L'intérêt de l'étalon dans les différents paramètres biochimiques.

Juin 2015

REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

MINISTERE DE LA SANTE, DE LA POPULATION ET DE LA
REFORME HOSPITALIERE

Institut National De Formation Supérieure Paramédicale De

Constantine

Mémoire Professionnel En Vue De L'obtention De
La Licence Professionnalisante

Spécialité : Laborantins De Santé Publique

Encadré Par :		Elaboré Par :



L'intérêt De L'étalon Dans Les Différents Paramètres Biochimiques

Thème :

? Dr. Benhadda S. ? Khelif Ibrahim

? Mme. Sifi F.Z - PEPM ? Touita Atef

Brahim

Dédicaces

Je dédie ce travail :

A mes parents qui voient aujourd'hui leurs efforts et leurs sacrifices couronnés
par ce diplôme. Ils ont veillé à mon éducation avec infiniment d'amour et
d'affectation.
Que Dieu me permette de leur rendre au moins une partie, aussi infime soit-elle,
de tout ce que je leur dois.

A mon frère Mohamed Elhadi en témoignage des liens solides qui nous
unissent. Et à qui je souhaite beaucoup de bonheur et de réussite...

A toute ma famille grands et petits, mes oncles, tantes, cousins et cousines...
A toute la famille «Khelif » et « Cheguetmi » ...

A Mon binôme Touita Atef et sa famille...

A tous mes ami (es) un par un avec qui j'ai passé de merveilleux moments et
avec qui j'ai partagé malheur et bonheur en particulier « Bilel, Mounir, Imad,
Ward, les 3 Minous, Mourad, Mohamed, Abdallah, Ayoub, Zouhir, Mourad,
Azzeddine, Saïd, ... » et la liste reste longue...

A mes camarades de 3ém année Laborantins de Santé Publique (LSP) sur tout catégorie Wlad Echa3b et tous ceux de l'INFSP de Constantine.

A l'ensemble des personnes qui ont participé de près ou de loin à l'élaboration

de ce projet.

Que ce travail soit le modeste fruit de mes longues années d'haleine.

Atef

Dédicaces

A la fin d'une formation, il est de tradition d'exprimer ses reconnaissances

à l'égard de ceux qui, par leurs apports multiformes ont contribué à

l'aboutissement et à la réussite de celle-ci.

Toutes les lettres ne sauraient trouver les mots qu'il faut...

Tous les mots ne sauraient exprimer la gratitude,

L'amour, Le Respect, La Reconnaissance...

Aussi, c'est tout simplement que

Je dédie cette

Mémoire

À Mes Chers Parents
Aucune dédicace ne saurait exprimer mon respect, mon amour
Éternel et ma considération pour les sacrifices que vous avez consenti pour mon
Puisse Dieu, le Très Haut, vous accorder santé, bonheur et longue
vie et faire en sorte que jamais je ne vous déçoive.

A Mon binôme

Ibrahim Khelif et sa famille

A Mes Frères Et Soeurs
En témoignage de mon affection fraternelle, de ma profonde
tendresse et reconnaissance, je vous souhaite une vie pleine de bonheur et de
Succès et que Dieu, le tout puissant, vous protège et vous garde.

Un Spécial Dédicace à « l'Armée National Populaire Algérienne »

Atef & Brahim

Remerciement

« Le plus grand merci s'adresse au bon Dieu »

Nous tenons à exprimer notre plus grand remerciement à nos Très chers parents
pour leur soutien moral et leurs encouragements.

Nous tenons à témoigner de notre profonde gratitude et remerciements à tous nos
professeurs pour leur disponibilité et leur loyauté durant notre cursus en
particulier nos encadreurs Mme. Sifi Fatima Zohra et Dr. Benhadda Sebti qui
malgré leurs occupations et leurs responsabilités, ils ont toujours eu le temps de
nous écouter, nous conseiller et nous orienter.

Aux équipes des laboratoires de l'EPH Bouguerra Boulaaress - Tebessa / EHS
Khaldi Abdelaziz - Tebessa, pour leurs sympathiques et consistances durant notre

stage.

Egalement un remerciement à tous nos collègues et à tous les étudiants de la 3éme
Année Laborantins de Santé Publique (LSP) promotion 2015, ainsi qu'à tous nos
collègues (es) a l'INFSP de Constantine.

Enfin, nos remerciements vont aussi à l'égard des membres de Jury qui nous ont
fait l'honneur de juger notre travail.

A toutes les personnes qui ont contribué de près ou de loin à la réalisation de notre

mémoire.

Sommaire
· Dédicaces				· Remercîment
		· Introduction
		· Choix Du Thème
		· Problématique
		· Hypothèses
VOLET THEORIQUE
CHAPITRE I : GENERALITES
I.1. Biochimie Clinique		05
I.2. Utilités Des Examens Biochimiques		05
I.3. Les Variétés Des Examens Biochimiques		06
I.4. Les Méthodes De Dosage En Biochimie ..		07
I.4.1. Méthodes Optique ..		09
I.4.2. Méthodes Enzymatiques .		10
I.4.3. Méthodes Immunologiques		11
CHAPITRE II : LE CONTROLE DE QUALITE
II.1. Les Etapes D'une Analyse Biochimique		12
II.1.1. Phase Pré-Analytique		12
II.1.2. Phase Analytique		13
II.1.3. Phase Post Analytique		13
II.2. Les Causes D'erreurs ..		14
II.2.1.Phase Pré-Analytique .		15
II.2.2.Phase Analytique		15
II.2.3.Phase Post Analytique		15
II.3. Le Contrôle De Qualité En Biochimie		15
II.3.1. Définition De Contrôle de qualité .		16
II.4. Les Moyens De Contrôle .		16
II.4.1. Etalons Et Sérums De Contrôle		16
II.5. Les Critères De Fiabilités Des Méthodes Analytiques		17
II.5.1. Les Critères Statistiques		17
II.5.2. Les Critères Opérationnels		18
II.5.3. Les Critères Fonctionnels ..		18
CHAPITRE III : L'ETALONNAGE
III.1. Les Etapes De Dosage		19
III.2. L'étalonnage (Calibration)		20
III.3. Exemple D'une Gamme D'étalonnage .		22
III.3.1. Le Contrôle de Qualité Par Les Sérums De Contrôle ..		22
III.3.2. L'Analyse De L'échantillon		23
III.4. La Variabilité De La Droite De L'Etalonnage		24
III.5. Autre Caractéristiques D'un Dosage Biochimique Photométrique ..		27
III.5.1. Domaine De La Mesure		27
VOLET PRATIQUE
I. Méthodologie De L'enquête	29
I.1. Objectif de Recherche	29
I.2. Période De L'enquête	29
I.3. Lieu De L'enquête .	29
I.4. Outil De L'enquête	29
I.5. Population Cible	29
I.6. Echantillonnage .	29
II. Résultats Et Analyses	30
II.1. Présentation, Analyse Et Interprétation Des Résultats .	30
II.2. Analyses Globale	42
II.3. Vérification Des Hypothèses	43
? Conclusion
? Suggestion
? Bibliographie
? Annexes

