Chapitre II : Matériels et méthodes
L'étude de l'efficacité de l'entomopathogène
Metarhizium acridum sur les larves et les adultes
des mouches des fruits a été conduite entre le 30
Juin 2014 et le 15 Septembre 2014. Les locaux du laboratoire d'Entomologie, des
Entomopathogènes et de Zoologie Agricole de la Direction de la
Protection des Végétaux (DPV) de Dakar
(Sénégal).
Pour les travaux de laboratoire, chacun des tests lancés a
son propre matériel et sa méthodologie qui lui est propre.
2.1. Conditions expérimentales
Les tests sur les mouches adultes ont été faits en
condition de laboratoire, la température
constante a été réglée à 26
#177; 2 °C et l'humidité relative était comprise entre 55-75
#177; 5 % ont été enregistrées grâce au
thermo-hygromètre (Photo 19). Les tests sur les larves ont
été faits dans les conditions ambiantes.
Photo 19: Thermo-hygromètre (Hobo)
2.2. Matériel
2.2.1. Matériel de préparation,
d'inoculation, de comptage des conidies
Dans le cadre du test de viabilité des spores, de la
préparation des solutions fongiques et du calcul de la concentration du
nombre de conidies par millilitre de solution, il a été
utilisé (Photo 20) :
? pour la préparation du milieu : un erlenmeyer, une
plaque chauffante avec un agitateur magnétique, du Sabouraud Dextrose
Agar (SDA), une spatule, une balance Mettler-Toledo, des boîtes de
Pétri, de l'eau distillée, l'autoclave, des flacons de 200 ml
;
? pour la préparation des solutions fongiques et
inoculation des milieux : une spatule, des tubes des Falcon, de l'eau
distillée, du Tween-80, une micropipette de 40 ul, un portoir, un vortex
;
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? -pour le calcul de la concentration de spores et le test de
germination : un microscope optique, un hémocytométre de
Neubauer, une micropipette, un compteur.
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Photo 20: Matériel pour le test de
germination : 1 Hémocytomètre, 2 micropipette, 3 embouts, 4
microscope, 5 tubes de Falcon et portoir, 6 vortex, 7 lamelles, 8 boîtes
de Pétri, SDA, 10 balance Mettler-Toledo et 11 Tween-80
2.2.1. Matériel d'élevage
Pour la collecte des données sur la température
et sur l'humidité relative en conditions contrôlées, il a
été utilisé un thermo-hygromètre (Hobo) qui
enregistre les données téléchargeables via un ordinateur
(Photo 19). Pour les insectes adultes, des cages en plexiglas
démontables (150 × 150 × 240 mm) (Photo 21) BugDorm - 1 ont
été utilisées avec les trois bords tapissés de
mailles fines et le quatrième bord en plexiglas où se trouve une
ouverture pour les manipulations. Pour le test sur les larves des tentes
d'élevage (60 cm x 60 cm x 60 cm) dont les deux côtés sont
tapissés d'un tissu aux mailles fines et les deux autres, faits d'un
imperméable transparent pour pouvoir compter les individus à
travers (sur l'un de ces côtés se trouve une ouverture pour
permettre la manipulation, l'alimentation des insectes et le
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nettoyage). Des bocaux confectionnés à partir de
bouteilles d'eau vide ont été utilisés pour contenir le
sable mélangé avec les spores sèches et les mangues
infestées. Les insectes ont été nourris avec du sucre pure
de canne et des flacons avec du coton imbibé d'eau
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Photo 21 : Cages en 1 et tentes en 2
d'élevage au laboratoire 2.2.2. Matériel
d'incubation
Pour l'incubation des cadavres d'insectes, il a
été utilisé des boîtes de Pétri en verre de
10 centimètre de diamètre, du papier buvard, de l'eau de javel,
de l'alcool, de l'eau distillée, un incubateur (Photo 22).
Photo 22: Incubateur
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