Memoire Online - Impact de la pollution par le cadmium sur l'évolution de la population des moules bivales "mytilus galloprovincialis "

- Introduction .......................................................................... 01

- Matériel et méthodes ............................................................... 04

1. Présentation des sites ........................................................... 04

2. Présentation de l'espèce ......................................................... 04

2-1- présentation générale ......................................................... 05

2-2- classification classique ....................................................... 06

3. Collecte des échantillons ....................................................... 06

4. Dosage des protéines totales .................................................... 06

5. Dosage du Glutathion-S- Transférase ......................................... 07

6. Activité de l'Acétylcholinestérase ............................................. 07

7. Analyse statistique ................................................................. 07

- Résultats ............................................................................... 07

- Discussion ............................................................................. 11

- Conclusion .............................................................................. 13

- Résumé .................................................................................. 15

Introduction :

Les cotes sont depuis toujours le lieu privilégié d'installation des ports, des villes et des activités industrielles.la moitié de la population mondiale actuelle est localisée à moins de 50km des virages et il est de plus en plus question pour l'homme d'annexer cette partie du domaine marin en la domestiquant.

La pollution désigne une dégradation de l'environnement biophysique et humain par l'introduction de matières dites- polluants- non présentes en temps normal. Cette dégradation entraine une perturbation plus ou moins importante de l'écosystème. Bien qu'elle soit majoritairement d'origine humaine, elle peut également avoir pour cause un phénomène naturel comme une éruption volcanique.

La pollution peut avoir un impact très important sur l'écosystème comme en témoigne le réchauffement climatique qui bouleverse le climat de la terre et de son écosystème, entrainant l'apparition des maladies inconnues jusqu'alors dans certaines zones géographiques, des migrations de certaines espèces, voir leur extinction si elles ne peuvent s'adapter à leur nouvel environnement.

Curieusement l'eau « source de la vie », « don du ciel », ou « milieu vivant » a de tout temps été considéré comme le véhicule naturel des déchets domestiques et industriels. La qualité des hydrosystèmes s'est ainsi trouvée peu à peu altérée par la quantité et la diversité des polluants rejetés dans le milieu naturel. C'est pourquoi, l'un des problèmes majeurs de ce siècle est la préservation de la qualité de l'environnement face à la croissance industrielle exceptionnelles et à la pollution engendrée par le développement économique. Le rejet de substances d'origine naturelle ou de synthèse constitue l'un des plus importants facteurs de dégradation de la biosphère par l'homme.

Des quantités importantes de micropolluants sont rejetées dans l'environnement, induisant ainsi une contamination chronique d'un nombre croissant d'écosystème aquatique. Cette contamination provoque un stress chez des organismes bioindicateurs de pollution en altérant leurs capacités physiologiques et biochimiques à différents degrés. Ceci a permis la mise au point d'outils de biosurveillance écotoxicologique appelés biomarqueurs qui rendent compte des niveaux de pollution auxquels sont soumis ces bioindicateurs.

Dans le domaine de l'écologie, un biomarqueur permet de détecter la présence de polluant dans l'environnement et l'impact de certaine pratique. Ça peut être par exemple le nombre de poissons dans un lac, la quantité de lichens sur les arbres d'une forêt ou la couleur du pelage des animaux.

La ville d'Annaba est un important pôle industriel, touristique et économique installé sur la côte Est algérienne. Les multiples pollutions qui découlent d'une telle activité humaine et industrielle ont pour point de convergence le milieu marin. Ces dernières années, la biosurveillance des eaux du golf d'Annaba reposait essentiellement sur l'évaluation des concentrations de polluants dans l'eau et les sédiments mais aussi dans les tissus des organismes. Des travaux antérieurs ont mis en évidence l'importance des complexes industriels dans l'émission de divers rejets dans l'atmosphère et dans l'eau du golfe d'Annaba (Semadi et Druelle, 1993). De plus, divers métaux lourds ont été détectés dans les sédiments mais également dans les tissus des moules bivalves.

Le cadmium est un métal lourd qui ne semble pas biologiquement essentiel ou bénéfique au métabolisme des êtres vivants. Mais il est toutefois impliqué dans les changements du métabolisme mitochondrial, la perméabilité membranaire et l'inhibition de la phosphorylation oxydative et de la synthèse des protéines. Du fait de sa cytotoxicité, sa génotoxicité, son potentiel de bioaccumulation et sa persistance, ce xénobiotique est placé dans la liste noire de la plupart des conventions internationales de pollution.