Dans le dosage biochimique, la technique est basée sur un élément majeur qui est l'étalon, c'est un élément qui conditionne la qualité des résultats.

Introduction :

Les analyses biologiques constituent un élément primordial et capital dans le diagnostic et le suivi thérapeutique des pathologies, dont l'objectif est d'améliorer la qualité des soins et la prise en charge des patients. Elles sont utiles aux praticiens que ce soit médecins généralistes ou spécialistes. Ces analyses ont un rôle central à jouer du point de vue de l'économie de la santé et du suivi, voire la réduction des dépenses de santé. En effet, l'orientation actuelle en matière de santé publique ne consiste pas seulement à guérir les maladies, mais encore à les prévenir avant qu'elles ne surviennent.

Les analyses biologiques permettant :

? En amont, la prévention des maladies, pour les éviter ou empêcher leur propagation.

? En aval, le traitement précoce et approprié des maladies et la suivie thérapeutique.

Pour obtenir ces objectifs, ces analyses médicales nécessitent un certain nombre de condition à respecter à savoir le prélèvement, le transport des échantillons, la conservation des réactifs, et le processus analytique.

Ce dernier lui-même nécessite le respect des conditions du dosage à savoir la préparation des échantillons et les réactifs, la qualité du matériel utilisé, et l'application de la technique du paramètre à doser qui est la tâche essentielle du laborantin.

Choix Du Thème :

Durant notre cursus pédagogique, en qualité d'élève laborantin de santé publique au niveau de l'institut national de la formation supérieure paramédicale de Constantine, et grâce à nos observations au niveau des différents terrains de stage, plus particulièrement au laboratoire de l'EPH Bouguerra Boularess - TEBESSA, EHS Khaldi Abdelaziz - TEBESSA, en vue de l'élaboration d'un mémoire de fin d'études, notre choix est porté sur un thème relatif à l'intérêt de l'étalonnage devant chaque nouvelle série de dosage dans les différentes paramètres biochimiques.

Problématique :

Le dosage des paramètres biochimiques, nécessite généralement L'étalonnage et le calibrage de la méthode du dosage. Il s'agit de comparer la Densité Optique des échantillons à tester avec celle d'une solution dont on connaît la concentration avec précision et que l'on appelle étalon.

Cette étalonnage est spécifique pour chaque coffret de réactif et nécessaire pour chaque nouvelle série de dosage dont le but est d'effectuer la technique correctement et donc obtenir des résultats fiables. Cependant, au niveau des différents terrains de stage, nous avons constatés une sous-estimation de l'étalon, en observant que certains laboratoires n'utilisent l'étalon qu'une fois par semaine ou plus, alors qu'ils doivent le faire devant chaque nouvelle série de dosage. Pour comprendre les raisons d'une telle pratique, nous avons concentré nos recherches lors de notre stage, pour répondre à la question suivante :

- Pourquoi certains laboratoires n'effectuent pas l'étalonnage devant toute nouvelle série de dosage des paramètres biochimiques ?

Hypothèses :

1 - Certains laborantins ne respectent pas toutes les étapes décrites par la fiche technique.

2 - Les laborantins démontrent un manque de connaissance concernant les conditions de réalisations de l'étalon.



VOLET

THEORIQUE



CHAPITRE I :

Généralités

[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE I : GENERALITES]

CHAPITRE I : GENERALITES

I.1. Biochimie Clinique :

La biochimie clinique ou chimie pathologique ou chimie clinique est le domaine de la biologie médicale qui est en général concerné par l'analyse des molécules contenues dans les fluides corporels (sang, liquide céphalo-rachidien, urines, etc.) et l'interprétation des résultats de ces analyses par un biologiste médical dans le but de caractériser l'origine physiopathologique d'une maladie.

La biochimie clinique se cantonne à la recherche ou au dosage des molécules pouvant être impliquées dans une pathologie.

Le travail du laborantin spécialisé en biochimie clinique consiste à l'interprétation des résultats en fonction du reste du bilan biologique. Cette interprétation prend en compte les caractéristiques physiologiques du patient (âge, sexe, poids...) et les symptômes repérés par le clinicien dans le but d'aboutir avec lui au diagnostic de la pathologie.

I.2. Utilité Des Examens Biochimique :

En gros, le clinicien se pose une question : qu'est-ce que je dois faire pour assurer une prise en charge du patient et est-ce que c'est urgent ou pas ? Les études de médecine sont des études de maladies et permettent de savoir prescrire de façon approprié les bonnes analyses. Le biologiste donne une réponse précise, pertinente et intégrée à la décision clinique. Mais obtenir une réponse correcte peut être semé d'embûches.

- Les examens biochimiques sont utilisés en :

V' Dépistage: détection des situations infra clinique.

V' Diagnostic: confirmation ou infirmation d'un diagnostic clinique.

V' Suivi Des Patients: suivi e l'évolution du patient ou de la réponse au traitement. V' Pronostic: information sur l'évolution d'une pathologie.

