ANNEXE 1 : Autorisations de recherche
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
ANNEXE 2 : FICHE TECHNIQUE DE RECHERCHE
Date
IDENTIFICATION DE LA PATIENTE Fiche N°
N° ordre ou N° de la facture
Nom et Prénoms
Age
non
Patiente Interne Patiente externe
Quartier
INFORMATIONS REQUISES
Etes vous enceintes? Oui
Si oui, de combien de mois?
Nombre de grossesses quelques soient les issues Grossesses
à termes
Nombre des prématurés Nombre des avortements
Nombre des enfants en vie ....
Parité
non
Êtes-vous sous Antibiotique? Oui
Pourquoi faites-vous le
PCV ?...
Motifs : 1
2
Partie réservée au chercheur
Examen Macroscopique :
Abondance des leucorrhées
Couleur
Aspect
Odeur
Examen Microscopique :
Examen direct : V' Etat
frais
Trichomonas
Levures
Leucocytes
Cellules épithéliales
V'
Gram
Flore de Doderleïn type
Bacilles Gram+ Bacilles Gram -
Cocci Gram+ Cocci Gram -
Germes isolés : 1
2
CAMP Test
ANTIBIOGRAMME :
|
SENSIBLES
|
INTERMEDIAIRES
|
RESISTANTS
|
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
ANNEXES 3: FICHE DE CONSENTEMENT ECLAIRE
Je soussignée, Mme, Mlle
atteste avoir reçu des explications claires et
précises sur le but de cette recherche dont le thème est
« Portage vaginal et profil de sensibilité aux
antibiotiques du Streptocoque B chez la femme enceinte à l'Hôpital
Gynéco-obstétrique et Pédiatrique de Yaoundé
HGOPY» ainsi que son importance et sa bienfaisance.
Par ailleurs, j'accepte donc de faire partie de cette
étude sans conditions préalables.
En foi de quoi, le présent engagement peut servir et
valoir ce que de droit.
Le chercheur La participante
ADAWAYE CHATTE
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
ANNEXES 4 : CONDITIONS ETHIQUES
Notre étude a été menée en respectant
certains principes généraux et
fondamentaux de l'éthique et le respect de certaines
règles :
> L'obtention de l'accord du Superviseur de thèse ;
> L'obtention d'une autorisation de recherche du Doyen de la
FMSB
> L'obtention d'une autorisation de collecte des
données par la direction de
l'HGOPY
> Explication à la patiente des objectifs de
l'étude ;
> L'obtention de l'accord de la cliente incluse dans
l'étude (principe du
consentement éclairé);
> Mesures garantissant la protection de vie privée,
l'anonymat et la confi-
dentialité des données
> La garantie d'une large diffusion des conclusions (principe
de bienfai-
sance)
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
ANNEXE 5 : Mode Opératoire
du PASTOREX STREP ( BIO-RAD) Préparation des
échantillons
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
Le Test PASTOREX STREP s'applique aux colonies de
Streptocoques béta-hémolytiques isolées sur gélose
au sang ou gélose columbia +ANC (colonies de cocci à Gram
positif, catalase négative).
Préparation des extraits
~ Placer 0,3 ml ou 300ul de solution d'extraction
enzymatique
dans un tube à hémolyse pour chaque souche
isolée ;
~ Placer 5 à 10 colonies d'une culture fraiche de
streptocoques et
les dissocier dans l'enzyme. Lorsque les colonies sont de
taille inferieure à 0,5 mm, augmenter l'inoculum jusqu'à
l'obtention d'un trouble visible à l'oeil nu.
~ Incuber soit à 15 à 45°C à
température ambiante (18-30°C)
Identification du
groupe
~ Agiter énergiquement chaque flacon pour remettre en
suspen-
sion les particules de latex ;
~ Déposer une goutte de chaque latex dans les cercles
de la
carte d'agglutination. (Tenir le flacon en position verticale) ;
~ A l'aide d'une pipette, déposer également une
goutte d'extrait
dans chacun de ces cercles ;
~ Homogénéiser le contenu de chaque cercle
à l'aide d'un bâ-
tonnet, changer le bâtonnet pour chaque
réaction ;
~ Agiter la carte selon un mouvement orbital pendant une
mi-
nute maximum
Une réaction positive se traduit par l'agglutination
des particules de latex dans un délai maximum d'une minute. La taille
des agglutinats et la rapidité de leur apparition dépendent de la
concentration antigénique de l'extrait.
Interprétation des résultats
~ Réaction positive : formation
d'agglutinants rouges sur fond
vert. Seule une agglutination franche et
rapide avec un seul de 6 latex permet d'identifier le groupe de la souche
testée.
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
~ Réaction négative : Suspension
homogène brune
~ Réactions non interprétables
:
V' Faible agglutinats sur fond brun
V' Agglutination avec plusieurs latex
spécifiques. Dans ce cas, faire un nouvel isolement de la souche
à étudier. Performances du test : Les
performances du test ont été évaluées sur 217
souches dont 162 souches de streptocoques et entérocoques et 55 souches
d'autres espèces, certains concurremment avec des streptocoques tels que
Corynebacteries, Listeria monocytogenes, Gardnerella
vaginalis.
Tableau : Sensibilité du test Pastorex
Bio-Rad
|
Total
|
Positive
|
Négatives
|
Sensibilité
|
|
Streptocoque A
|
67
|
67
|
0
|
100%
|
|
Streptocoque B
|
41
|
41
|
0
|
100%
|
|
Streptocoque C
|
9
|
9
|
0
|
100%
|
|
Streptocoque D
|
27
|
24
|
3
|
88%
|
|
Streptocoque F
|
4
|
4
|
0
|
100%
|
|
Streptocoque G
|
14
|
14
|
0
|
100%
|
Une souche Enterococcus durans n'a pas réagi,
due probablement à un déficit d'antigène de groupe chez
cette souche, 1 souche Enterococcus avium et une souche
Enterococcus gallinarum (ayant présenté des
agglutinations avec la méthode utilisée au laboratoire, n'ont
réagi ni avec Pastorex Strep D ni avec une troisième
technique).
Spécificité du test
· Sur les 55 souches autres que Streptocoques des groups A,
B, C, D, F et G, les résultats suivants ont été
observés :
V' Agglutination du latex C avec 5 souches de
Streptococcus pneu-moniae alpha-hémolytiques (réaction
dues à la présence d'un antigène commun F)
y' Agglutination du latex avec une souche de Corynebacteries
bé-ta-hémolytique.
? Absence de réactions croisées avec les autres
souches (S. mitis, G. va-ginalis, L. monocytogenes et des Corynebacteries non
hémolytiques).
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