La présence du cadmium dans le milieu aquatique a un impact sur ses organismes, mais sa toxicité diffère selon l'espèce et la concentration. Il ne présente pas de toxicité aigüe pour les organismes marins à des concentrations susceptibles d'être rencontrées dans le milieu. Au niveau sublétal, des concentrations de 0.05 à 1.2ug/l peuvent provoquer des effets physiologiques pour les larves de crustacés (respiration, stimulation enzymatique) et des inhibitions de croissance pour les phytoplanctons. En effet, la présence des concentrations élevées qui sont estimées à l'ordre de 3.3 - 25mg/l, les mollusques peuvent s'isoler du milieu ambiant en fermant leurs valves. Par conséquent, le stress survient quand l'isolement est rapide, mais tôt ou tard, la mort aura lieu.

Chez les crustacés exposés à des concentrations sublétales de 6.4ug/l, la fertilité peut être affectée par une malformation de la carapace qui gênerait la femelle pour effectuer sa ponte, alors que chez les poissons, le cadmium peut perturber l'équilibre ionique en altérant la perméabilité des membranes cellulaires.

Les recherches en génotoxicologie des milieux aquatiques se sont imposées dans les années 80suite aux observations suivantes: (i) des polluants génotoxiques, mutagènes et/ou cancérogènes sont persistants en milieu aquatique et (ii) les organismes aquatiques développent des cancers -poissons en milieu marin côtier et en eau douce et mollusques bivalves en milieu marin. Dans certains cas, l'hypothèse d'une origine chimique est avancée

mais elle reste difficile à étudier sur le terrain pour des raisons liées à l'échantillonnage.

Le golfe d'Annaba est situé au niveau du littoral Est Algérien, limité à l'Est par le cap Rosa (8° 15'E et 36° 58'N), et à l'Ouest par le cap Garde (7° 16'E et 36° 58' N), distant de 40 km (Fig. 1). Le site d'El Battah (36° 50'N- 8° 50'E) pris comme référence, est soumis à un régime hydrodynamique important. Le second site Sidi Salem (36° 50'N-7° 47'E), reçoit, par le biais de l'oued Seybouse, des déchets urbains en plus des rejets d'une zone industrielle spécialisée dans la production de fertilisants et de produits phytosanitaires (Fig. 1)

Figure 1 : Localisation des sites d'étude dans le golf d'Annaba (Nord-Est, Algérie) :

Mytilus galloprovincialis (Lamarck, 1819) est un des « mytiloïdes » plus communément appelées moules sont des mollusques bivalves. Moule du méditerrané vit juste sous la surface d'eau fixé aux rochers dans la zone de balancement des marées. Consommé par les populations locales. C'est un organisme filtreur et sédentaire, se nourrissant de phytoplancton et de matières organiques en suspension. Ces espèces sont équivalves et très inéquilatérales, leurs formes allant du triangulaire au flabelliforme, dépourvues de dents de charnière. Les crochets se trouvent à l'extrémité antérieure. Le ligament est développé mais les muscles adducteurs sont vestigiaux.

· Une coquille bivalve allongée noire mesure de 6 à 8cm, permettant la sauvegarde de la muqueuse

· Un manteau (épiderme + derme) très développé qui est formé de 2 lames palléales enveloppant la totalité du corps

L'échantillonnage de mytilus galloprovincialis a été réalisé mensuellement sur une période d'une année (janvier 2007 à décembre 2007) et d'une manière aléatoire à l'aide d'un engin

appelé cope, constitué d'une partie métallique et d'un filet à environ 1,20 m de profondeur dans l'eau au niveau de la couche superficielle du sédiment (5 cm). Les différents dosages ont été effectués sur une taille de classe de 27 #177; 1 mm, représentant la taille la plus abondante.

L'extraction des protéines est réalisée suivant la technique de Shibko et al (1966), se fait à 4C° sous agitation pendant une nuit. L'homogénat est centrifugé à 4000tours/mn pendant 15minutes puis le surnageant est récupérée. Une fraction aliquote de 1000ul est destinée à la quantification des protéines selon la méthode de Bradford (1976).

La quantification des échantillons avant la lyophilisation a pour but de déterminer la concentration nécessaire à chaque dépôt de l'échantillon lors de l'électrophorèse.