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Mémoire Professionnel De Fin D'études |3^ème L S.P - INFSP de Constantine

[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE I : GENERALITES]



Figure 01 : la place occupées par les examens biochimique dans la chaine du soin

I.3. Les Variétés Des Examens Biochimique :

Les analyses biochimiques consistent à mesurer les quantités des constituants des liquides

biologiques (sang, urine, etc.). La plupart des maladies ont en effet des répercussions sur leur composition et leur étude peut aider au diagnostic et au suivi de nombreuses maladies.

I.3.1 L'ionogramme Sanguin :

L'ionogramme sanguin est le dosage des différents électrolytes sanguins, qui interviennent

dans plusieurs métabolismes et réactions chimiques de l'organisme. L'ionogramme permet de détecter :

y' les maladies rénales,

y' les maladies hormonales

y' les anomalies de l'hydratation

y' les maladies digestives, notamment l'évaluation de la gravité des vomissements, des

diarrhées

y' une malnutrition

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Mémoire Professionnel De Fin D'études |3^ème L S.P - INFSP de Constantine

[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE I : GENERALITES]

L'ionogramme sanguin permet également de surveiller l'apport hydrique chez une personne sous perfusion. La connaissance de la concentration en ions sanguins permet également de définir l'osmolalité du sang. L'osmolalité du sang doit être maintenue entre 280 à 310 mOsm/kg d'eau et définit essentiellement l'existence ou non d'une déshydratation.

I.3.2 Les Gaz Du Sang :

La connaissance de la concentration des gaz du sang donne essentiellement des renseignements sur la fonction respiratoire, et permet de connaître l'équilibre acido-basique de l'organisme.

I.3.3 Les Lipides Du Sang :

Le dosage des lipides dans l'organisme donne essentiellement des renseignements sur les maladies cardiovasculaires et les risques de thromboses. L'examen concerne notamment les triglycérides et le cholestérol. Le lipidogramme concerne le dosage des lipoprotéines et des alphas lipoprotéines. Ce sont des structures qui transportent le cholestérol dans le sang.

I.3.4 Les Protéines Du Sang :

Le bilan protidique permet de détecter une inflammation, des maladies du foie (cirrhose), des maladies héréditaires, des maladies rénales, des infections, des cancers...

L'électrophorèse des protéines est un examen qui sépare les différentes protéines du sérum et renseignent sur leur dosage respectif. Aujourd'hui les résultats sont affichés automatiquement. Le dosage concerne essentiellement l'albumine et les globulines.

I.3.5 Le Métabolisme Des Glucides :

Le principal examen sanguin des glucides est la glycémie. Sa valeur normale est comprise entre 1.17g/L et 1.30 g/L. Ce dosage nécessite obligatoirement que le patient soit à jeun.

L'hémoglobine glyquée ou glycosylée (HbA1C) :

Il constitue 4 à 6% de l'hémoglobine totale. Cet examen donne des renseignements sur le statut glycémique d'un patient durant les 3 mois précédents le dosage. Sa valeur est augmentée en cas de diabète instable ou en cas d'insuffisance rénale. Son taux est diminué lorsqu'il existe des épisodes répétées d'hypoglycémie mais également en cas d'anémie arégénérative.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE I : GENERALITES]

L'hyperglycémie provoquée par voie orale :

Cet examen est un dosage de la glycémie après ingestion d'une quantité précise de glucose. Il s'agit essentiellement d'un test prescrit pour dépister un diabète. Sa valeur normale doit être inférieure à 1.43 g/L.

I.3.6 Les Enzymes Du Sang :

Il existe dans l'organisme plusieurs réactions chimiques. Dans le sang, certains types de protéines favorisent les réactions chimiques. Ce sont les enzymes. Ces protéines existent dans notre organisme en très petite quantité. La majorité des réactions chimiques de l'organisme aboutit à la production d'énergie. Les enzymes ont des rôles multiples dans le sang :

V' initient et favorise une réaction chimique (ou catalyseur biologique) V' interviennent dans la digestion

V' interviennent dans l'élimination des toxines

V' participent à la formation de certains éléments cellulaires

Les enzymes sont catégorisées en fonction des réactions chimiques sur lesquelles elles interviennent. La souffrance ou la lésion d'un organe entraîne alors la libération de ces enzymes, qui vont être déversées et véhiculées en grande quantité dans le sang. Ainsi, chaque organe fonctionne avec un enzyme propre à lui. Le dosage des enzymes donne des renseignements sur toutes les maladies et affections pouvant toucher l'organe concerné.

I.3.7 Les Vitamines :

Les vitamines sont des substances utiles au fonctionnement et à la croissance de l'organisme. Cependant, ces substances ne sont pas synthétisées par l'organisme mais apportées par les aliments. La principale anomalie rencontrée est la carence en vitamine. La malnutrition est la première cause, mais ensuite plusieurs maladies peuvent être accompagnées d'une variation des valeurs vitaminiques de l'organisme : problèmes digestifs, parasitose, atteintes rénales, infections...

Une augmentation du taux de vitamines dans le sang est généralement due à un diabète, des prises médicamenteuses, un alcoolisme, un excès d'apport alimentaire en vitamines...

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE I : GENERALITES]

I.3.8 Les Hormones :

Une hormone est une molécule qui permet de transmettre des messages chimiques. Elle est sécrétée par une glande du système endocrinien suite à une stimulation. Elle est distribuée dans l'organisme aux organes sur lesquels elle agit, principalement par la circulation sanguine. L'action de ces hormones sur l'organe cible peut être une stimulation d'une de ses fonctions, ou au contraire son inhibition.

Les hormones sont des éléments prépondérants dans la régulation du fonctionnement de l'organisme en assurant son équilibre, et tout déséquilibre hormonal peut entrainer des nombreuses maladies, à l'infertilité et à la dépression, à la perte de concentration et à perte de la force musculaire

I.4. Les Méthodes De Dosage En Biochimie :

I.4.1 Méthodes Optique :

En biochimie en il en existe beaucoup de méthode de dosage mais généralement on utilise les méthodes optique par ce qui elles sont simple et non couteuse

A. Photométrie Et Spectrophotométrie D'absorption :

? Principe :

Cette méthode est basée sur l'intensité de coloration des substances ou des paramètres à doser. La lecture se fait par densitomètre optique .La (D.O) de la préparation est en rapport étroit avec la concentration de la substance à doser. Lorsqu'on fait passer de la lumière à travers une solution colorée, celle-ci absorbe de la couleur complémentaire. Si on utilise un rayon monochrome correspondant à cette couleur, il sera absorbé au moins en partie.

