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Investigation des propriétés antimicrobienne (in vitro), anti-inflammatoire et antispasmodique (in vivo) de l'essence de romarin (rosmarinus officinalis l.) de la région de Bouira.

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par Imène et khadidja Bella et El fertas
Saad dahleb - Master 2016
  

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II-2-2-1- Choix du modèle animal

La méthode mise en évidence recommande l'utilisation des souris puisqu'elles sont facilement maniables et elles requièrent des quantités minimes du matériel utilisé.

II-2-2-2- Choix des doses

Les doses de l'H.E diluée sont 0.01%, 1%, 2.5%, 3.5%. II-2-2-3- Protocole expérimental

? Étape préliminaire :

· Préparation de six lots, chacun est composé de cinq souris mâles et femelles, souche N.M.R.I de poids 22#177;2 g, qui reçoivent de l'eau et de la nourriture à volonté.

· Dilution de l'H.E dans l'eau physiologique afin de préparer quatre doses.

· Préparation de la carraghénine à 1% en diluant 20mg de cette dernière dans 2mll'eau physiologique.

· Préparation de Diclofénac de sodium (50mg/kg) utilisé comme anti-inflammatoire officinal, sa dose efficace pour arrêter l'inflammation est 150mg (dans 3ml) pour un homme de 70kg.Pour une souris d'un poids approximatif de 20mg, la dose suffisante est de 0.04 mg, donc on a dissout un comprimé dans 1250ml d'eau physiologique.

? Mode opératoire :

La répartition des lots est présentée dans le tableau V et les étapes de cette expérience sont présentées dans l'annexe 7.

· A To :

- Gavage de 0.5 ml de l'eau physiologique pour le lot témoin (1).

- Gavage de 0.5 ml de la solution de Diclofénac de sodium (50mg/kg) pour le lot référence (2).

- Gavage de 0.5 ml de l'H.E diluée avec l'eau physiologique en quatre doses : 0.01% et 1% ,2.5%,3.5% pour les lots d'expérience (3) et (4), (5) et (6) respectivement.

· Après 30 min :

- Injection à toutes les souris 0.025ml de carraghénine à 1%, sous l'aponévrose plantaire de la patte postérieure gauche.

- Injection à toutes les souris 0.1 ml de l'eau physiologique sous l'aponévrose plantaire de la patte postérieure droite.

22

? Après 4 h :

- Pour l'évaluation du degré de tuméfaction, les animaux ont été sacrifiés par écrasement du cou. Pour chaque souris, les pattes postérieures ont été amputées

au niveau de l'articulation du jarret et ont été pesées séparément.

Tableau V:répartition des lots de souris utilisés pour réaliser l'activité anti-inflammatoire.

Témoins

Essais des doses de l'H.E.

N° lot

Essais

Voies

d'administration

1

Eau physiologique

Voie orale

 

PPG

Injection en sous

plantaire

 

PPD

 

Diclofénac (50mg/kg)

Voie orale

 

PPG

Injection en sous

plantaire

 

PPD

 

H.E à 0.01%

Voie orale

 

PPG

Injection en sous

plantaire

 

PPD

 

H.E à 1%

Voie orale

 

PPG

Injection en sous

plantaire

 

PPD

 

H.E à 2.5%

Voie orale

 

PPG

Injection en sous

plantaire

 

PPD

 

H.E à 3.5%

Voie orale

 

PPG

Injection en sous

plantaire

 

PPD

 

PPG : patte postérieur droite .PPD : patte postérieure gauche. II-2-2-4- Calcul du pourcentage de réduction d'oedème

L'importance de l'oedème a été appréciée par la détermination du pourcentage d'oedème .Le calcule a était effectué comme suit :

23

PG - PD

% d'oedème = PD x 100

Où : PD est le poids des pattes postérieurs droites et PG est le poids des pattes postérieurs gauches.

Ensuite, l'activité anti-inflammatoire a été évaluée grâce au calcul du pourcentage d'inhibition ou de réduction de l'oedème (%INH) selon la formule suivante :

% de l'oedème témoin - % de l'oedème essai

% de réduction d'oedème =

% de l'oedème témoin

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"Il y a des temps ou l'on doit dispenser son mépris qu'avec économie à cause du grand nombre de nécessiteux"   Chateaubriand