Le dosage de la GST est réalisé selon Habig et al. (1974). Les tissus, sont homogénéisés

dans 1 ml de tampon phosphate (0,1 M ; pH 6). L'homogénat est centrifugé à14000 tours/mn, pendant 30 mn et le dosage est effectué dans une fraction aliquote de 200ìl du surnageant additionné de 1,2 ml du mélange [CDNB (1-Chloro-2,4-dinitrobenzene) 1mM, GSH (Glutathion réduit) 5 mM] dans du tampon phosphate. Les absorbances sont lues à une longueur d'onde de 340 nm, toutes les minutes pendant 5 mn.

L'activité spécifique de l'AChE a été déterminée selon la méthode d'Ellman et al. (1961). Les manteaux de Mytilus galloprovincialis sont homogénéisés dans 1 ml de solution détergente. Après centrifugation à5000 tours/mn, pendant 5mn, une fraction aliquote de 100ìl du surnageant est récupérée et additionnée à 100ìl de DTNB et 1 ml de tampon tris (0,1 M ; pH 7). Au bout de 3 à 5 mn de repos, 100ìl du substrat acétylthiocholine sont ajoutés. La lecture des absorbances est effectuée toutes les 4 mn pendant 20 mn à une longueur d'onde de 412nm

Les données sont représentées par la moyenne plus ou moins l'écart-type (m #177; s). Les moyennes ont été comparées deux à deux par le test t de Student. Une analyse de la variance à deux critères de classification (site, mois) a été effectuée. Le seuil de signification est p< 0,05.

La variation de l'AChE au sein des individus issus d'El Battah révèle une activité minimum de 0,47 #177; 0,14nM/mn/mg de protéines au mois d'octobre et une activité maximum de 5,62 #177; 0,13nM/mn/mg de protéines au mois de novembre (Tableau 1).

Par contre, au niveau du site de Sidi Salem l'activité minimale est de 0,11 #177; 0,01nM/mn/mg de protéines au mois de septembre et l'activité maximale est enregistrée au

mois de décembre avec une valeur de 3, 80 #177; 0,43nM/mn/mg de protéines. La comparaison des valeurs moyennes entre les deux sites révèle une inhibition significative

(p< 0,05) de l'activité de l'AChE chez les individus provenant de Sidi Salem comparativement à ceux d'El Battah. Ces différences ont été enregistrées au cours de

Mois	El Battah	Sidi Salem	P
Janvier	3,43 #177; 0,55	1,80 #177; 0,06	0,010**
Février	3,05 #177; 1,39	3,75 #177; 0,07	0,115
Mars	3,48 #177; 0,18	2,90 #177; 0,07	0,004**
Avril	4,25 #177; 0,22	1,07 #177; 0,07	0,000***
Mais	2,36 #177; 0,23	2,67 #177; 0,69	0,33
Juin	2,45 #177; 0,81	2,12 #177; 1,64	0,56
Juillet	3,07 #177; 0,43	3,09 #177; 1,12	0,966
Aout	1,85 #177; 0,61	0,78 #177; 0,47	0,016*
Septembre	0,75 #177; 0,54	0,11 #177; 0,01	0,085
Octobre	0,47 #177; 0,14	0,23 #177; 0,12	0,012*
Novembre	5,62 #177; 0,13	2,85 #177; 0,09	0,000***
Décembre	5,10 #177; 0,83	3,80 #177; 0,43	0,008**

Tableau 1 : Variation mensuelle de l'activité spécifique de l'acétylcholinestérase

(nM/mn/mg de protéines) au niveau du manteau de Mytilus galloprovincialis pêché dans

deux sites du golfe d'Annaba : El Battah et Sidi Salem au cours de l'année 2007

Ces résultats ont été confirmés par une analyse de la variance à deux critères de classifications où un effet site, un effet mois et une interaction site/mois hautement significatifs (p< 0,001) ont été observés (Tableau2).

Source de variation	ddl	SCE	CM	Fobs	P
Site	1	157,62	157,62	129,39	0,000***
Mois	11	256,8	23,35	19,16	0,000***
Interaction site/mois	11	115,31	10,48	8,6	0,000***
Erreur résiduelle	72	87,71	1,22	-	-
Total	95	617,43	-	-	-

Tableau 2 : Analyse de la variance à deux critères de classification (site, mois) de l'activité spécifique de l'acétylcholinestérase (nM/mn/mg de protéines) au niveau du manteau de Mytilus galloprovincialis pêché dans deux sites du golfe d'Annaba : El Battah et Sidi Salem au cours de l'année 2007 (m #177; s ; n = 4-6).