? Appareils Utilisées :

On utilise spectrophotomètres à monochromateur qui nous permet de changer la longueur d'onde.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE I : GENERALITES]

? Dosage :

La densité optique étant proportionnelle à la concentration d'une solution. On peut doser cette dernière en lisant sa densité optique dans un appareil étalonné avec la même substance à différentes concentrations connues.

B. Spectrophotométrie D'absorption Atomique :

Elle consiste à mesurer l'absorption de radiations de photons spécifiques par des atomes de vapeur. En biologie clinique, on l'utilise pour le dosage sérique du calcium, du magnésium, du fer, du cuivre..., etc.

En toxicologie et en pharmacologie, on l'utilise pour doser des métaux.

C. Photométrie D'émission Atomique :

Par chauffage apparaissent dans une solution des ions à l'état excité grâce à l'énergie apportée par une flamme. En revenant à l'état normal, les atomes émettent une énergie lumineuse dont la longueur d'onde est caractéristique de l'élément à doser et dont l'intensité est proportionnelle à sa concentration.

D. Fluorimetrie :

Cette méthode repose sur le fait que les molécules sous l'action d'un rayon X ou UV ou visible passent à l'état excité c'est-à-dire un niveau d'énergie supérieur puis reviennent à l'état normal en émettant une lumière fluorescente.

I.4.2 Méthodes Enzymatiques: ? Généralités :

Les enzymes sont des catalyseurs protéiques possédant une spécificité vis-à-vis d'un substrat et elles catalysent un seul type de réaction. L'activité des enzymes varie selon les conditions expérimentales comme le pH, la température et la concentration des substrats. En réalité, pour chaque enzyme donnée, chaque laboratoire possède ses propres valeurs de référence.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE I : GENERALITES]

? Principales Méthodes Utilisée : V' Dosages Photométriques :

On peut mesurer la vitesse d'une réaction enzymatiques en appréciant dans un temps donné soit la quantité du substrat disparu soit la quantité de produit apparu (ex : on peut doser les transaminases sériques grâce à l'acide alphacétoglutarique).

V' Dosages Fluorimetriques :

On va suivre la variation de fluorescence du produit formé au cours de la réaction enzymatique. Ces mesures peuvent être faussées par la fluorescence propre des réactifs et la pureté insuffisante de certaines enzymes.

V' Dosages Isotopiques :

On va utiliser un substrat radioactif et on va mesurer la radioactivité du produit formé pour obtenir la vitesse de sa formation qui sera représentative de l'activité enzymatique.

I.4.3 Méthodes Immunologiques :

Ces méthodes vont utiliser soit des anticorps spécifiques pour identifier et éventuellement mesurer les antigènes soit des antigènes pour déterminer un taux d'anticorps.

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CHAPITRE II :

Le Contrôle De

Qualité

[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE II : LE CONTROLE DE QUALITE]

CHAPITRE II : LE CONTROLE DE QUALITE

II.1. Les étapes d'une analyse biochimique :

Le circuit d'un échantillon dans les examens biologiques est un ensemble complexe des étapes qui de la prescription (ordonnance) au compte rendu final (résultats) nécessite une surveillance permanente.

Il contient 3 phases :

II.1.1 .Phase Pré-Analytique :

Commence dès le contact du patient et s'arrête au début de l'analyse.

A. Prescription :

Par le médecin, élaboré selon son diagnostic.

B. Prélèvement :

C'est un acte qui consiste à recueillir du sang ou autre liquide biologique en vue d'analyse.

C. Identification :

Inscrire le nom, prénom et numéro du spécimen sur les tubes ou le récipient.

D. Réception :

Les échantillons sont réceptionnés puis le contrôle leur conformité par rapport à la demande initiale et vérifié le nom et le prénom du patient.

E. Enregistrement :

Les échantillons sont organisés et enregistré, chacun dans son propre registre par ordre numérique et avec une écriture lisible et claire.

F. Prétraitement Et Conservation :

Les échantillons sont conservés selon les conditions exigées par les normes. Le contrôle des conditions de conservation est essentiel à la stabilité des échantillons.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE II : LE CONTROLE DE QUALITE]

II.1.2 .Phase Analytique :

Etape technique proprement dite de l'analyse :

G. Analyse :

Analyser le plus rapidement possible après réception en respectant strictement les normes et les procédures du laboratoire.

II.1.3 .Phase Post Analytique :

Consiste à valider les résultats bruts et les présenter dans une forme permettant une bonne interprétation.

H. Validation Et Edition :

Lorsque les analyses d'une série d'échantillons sont terminées chaque dossier est vérifié et valider par le responsable technique. Ce dernier s'assure de la cohérence de l'ensemble des résultats et en fin il vérifie et signe ces résultats.

I. Interprétation :

Par le médecin prescripteur pour poser un diagnostic.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE II : LE CONTROLE DE QUALITE]

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE II : LE CONTROLE DE QUALITE]

II.2. Les Causes D'erreurs :

Entre le moment où le clinicien réclame une analyse et celui où il reçoit le résultat, plusieurs erreurs peuvent se produire.

II.2.1 .Phase Pré-Analytique :

La maitrise de cette phase est délicate car elle met en jeu différents intervenants et sur des lieux différents :

> Prélèvement : Le jeune, K+ (avec garrot), prise médicamenteuse, ...etc.

> Identification : Etiquetage des tubes et des fiches de renseignements.

> Réception : Erreurs de transcription (mauvaise organisation de secrétariat).

II.2.2 .Phase Analytique :

Ces erreurs proviennent généralement des raisons suivantes :

> Défaut d'étalonnage de l'appareil.

> Défaut de nettoyage.

