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Diversité des begomovirus infectant le gombo au Togo


par Ayékitan AKAKPO
Université Joseph Ki-Zerbo - Master 2 en Biotechnologie 2019
  

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Chapitre III : Résultats et discussion

Zone agro-écologique Ville/village Coordonnées_GPS

Code_éch

symptômes

Résultats_PCR

Nanergou

38AK

JN

-

Nanergou

39AK

JN

+

Nanergou

40AK

JN

+

RH : repliement vers le haut ; RB : repliement vers le bas ; JN : jaunissement

3.2. Amplification des â satellites

Afin de vérifier une éventuelle association des Begomovirus détectés avec le â satellite, une amplification a été conduite sur les 66 isolats positifs. Cette amplification a permis de détecter la présence de â satellite dans 25 isolats sur 66 isolats soit 37,88%. La Figure 16 illustre les résultats d'amplification des â satellites en utilisant les couples d'amorces Beta01/Beta02. La bande attendue d'environ 1400 nucléotides a été obtenue dans certains échantillons avec succès.

Figure 15 : Electrophorèse des produits d'amplification des â satellites (fragments attendus de 1400 paires de bases) sur gel d'agarose à 1%. 100 paires de bases = marqueur de taille DNA ladder. 36 ; 37 ; 39 ; 40 ; 41 ; 54 sont positifs.

3.3. Séquençage des produits PCR du gène de la protéine capsidiale

Le séquençage des produits PCR a permis d'avoir l'identité des différentes espèces de Begomovirus infectant le gombo au Togo. En effet, les produits du séquençage ont permis d'obtenir des séquences dites partielles, car concernant seulement le gène de la protéine de capside (CP) des virus détectés. Au total neuf (9) séquences ont été obtenues avec succès après éditions et assemblages des contigs issus des produits de séquençage. Cela a permis de générer neuf (9) séquences virales que sont : 5AK, 6AK, 28AK, 39AK, 47AK, 62AK, 85AK, 93AK, 118AK. Ces séquences partielles soumises aux bases de données génomiques (NCBI, EMBL et DDBJ) à l'aide de l'algorithme BLAST ont révélé l'identité des différents Begomovirus infectant le gombo au Togo. Les « Blast search » ont révélé que les séquences

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