L'évaluation de l'activité spécifique de la GST montre au niveau du site d'El Battah une

valeur minimale de 1,22 #177; 0,84ìM/mn/mg de protéines au mois de juillet et une valeur

Mois	El Battah	Sidi Salem	P
Janvier	2,57 #177; 1,11	5,09 #177; 1,84	0,023*
Février	3,79 #177; 1,03	7,97 #177; 0,68	0,001***
Mars	3,00 #177; 0,67	5,39 #177; 0,70	0,000***
Avril	2,11 #177; 0,33	3,40 #177; 0,57	0,002**
Mai	4,66 #177; 0,16	6,35 #177; 0,58	0,007**
Juin	5,34 #177; 0,25	5,07 #177; 1,16	0,655
Juillet	1,22 #177; 0,84	1,30 #177; 0,19	0,868
Aout	3,96 #177; 0,75	5,00 #177; 0,97	0,003**
Septembre	2,24 #177; 0,70	3,33 #177; 1,16	0,072
Octobre	3,87 #177; 1,25 0,000***	12,31 #177; 1,61	0,000***
Novembre	3,58 #177; 0,57	6,75 #177; 2,35	0,035*
Décembre	3,90 #177; 1,05	6,62 #177; 1,09	0,001***

Tableau 3 : Variation mensuelle de l'activité spécifique de la glutathion Transférase (ìM/mn/mg de protéines) au niveau du manteau de Mytilus galloprovincialis pêché dans deux sites du golfe d'Annaba : El Battah et Sidi Salem au cours de l'année 2005 (m #177; s ; n = 4-6).

L'activité GST au niveau du site de Sidi Salem révèle un pic de 12,31 #177; 1,61 ìM/mn/mg

de protéines au mois d'octobre contre un minimum de 1,30 #177; 0,19 ìM/mn/mg de protéines au mois de juillet. Une comparaison des moyennes par le test t de Student révèle une augmentation très significative (p< 0,01) de l'activité GST chez les individus récoltés au niveau de Sidi Salem comparativement à ceux d'El Battah. Cette augmentation a été observée également durant les saisons automnale, hivernale et printanière, tandis qu'aucune différence significative n'a été enregistrée durant la saison estivale. Une ANOVA à deux critères de classification a montré un effet site, un effet mois et une interaction site/mois hautement significatifs (p< 0,001) (Tableau 4).

Source de variation	ddl	SCE	CM	Fobs	P
Site	1	4,476	4,476	10,68	0,002***
Mois	11	150,808	13,71	32,71	0,000***
Interaction Site/Mois	11	45,087	4,099	9,78	0,000***
Erreur résiduelle	72	30,178	0,419	-	-
Total	95	230,55	-	-	-

Tableau 4 : Analyse de la variance à deux critères de classification (site, mois) de l'activité spécifique de la glutathion S-transférase (ìM/mn/mg de protéines) au niveau du manteau de Mytilus galloprovincialis pêché dans deux sites du golfe d'Annaba : El Battah et Sidi Salem au cours de l'année 2005 (m #177; s ; n = 4-6).

DISCUSSION :

contamination par des xénobiotiques apportés par voie atmosphérique et via les eaux

usées riches en déchets d'origine domestique, industrielle et agricole. En conséquence, la contamination de la faune aquatique est inévitable et la capacité de bioaccumulation des micropolluants par ces organismes rend compte de la qualité des eaux et du niveau de pollution de plus en plus élevé. Les mesures de l'activité de l'AChE renseignent sur l'exposition à certains groupes de contaminants tels que les insecticides organophosphorés et les carbamates où une faible concentration de ces contaminants peut inhiber l'AChE. Selon Amiard-Triquet et al. (1998), une diminution de l'activité de l'acétylcholinestérase peut