> Non utilisation des sérums de contrôles.

> Contamination des réactifs.

> Mauvaise conservation des réactifs.

II.2.3 .Phase Post-Analytique :

> Erreurs de transcription. > Erreurs de transmission.

II.3. Le Contrôle De Qualité En Biochimie :

L'examen biologique est un ensemble complexe d'étapes qui de la prescription (ordonnance) au compte rendu final (résultat) exige une surveillance permanente avec des contrôles contribuant à une assurance de qualité.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE II : LE CONTROLE DE QUALITE]

Le contrôle de qualité ne peut être en aucun cas un instrument de mesure pour définir les bons et les mauvais laboratoires mais un moyen dont dispose le biologiste pour déceler une anomalie et l'obliger à y remédier rapidement.

II.3.1 Définition De Contrôle De Qualité :

Le contrôle de qualité mis en place pour assurer la qualité des résultats permet de fournir des indications indispensables pour le technicien et le biologiste dans la validation technique et biologique des résultats d'analyse.

Le but de contrôle de qualité est déceler, réduire et si possible éviter les nombreuses erreurs liées aux méthodes, aux réactifs, aux manipulations, au matériels, ... etc.

II.4. Les Moyens De Contrôle :

II.4.1 Etalons et sérums de contrôle :

Ce sont des substances de composition définie qui doivent présenter un certain nombre de caractères (pureté, stabilité)

L'origine de ces sérums est humaine ou animale.

Un sérum de contrôle ne peut en aucun cas remplacer un étalon.

A. Le Blanc Réactif :

En biochimie, on parle du blanc réactif qui est une solution utilisé pour calibrer la machine de test (spectrophotomètre). Il sert dans le milieu réactionnel destiné à la détermination de l'absorbance de solvant et le réglage de l'appareil à ZERO pour que notre lecture soit correcte.

DO Blanc réactif obtenue en photométrant (spectrophotomètre) le réactif seul ou mélangé avec de l'eau ou du sérum physiologique. On utilise généralement cette DO pour régler l'absorbance sur 0 (zéro de l'appareil). Le blanc réactif sert à éliminer le signal dû au réactif seul et à l'appareil.

B. Etalon :

L'étalon est une solution qui permet de calibrer l'appareil de mesure chimiques, il est pré titré par le fabriquant, méthode par méthode ce qui signifie qu'il y a autant de valeur que de méthodes de dosage. L'étalon est utilisé comme contrôle d'exactitude.

L'étalon est une solution qui on connait sa concentration avec précision, cette concentration mesurée avec méthode de référence.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE II : LE CONTROLE DE QUALITE]

C. Contrôles Normal Et Pathologique :

V' Contrôle Normal :

Le contrôle normal est un dosage dont le résultat est déjà connu pour être normal. Il est utilisé pour vérifier que rien ne s'est mal passé lors de la procédure et pour un résultat correct, juste et fiable

V' Contrôle Pathologique :

Le contrôle pathologique est un dosage réalisé auprès d'un échantillon simple qui devrait normalement déboucher sur un résultat négatif. Il permet de vérifier la contamination des réactifs ou des objets qui donnent de faux positifs.

II.5. Les Critères De Fiabilités Des Méthodes Analytiques :

II.5.1 .Les Critères Statistiques :

A. Précision :

La précision analytique d'une méthode représente la qualité de l'accord dans une zone définie de valeurs à mesurer, entre les mesures répétées effectuées sur un même échantillon dans des conditions constantes et déterminées.

V' Répétabilité :

Est l'expression de la précision, lorsque le même opérateur applique la même méthode sur le même échantillon, dans le même laboratoire, avec les mêmes appareils et les mêmes réactifs au cours de la même analyse.

V' Reproductibilité :

Est l'expression de la précision, lorsque le même opérateur applique la même méthode est réalisées dans des diverses conditions : opérateurs différents, appareillage, séries, jours, laboratoires.

B. Détectabilité :

C'est la plus petite quantité d'analyte qui peut être détectée.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE II : LE CONTROLE DE QUALITE]

II.5.2 .Les Critères Opérationnels :

L'exactitude analytique représente la différence entre la valeur observée et la valeur cible pour chaque analyte du contrôle.

II.5.3 .Les Critères Fonctionnels :

A. Spécificité :

Une méthode est dite spécifique lorsqu'elle fournit un signal analytique pour un constituant particulier à l'exclusion de tous autres constituants présents dans le spécimen.

B. Sensibilité :

Une méthode est dite sensible si une faible différence de concentration fournit un signal de détection d'amplitude suffisante.

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CHAPITRE III :

L'étalonnage

[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE III : L'ETALONNAGE]

CHAPITRE III : L'ETALONNAGE

III.1.Les Etapes De Dosage :

Un dosage par étalonnage consiste à déterminer la concentration d'une espèce chimique en comparant une grandeur physique, caractéristique de la solution, à la même grandeur physique mesurée pour des solutions étalon. La grandeur physique peut être l'absorbance, la conductivité électrique, etc. ...

La détermination de la concentration se fait soit par la lecture sur le graphe de la courbe d'étalonnage, soit par le calcul à partir de l'équation modélisant le graphe. Le dosage par étalonnage est une méthode non destructive, car elle ne met pas en jeu de réaction chimique.

Le spectrophotomètre peut être utilisé pour titrer une solution colorée. Cette méthode de titrage est non destructive.

Si la loi de Béer-Lambert est bien respectée, on obtient une droite passant par l'origine. On trace ainsi une courbe d'étalonnage. Pour effectuer le titrage d'une solution inconnue S, on place la cuve contenant la solution à titrer dans le spectrophotomètre et on relève la valeur de l'absorbance AS.

A l'aide de la courbe d'étalonnage, on peut déterminer la concentration CS de la solution.

Etapes habituelles de l'utilisation d'un spectrophotomètre :

1. Mise sous tension du photomètre ; respecter le temps nécessaire de chauffe (stabilisation de l'intensité lumineuse) avant utilisation.

