2.3.3.2. Effet du Metarhizium acridum sur les adultes
de Bactrocera dorsalis
Vingt mouches adultes, mâles et femelles, de
Bactrocera dorsalis, contenues dans une cage, sont exposées
à 0,3 g de spores sèches de Metarhizium réparties
de façon uniforme dans une chambre d'auto-inoculation. Chaque mouche a
séjourné pendant 3 minutes dans la chambre d'inoculation et les
20 mouches ont été ensuite transférées dans une
cage. Une cage avec 20 mouches passées dans une chambre de contamination
sans spores de Metarhizium a servi de témoin. La
mortalité est enregistrée quotidiennement et le ramassage des
mouches mortes va se faire de façon quotidien durant 6 jours. Les
mouches mortes sont lavées dans de l'hypochlorure de sodium 2
37
38
% pendant 1 minute, puis dans de l'alcool 70° C pendant
une minute et rincées 3 fois avec de l'eau distillée avant
d'être mises en incubation pendant 3 à 5 jours dans des
boîtes de Pétri contenant du papier buvard imbibé d'eau.
Les mouches témoins, non contaminées, sont dans deux cages
saines. Le test est répété 2 fois.
2.3.4. Evaluation de l'efficacité de 3 doses
Metarhizium acridum sur les populations de Bactrocera dorsalis et Ceratitis
capitata, détermination de la LT 50 pour chaque dose
2.3.3.3.Conception expérimentale
L'expérimentation a été structurée
de façon à avoir 10 mouches par cage avec 3
répétitions par dose de M. acridum. Dix mouches ont
été choisies au hasard et infectées avec les 3 doses
respectives de M. acridum à savoir 0,3 g ; 0,15 g et 0,075
g.
Les cages ont été disposées dans une
conception complètement aléatoire dans la chambre
expérimentale. La mortalité a été mesurée en
pourcentage de mouches mortes à l'intérieur d'une
répétition. L'analyse à un seul facteur va être
utilisée pour comparer les moyennes où la mortalité a
été la variable d'intérêt et la virulence du M.
acridum le facteur à évaluer afin de déterminer le
temps létal 50 moyen (LT50) pour chaque dose et pour chaque
espèce.
Photo 24: Chambres d'auto-inoculation avec de
la gauche vers la droite les doses de 0,3 g ;
0,15 g et 0,075 g de
Metarhizium acridum et la chambre témoin (Faye, 2014)
2.3.3.4. Procédure expérimentale
a. Chez Ceratitis capitata
Les adultes de C. capitata ont été
contaminées avec du matériel de velours, imprégné
de 0,3 g, 0,15 g et 0,075 g de spores sèches du M. acridum
contenu dans trois chambres d'auto-inoculation. Les mouches ont
été autorisées à séjourner pendant 3 minutes
dans les chambres d'auto-inoculation Après l'installation des 3 cages
témoins où les mouches ont eu à séjourner dans une
chambre d'inoculation à blanc sans spores de la contamination des
mouches a été
faite de façon à débuter avec la plus
faible dose de Metarhizium. Par la suite les mouches
contaminées ont été transférées dans des
cages en plexiglas et alimentées avec du sucre pur et des flacons d'eau
avec du coton imbibé. Chaque dose a été
répétée 3 fois avec 10 mouches par
répétition. Les témoins ont été mis à
l'écart pour éviter toute contamination. La mortalité a
été observée et enregistrée quotidiennement pendant
6 jours à partir de la date de contamination. Afin de vérifier
les mycoses, les mouches mortes récupérées sont
lavées dans de l'hypochlorure de sodium 2 % pendant 1 minute, puis dans
de l'alcool 70° C pendant une minute et rincées 3 fois avec de
l'eau distillée avant d'être mises en incubation pendant 3
à 5 jours dans des boîtes de Pétri contenant du papier
buvard imbibé d'eau. Les mouches ont été
séparées d'une distance de 1 cm pour éviter toute
contamination ou transfert de spores d'un cadavre à l'autre.
? Chez Bactrocera dorsalis
La même procédure avec C. capitata a
été faite avec trois répétitions plus 3 cages
témoins. Les populations adultes de B. dorsalis
utilisées pour ce test sont âgées de 10 à 13
jours.
2.3.5. Transmission horizontale de
l'entomopathogène Metarhizium acridum
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