L'activité spécifique de l'AChE chez Mytilus galloprovincialis échantillonné au niveau des deux sites du golfe d'Annaba sur une durée d'une année (2007) montre une forte inhibition de l'AChE dans le site de Sidi Salem; ceci est probablement lié à la localisation de ce site à proximité des sources polluantes. De plus, à cet endroit les concentrations en métaux

lourds dans les tissus de Mytilus galloprovincialis sont relativement élevées. Ces

résultats sont en accord avec ceux rapportés par Abbes et al. (2003) où une inhibition

de l'AChE a été déterminée chez Mytilus galloprovincialis pêché dans les mêmes sites du golfe d'Annaba. Une inhibition de l'AChE a été également observée chez une autre espèce de

Mollusque Dreissena polymorpha pêchée dans différents sites dans le nord de l'Italie

(Ricciardi et al., 2006). Des travaux de Fleming et al. (1995) ont également rapporté la

mort d'environs 1000 moules d'eau douce Elliptio sp. due à l'inhibition de l'AChE

Nos résultats montrent des valeurs similaires obtenues chez d'autres espèces de Bivalves, notamment chez la palourde Ruditapes decussatus (Abbes et al. 2003 ; Dellali et al. 2004), les moules Perna perna, Amblima plicata et D. trunculus (Najimi et al. 1997 ; Wendi et al. 2001; Romeo et al. 2004) et chez Scrobicularia plana (Peréz et al. 2004). Récemment, plusieurs étude sont prouvé que l'inhibition de l'AChE peut être un indicateur d'une contamination par les métaux lourds chez les organismes marins (Sokolova et al. 2005); ceci est conforté par les taux de métaux lourds relativement élevés à Sidi Salem dans le golfe d'Annaba (Beldi et al. 2006).

Les résultats concernant la GST indiquent une augmentation de l'activité spécifique de

cette enzyme chez les individus de Sidi Salem comparativement à ceux d'El Battah.

Cette augmentation se traduit par une forte activité de détoxification de l'organisme par

la GST liée à une exposition à un milieu pollué tel que Sidi Salem, provoque une diminution du glutathion chez la moule Mytilus galloprovincialis exposée aux métaux lourds. Cette diminution du glutathion est associée à celle des activités enzymatiques de la glutathion peroxydase dépendant du sélénium et de la glutathion réductase, suggérant ainsi une déficience de la défense anti-oxydante. Ces paramètres, telle que la diminution du glutathion, considérés comme des biomarqueurs de dommage. De plus en plus d'études montrent que le Cd exerce sa toxicité au niveau cellulaire, en partie, en induisant la formation de ROS (Reactive Oxygen Species), pouvant provoquer une peroxydation lipidique, des dommages à l'ADN ou encore une oxydation des protéines (Stohs et Bagchi, 1995; Risso de Faverney et al. 2001)

Conclusion :

La présente étude a été menée sur Mytilus galloprovincialis (Mollusca, Bivalvia) provenant de deux sites (El Battah, Sidi Salem), en vue de déterminer les variations annuelles de deux biomarqueurs (AChE, GST).

Dans les régions minières, les panaches des cheminées industrielles libèrent dans l'atmosphère différents métaux qui se répandent dans les milieux aquatiques. Tous ne sont pas également toxiques. Le nickel, le plomb, le zinc et le cuivre sont moins que le cadmium, presque aussi toxique que le mercure. Le cadmium s'accumule dans les sédiments des lacs et peut avoir des effets néfastes sur les invertébrés.

Olivier Perceval, étudiant au doctorat, s'est intéressé à l'état de santé des populations de bivalves (densité, biomasse, taux de croissance, productivité, etc.) soumises à différentes concentrations de cadmium. « Lorsque la concentration ambiante de cadmium est élevée, les bivalves sont moins nombreux et se reproduisent moins bien », résume le jeune chercheur