2. Sélection de la longueur d'onde.

3. Réglage du 0% d'absorbance (facultatif).

4. Réalisation de l'étalonnage.

5. Contrôle de qualité.

6. Dosage des échantillons.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE III : L'ETALONNAGE]

III.2.L'étalonnage (Calibration) :

En biochimie, il est généralement nécessaire d'étalonner (ou de calibrer) la méthode de dosage. Il s'agit de comparer la DO des échantillons à tester avec celle d'une solution dont on connaît la concentration avec précision et que l'on appelle étalon.

La concentration de l'étalon a été mesurée avec une méthode de référence. On peut utiliser différentes dilutions de cet étalon et ainsi obtenir une « gamme d'étalonnage ». Il est également possible d'utiliser l'eau pure (obtenue par distillation et/ou déminéralisation) comme un étalon de valeur nulle.

III.3.Exemple D'une Gamme D'étalonnage Pour Le Dosage Du Glucose :

- On dispose d'une solution étalon de glucose de concentration Cet = 2g/l

- Dans 1 tube, on prépare une dilution au demi de l'étalon (100 tl étalon + 100 tl d'eau) dont la concentration est donc 1 g/l

- On prépare une galerie de 3 tubes E2, E1 et E0

	Contenu du tube	Concentration (g/l)
E2	50 ul Etalon pur	2,0
E1	50 ul Etalon dilué au 1/2	1,0
E0	50 ul Eau distillée	0,0

- On ajoute dans chaque tube 1 ml de réactif de glucose oxydase (qui contient l'ensemble des éléments nécessaires à la réaction ci-dessus).

- On mesure les DO de chaque tube grâce au photomètre réglé à la longueur d'onde de 505

nm.

- On obtient les DO suivantes :

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.

	Contenu du tube	Concentration (g/l)	DO
E2	50 ul Etalon pur	2,0	1,58
E1	50 ul Etalon dilué au 1/2	1,0	0,88
E0	50 ul Eau distillée	0,0	0,03

Sur du papier millimétré on reporte les valeurs des DO en fonction de la concentration et on obtient la droite d'étalonnage.



Figure 03 : Droite D'étalonnage

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III.3.1.Le Contrôle De Qualité Par Les Sérums De Contrôle :

Un sérum de contrôle est un échantillon de concentration connue, dont la nature est si possible proche de celle des échantillons (plasma ou sérum, urine). Il sert à vérifier que l'étalonnage est correct et garantit donc que les résultats obtenus avec les échantillons seront également fiables.

La concentration des sérums de contrôle est connue mais, à la différence avec l'étalon, elle n'a pas été mesurée avec une méthode de référence mais avec une ou plusieurs méthodes usuelles dont, si possible, celle que l'on utilise. Par conséquent, on n'indique pas «la» valeur exacte d'un sérum de contrôle mais une plage de valeurs acceptables.

Exemple :

On dispose d'un sérum de contrôle dont la valeur est comprise entre [0,9 - 1,1] g/l. On place 50 ul de ce contrôle dans un tube. On ajoute 1ml de réactif. On lit au photomètre et on obtient une DO de 0,84.

On reporte cette valeur de DO sur la droite d'étalonnage tracée précédemment (point rouge ci-dessous) et on obtient une valeur de concentration de 0,98 g/l



Figure 04 : Droite D'étalonnage Et Sérum De Contrôle.

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	Contenu du tube	Concentration (g/l)	DO
E2	50 ul Etalon pur+ 1 ml réactif	2,0	1,58
E1	50 ul Etalon dilué au 1/2+ 1 ml réactif	1,0	0,88
E0	50 ul Eau distillée+ 1 ml réactif	0,0	0,03
Ctrl	50 ul CQI + 1 ml réactif	0,98	0,84

0,98 est compris entre 0,9 et 1,1. La valeur trouvée du contrôle est dans la plage acceptable. Le contrôle est bon, la calibration est acceptée et on peut procéder au dosage du glucose dans les échantillons provenant des patients.

III.3.2.L'analyse De L'échantillon :

- Dans un tube, on mélange 50 ul de sérum d'un patient à 1ml de réactif. On mesure la DO que l'on reporte sur la droite d'étalonnage afin de déterminer la concentration.

- Par exemple, pour le plasma du patient P1, on observe une DO de 0,68 et pour le patient P2, on obtient une DO de 1,24.

- On reporte ces mesures sur la droite d'étalonnage (points verts) et on obtient les concentrations respectives de 0,78 g/l et 1,46 g/l



Figure 05 : Droite D'étalonnage Et Mesure Des Sérums Des Patients

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	Contenu du tube	Concentration (g/l)	DO
E2	50 ul Etalon pur+ 1 ml réactif	2,0	1,58
E1	50 ul Etalon dilué au 1/2+ 1 ml réactif	1,0	0,88
E0	50 ul Eau distillée+ 1 ml réactif	0,0	0,03
Ctrl	50 ul Ctrl + 1 ml réactif	0,98	0,84
P1	50 ul P1 + 1 ml réactif	0,68	0,78
P2	50 ul P2 + 1 ml réactif	1,24	1,46

III.4.La Variabilité De La Droite De L'étalonnage :

Dans le cas d'une méthode de dosage manuelle, il est en général nécessaire d'étalonner (de réaliser une gamme d'étalonnage) à chaque série et, quelques soient les précautions prises par l'opérateur, la droite d'étalonnage ne sera jamais exactement la même.

Cf. figure ci-dessous :

Un jour, ce sera la droite rouge, le lendemain la droite bleue, un autre jour, la droite verte, etc.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE III : L'ETALONNAGE]



Figure 06 : Variabilité De La Droite D'étalonnage - Etalonnages Acceptables

Plusieurs facteurs peuvent expliquer cette variabilité :

L'étalon :

- L'étalon peut « vieillir », s'il est utilisé et réutilisé pendant plusieurs jours.

