) est 5'-p150-p90-C-E2-E1-3'. Le génome du virus de rubéole a un contenu élevé en G + C de 69%, le plus élevé de tout virus connu jusqu'à ce jour l'ARN (Lee et al., 2000).

Le génome contient également des régions non transcrites (UTR) à son extrémité 5' et 3' et entre les ORF (la région de jonction) (Yumei et al., 2007).

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Figure 5: Représentation du génome de la rubéole (Bienvenu et al., 2004)

IV.6.Réplication du virus

Les effets de la réplication du virus de la rubéole sur la cellule hôte est dépendante du type de cellules infectées. Ainsi, il faut être prudent de ne pas extrapoler d'une lignée cellulaire à l'autre, et plus important encore, de la réplication du virus de la rubéole dans des lignées cellulaires à la réplication du virus de la rubéole chez les humains.

La fixation du virus de la rubéole à des récepteurs cellulaires se produit probablement par l'intermédiaire des sites de liaison sur l'E2 et / ou E1 glycoprotéines moléculaires, même si le récepteur cellulaire du virus de la rubéole n'a pas été identifié pas plus que le site récepteur de liaisons sur une ou les deux glycoprotéines (Banatvala et al., 2007).

La pénétration du virus dans la cellule se fait par le phénomène d'endocytose et relargue sa nucléocapside dans le cytosol. La réplication du virus se fait dans le cytoplasme. Après le phénomène de décapsidation, les deux tiers 5' terminaux de l'ARN 40S se traduisent en polypeptides non structuraux nécessaires à la synthèse de l'ARN complémentaire de polarité négative.

Cette étape donne naissance à des ARN double brins, les intermédiaires de réplication. L'ARN messager 24S est après traduit en protéine C et les glycoprotéines E1 et E2 qui sont essentiels et entrent dans la structure des nouveaux virions. La protéine C se combine

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à L'ARN 40S formant ainsi la nucléocapside. Le virus acquière son enveloppe par le phénomène de bourgeonnement à partir des membranes intracellulaires ou plasmiques de la cellule cible. L'enveloppe est faite des lipides des cellules hôtes et des glycoprotéines E1 et E2 hérissant ainsi l'enveloppe sous forme de spicule (Denis, 1999).

Figure 6: Réplication du virus de la rubéole (Bienvenu et al., 2004)

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