IV.3.2. Méthodes
d'analyse
IV.3.2.1. Méthode de
coproscopie
La technique de Mac-Master(méthode de flottaison de
comptage) a été utilisée pour rechercher et identifier les
oeufs de nématodes, cestodes et les oocystes de coccidies. Le
procédé se résume comme suit : les matières
fécales sont trituréesdans les gants et 5 g sont pesés
à l'aide d'une balance, puis versés dans un mortier ou les
matières sont délayer progressivement avec 70 ml de la
solutiondense de chlorure de sodium (26,4 %) jusqu'à l'obtention d'une
suspension fécale homogène. La suspension estfiltrée dans
des pots avec un tamis renforcé par des compresses pour enlever le
maximum des débris. Puisà l'aide d'une pipette, les chambres de
la lame de Mac-Master sont remplies avec la suspension fécale. La lame
de Mac-Master remplie est laissée pendant 10 à 15 mm avant
d'être observé au microscope au grossissement 10x40. Les oeufs
sont identifiés et comptés suivant chaque colonne de la chambre
de la lame.
Figure 22:
Photographie de la coproscopie (a : pesé de fèces, b : lames de
Mac Master remplies)
IV.3.2.2. Méthode
d'identification et comptage des d'oeufs
L'identification est faite selon la morphologie des oeufs
suivant la clé de détermination des principaux oeufs de GRABER et
PERROTIN (1983).
N = n x 100
Le nombre d'oeufs (N) par gramme de matière
fécale (OPG) de chaque type de parasite est calculé suivant la
formule suivante : soit le nombre d'oeuf (n) dans une chambre
multiplié par 100 :
IV.3.2.3. Méthode de
coproculture
Les matières fécales positives sont mises en
culture. Pour chaque troupeau, les fèces sont mises en culture en lot,
en fonction du sexe et de la classe d'âge (catégorie) de l'animal.
Nous avons mis en culture les matières fécales pour identifier le
genre de strongle. Le protocole appliqué est celui de la méthode
de Brumpt ou coproculture en boîte de pétri. Nous avons
mélangé les fècesde chaque lot, puis nous les avons
triturésavec le mortier et pilon en porcelaine, en ajoutant de l'eau de
robinet jusqu'à obtenir une pâte molle. La pâte est
étalé dans des boites de Pétri au fond des quelles se
trouvent des papiers filtre. Les boites de Pétri sont identifiés
(N° du troupeau, date de mise en culture, sexe, classe d'âge et date
de récolte) avant d'être déposé au fond d'une
enceinte contenant soit du coton humecté d'eau soit un tissu
humecté d'eau, le tout est couvert partiellement avec un carton. Les
boites de Pétri sont périodiquement ouvertes pendant quelques
minutes pour aérer les matières fécales et le tissu/Cotton
humectés. Au bout de 8 à 10 jours, on passe à l'extraction
des larves.
Figure 23:
Photographie des matières fécales en culture dans des boites de
Pétri
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