- Parfois l'étalon doit être reconstitué par l'opérateur avec de l'eau distillée ou un autre solvant : dans ce cas, il est essentiel qu'il soit reconstitué de la façon la plus précise possible (pipettes de très bonne qualité, précises et justes) avec l'eau également de la meilleure qualité possible. Cette étape de reconstitution est toujours source de variabilité.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE III : L'ETALONNAGE]

Le Réactif :

- lui aussi est utilisé dans plusieurs séries, donc il « vieillit » ; il faut donc veiller à ce que les conditions de conservation des réactifs, comme des étalons, soient les meilleures possibles ;

- le réactif est parfois préparé par l'utilisateur (en mélangeant un réactif avec un tampon, par exemple) ; cela induit également une variabilité.

L'appareil De Mesure (Le Spectrophotomètre) :

- Les performances de l'appareil de mesure (spectrophotomètre ou photomètre) peuvent également varier : usure de la lampe, empoussièrement...

- Tous ces facteurs sont autant de variables qui vont influencer l'allure de la courbe d'étalonnage ainsi que chaque mesure.

- Au-delà de certaines limites, les droites d'étalonnage ne sont plus acceptables (droites en pointillé ci-dessous).



Figure 07 : Variabilité De La Droite D'étalonnage - Etalonnages Inacceptables

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE III : L'ETALONNAGE]

III.5.Autre Caractéristiques D'un Dosage Biochimique Photométrique :

III.5.1.Domaine De La Mesure :

Il est important de définir pour ce dosage le domaine de mesure, c'est-à-dire la limite de quantification, d'une part, et la limite de linéarité, d'autre part.

? Limite De Quantification :

La limite de quantification correspond à la valeur la plus basse en dessous de laquelle les résultats ne sont plus fiables, notamment car non répétables.

La détermination de cette limite fait appel à des mesures expérimentales dont nous ne donnerons pas le détail ici. Il faut simplement savoir que cette limite est indiquée dans la notice des kits commerciaux de réactif. Elle peut être égale à zéro ou, fréquemment, supérieure à zéro. En dessous de cette valeur (si elle est non nulle) on ne peut pas mesurer précisément une concentration. Le résultat sera alors rendu comme « inférieur à la limite de quantification ». Il n'y a pas de solution pour rendre un résultat s'il est inférieur à la limite de détection, à moins de changer de méthode de dosage (ou de la modifier). De plus, l'intérêt médical de rendre une valeur inférieure à la limite de quantification est généralement faible.

Exemple :

Le fournisseur du kit de glucose oxydase utilisé indique que la limite de quantification est égale à, 0,1 g/l. Si la valeur mesurée correspond à 0,07 g/l, le résultat rendu ne sera pas « =0,07 g/l » mais « <0,1 g/l ».

? Limite De Linéarité :

La limite de linéarité est la valeur de concentration au-delà de laquelle la relation entre la DO et la concentration n'est plus linéaire, c'est-à-dire que la loi de Beer-Lambert n'est plus respectée à cause d'une trop forte concentration de la molécule à doser.

En général, on fait en sorte que la droite d'étalonnage comporte un point proche de la limite de linéarité. La limite de linéarité est également indiquée par le fournisseur dans la notice des kits commerciaux de dosage. Sinon, on peut considérer que le point le plus élevé de la droite d'étalonnage correspond à la limite de linéarité.

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[PARTIE THEORIQUE] [CHAPITRE III : L'ETALONNAGE]

Si la concentration mesurée est supérieure à la limite de linéarité, on dilue l'échantillon de façon à ce que la concentration de la substance à doser soit comprise entre la limite de quantification et la limite de linéarité. En général, on peut diluer dans l'eau distillée ou le sérum physiologique (NaCl 9°/00) qui présente l'intérêt d'être plus proche du sérum que l'eau pure. La notice d'utilisation des kits commerciaux indique la nature du solvant à utiliser pour les dilutions si ce n'est pas de l'eau.

Exemple :

Le fournisseur du kit de glucose oxydase utilisé indique que la limite de linéarité est égale à 2,0 g/l. La valeur mesurée pour le sérum d'un patient correspond à 2,4 g/l, résultat qui ne pourra être rendu tel quel. On effectue une dilution au 1/2 (200 ul sérum + 200 ul eau) dans un tube et on effectue la réaction sur cette dilution. On obtient une concentration de 1,35 g/l. On multiplie ce résultat par 2 (facteur de dilution) et on obtient de concentration de 2,70 g/l.

Le résultat pour ce patient est 2,70 g/l.

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VOLET

PRATIQUE

[PARTIE PRATIQUE] [METHODOLOGIE DE L'ENQUETE]

PARTIE PRATIQUE

I. Méthodologie De L'enquête :

1.L'objectif De La Recherche :

Notre étude a pour objectif de connaitre les raisons qui empêchent les laborantins d'effectuer l'étalonnage devant toute nouvelle série de dosage des paramètres biochimiques.

2.Période De L'enquête :

- Du 30/03/2015 au 03/05/2015.

3.Lieu De L'enquête :

- Laboratoire de l'EPH Bouguerra Boularess - TEBESSA. - Laboratoire de l'EHS Khaldi Abdelaziz - TEBESSA.

4.L'outil De L'enquête :

- Notre enquête a été basée sur un questionnaire remis aux laborantins des Laboratoires l'EPH Bouguerra Boularess et EHS Khaldi Abdelaziz.

5.Population Cible :

- Les laborantins.

6.Echantillonnage : 30 laborantins :

- 15 laborantins du laboratoire de l'EPH Bouguerra Boularess. - 15 laborantins du laboratoire de l'EHS Khaldi Abdelaziz

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

II. Résultats Et Analyses :

II.1Présentation, Analyse Et Interprétation Des Résultats :

Question N°01 :

Quel est votre grade ?

Propositions	Nombre	Pourcentage
Laborantins De Santé Publique	16	53%
Biologistes de Santé Publique	14	47%
Total	30	100%

Tableau N°01 : Le Grade Du Personnel



47%

53%

Laborantins De Santé Public

Biologistes De Santé Public

Graphe N°01 : Le Grade Du Personnel

Interprétation :

Le résultat obtenu démontre que la majorité du personnel interrogé sont des laborantins de santé publique [53%], par contre [47%] sont des biologistes de santé public.

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Question N°02 :

Quels sont les étapes d'une analyse biochimique ?