Presque tous les groupes zoologiques peuvent être affectés par les détergents, avec des sensibilités et des réactions variables avec les espèces.
Les coquillages sont assez résistants aux tensioactifs tells que le cadmium, à court terme, ce qui semble résulter de leur capacité à s'isoler momentanément du monde extérieur par occlusion des valves. Mais bien vite l'animal est placé devant l'alternative de mourir par asphyxie ou par intoxication. Dans le cas où l'intoxication n'est pas fatale, le cadmium peut avoir des effets insidieux qui se révèlent par une modification du comportement. Ils réduisent, par exemple, les mouvements d'ouverture et de fermeture des coquilles et altèrent les mouvements d'enfouissement. Ces phénomènes peuvent avoir des conséquences graves pour l'organisme en freinant sa respiration et sa collecte de nourriture et en inhibant son réflexe d'enfouissement à l'approche d'un prédateur.
La presque totalité des chercheurs s'accorde pour reconnaître que les stades jeunes sont plus sensibles au cadmium que les adultes et souvent à des doses très faibles. Tous les stades du développement sont affectés.
La fertilité des spermatozoïdes de la moule est par exemple inhibée à des concentrations inférieures à 1 ug/g. le cadmium empêche la ségrégation des micro-mères au clivage 4 du futur embryon chez les moules. La mortalité par les tensioactifs commence au stade gastrula et se poursuit au stade embryonnaire avant la formation du système vasculaire. Des perturbations de la croissance et du développement ont été aussi observées pour les oeufs et les larves des mollusques. De nombreux travaux ont mis conjointement en évidence à quel niveau et de quelle façon s'exerçait la toxicité de cadmium. Leur influence sur les échanges cellulaires au niveau des membranes, sur les phénomènes d'oxydation et sur les différents stades de l'activité respiratoire a été fréquemment mis en avant et peut conduire à la destruction partielle des branchies et à des désordres respiratoires graves. Il a également été mis en évidence une atteinte de l'épiderme corporel et des intestins.

D'autres recherches ont montré que le cadmium peut perturber le métabolisme et modifier la composition des lipides, des lipoprotéines, des protéines, des acides nucléiques et du glycogène, avec perturbation de l'activité enzymatique au niveau des branchies et du foie et en particulier de l'activité oxydasique des cytochromes au niveau des parois des lysosomes.

Résumé :

L'environnement est contaminé de manière générale par de nombreuses molécules de synthèse responsables d'effets toxiques indéniable sur la population animales et végétales. Il est dès lors nécessaire de développer des méthodes permettant de détecter et d'évaluer ces pollutions.

Les effets toxiques des métaux lourds ont été rapportés et reproduits expérimentalement depuis plusieurs années. Le cadmium a fait l'objet de multiples études toxicologiques, aussi bien chez les organismes terrestres qu'aquatiques.

Les écosystèmes aquatiques continentaux (eaux courantes, systèmes lacustres) et marins

(estuaires, zones côtières, zones du large) représentent des réceptacles pour la quasi-totalité

des contaminants pouvant avoir une origine naturelle (géologie, érosion...) ou

anthropique (rejets urbains, agricole, industriel...). Ses ressources halieutiques sont menacées par une pollution liée à une activité économique en plein essor. Dans le cadre d'un programme de biosurveillance de la qualité des eaux de la baie d'Annaba, l'activité spécifique de deux biomarqueurs, l'acétylcholinestérase (AChE) et la glutathion S-transférase (GST), a été mesurée au niveau du manteau d'un mollusque bivalve, Mytilus galloprovincialis. Les échantillons ont été collectés mensuellement durant l'année 2007 au niveau de deux sites: El Battah, éloigné des sources polluantes, et Sidi Salem situé près du port au voisinage des différents rejets. Les résultats obtenus montrent une inhibition significative de l'AChE et une augmentation très significative de la GST chez les individus récoltés au niveau de Sidi Salem comparativement à El Battah. L'inhibition de l'AChE et l'augmentation de la GST chez les individus récoltés au niveau du site de Sidi Salem au cours de l'année 2007 sont en rapport avec le niveau d'exposition de ce site à la pollution notamment par les métaux lourds.

Le cadmium est un métal lourd qui ne semble pas biologiquement essentiel ou bénéfique au métabolisme des êtres vivants mais il est toutefois impliqué dans les changements du métabolisme mitochondrial, la perméabilité membranaire et l'inhibition de la phosphorylation oxydative et de la synthèse des protéines.

En effet, la présence des concentrations élevées qui sont estimées à l'ordre de 3.3 - 25mg/l, les mollusques peuvent s'isoler du milieu ambiant en fermant leurs valves. Par conséquent, le stress survient quand l'isolement est rapide, mais tôt ou tard, la mort aura lieu.

ü Rapport de stage de licence : Dosage des biomarqueurs (Baziz Sarah et Baaziz Zineb) P.P. 1.2.3.4, P.14

ü Thèse de magistère : Jumelage des bioindicateurs végétaux : (Xantoria parietina) et (Funaria hygrométrica) aux réseaux de surveillances et de contrôle de la qualité de l'air SAMA SAFIA dans la région d'Annaba, P.3