Réponse	Nombre	Pourcentage
4 Etapes : Blanc, Etalon, Contrôle Normale Et Pathologique, Analyse D'échantillon.	07	23%
3 Etapes : Blanc, Etalon, Analyse D'échantillon.	23	77%
Total	30	100%

Tableau N°02 : Les Etapes D'une Analyse Biochimique.



23%

77%

03 Etapes

04 Etapes

Graphe N°02 : Les Etapes D'une Analyse Biochimique.

Interprétation :

? D'après les résultats, la majorité des laborantins [77%] effectuent la technique du dosage biochimique en trois étapes seulement, par contre [23%] en quatre étapes.

? Il apparait que la majorité des laborantins [77%] négligent le contrôle normal et pathologique

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Question N°03 :

Connaissez-vous le rôle principal du blanc réactif en biochimie ?

Propositions	Nombre	Pourcentage
Oui	24	80%
Non	06	20%
Total	30	100%

Tableau N°03 : Le Rôle Principal Du Blanc Réactif En Biochimie



20%

80%

Oui Non

Graphe N°03 : Le Rôle Principal Du Blanc Réactif En Biochimie

Interprétation :

Nous avons remarqué que [80%] des laborantins interrogés connaissent le rôle principal du blanc réactif en biochimie, par contre [20%] affirment le contraire.

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Question N°04 :

Respectez-vous les conditions de conservation des réactifs ?

Propositions	Nombre	Pourcentage
Oui	30	100%
Non	00	00%
Total	30	100%

Tableau N°04 : Les Conditions De Conservation Des Réactifs



100%

00%

Oui Non

Graphe N°04 : Les Conditions De Conservation Des Réactifs

Interprétation :

Nous avons remarqué que la totalité des laborantins interrogés respectent les conditions de conservation des réactifs. Donc nous pouvons dire que les réactifs ne posent pas de problèmes.

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Question N°05 :

Dans votre dosage, réaliser-vous le contrôle normal et pathologique ?

Propositions	Nombre	Pourcentage
Oui	00	00%
Non	30	100%
Total	30	100%

Tableau N°05 : Réalisation Du Contrôle Normal Et Pathologique



100%

0%

Oui Non

Graphe N°05 : Réalisation Du Contrôle Normal Et Pathologique

Interprétation :

? Nous avons remarqué à travers ces résultats que tous les laborantins ne font pas le contrôle normal et pathologique dans le dosage des paramètres biochimique.

? Donc les technique du dosage ne sont pas soumises au contrôle de qualité, du moment que 100% des laborantins n'utilisent pas les contrôle.

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Question N°06 :

Si les résultats du contrôle normal et pathologique est en hors de la référence, faut-il refaire le dosage ?

Aucun des laborantins n'a répondu à cette question, parce qu'ils ne l'utilisent pas.

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Question N°07 :

Connaissez-vous le principe de fonctionnement du spectrophotomètre ?

Propositions	Nombre	Pourcentage
Oui	21	65%
Non	09	35%
Total	30	100%

Tableau N°07 : Le Principe De Fonctionnement Du Spectrophotomètre



35%

65%

Oui Non

Graphe N°07 : Le Principe De Fonctionnement Du Spectrophotomètre

Interprétation :

Nous avons remarqué que la majorité des laborantins interrogés [65%] connaissent le principe de fonctionnement de spectrophotomètre par contre [35%] affirment le contraire.

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Question N°08 :

Faites-vous un rinçage de votre spectrophotomètre avec de l'eau distillée ?

Propositions	Nombre	Pourcentage
Oui	21	65%
Non	09	35%
Total	30	100%

Tableau N°08 : Le Rinçage Du Spectrophotomètre.



100%

00%

Oui Non

Graphe N°08 : Le Rinçage Du Spectrophotomètre.

Interprétation :

Les résultats obtenus montrent que le rinçage du spectrophotomètre est fait avec de l'eau distillée.

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Question N°09 :

Connaissez-vous comment réaliser une gamme d'étalonnage ?

Propositions	Nombre	Pourcentage
Oui	06	20%
Non	24	80%
Total	30	100%

Tableau N°09 : La Réalisation De La Gamme D'étalonnage.



80%

20%

Oui Non

Graphe N°09 : La Réalisation De La Gamme D'étalonnage.

Interprétation :

Nous avons constaté à travers ces résultats que la majorité des laborantins interrogés [80%] ne connaissent pas comment réaliser une gamme d'étalonnage, par contre [20%] affirment le contraire.

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Question N°10 :

Devant chaque nouvelle série faites-vous un étalonnage de votre appareil ?

Propositions	Nombre	Pourcentage
Oui	06	20%
Non	24	80%
Total	30	100%

Tableau N°10 : L'étalonnage A Chaque Nouvelle Série.



80%

20%

Oui Non

Graphe N°10 : L'étalonnage A Chaque Nouvelle Série.

Interprétation :

? Le diagramme montre que [80%] des laborantins interrogés ne font pas un étalonnage à

leurs appareils à chaque nouvelle série, contrairement aux [20%] qui affirment le contraire. ? Il parait que la majorité des laborantins [80%] négligent l'une des étapes de l'analyse

biochimique qui est l'étalonnage.

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Si non pour quoi ?

Les laborantins qui ne procèdent pas à l'étalonnage à chaque nouvelle série disent que l'étalon donne toujours les mêmes valeurs.

Ce qui signifie que ces laborantins ignorent les facteurs qui peuvent influer sur les valeurs d'étalonnage.

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[PARTIE PRATIQUE] [RESULTATS ET ANALYSES]

Question N°11 :

Connaissez-vous l'intérêt de l'étalon dans le dosage des paramètres biochimiques ?

Propositions	Nombre	Pourcentage
Oui	18	60%
Non	12	40%
Total	30	100%

Tableau N°11 : L'intérêt De L'étalon Dans Le Dosage Des Paramètres Biochimiques.



40%

60%

Oui Non

Graphe N°11 : L'intérêt De L'étalon Dans Le Dosage Des Paramètres Biochimiques.

Interprétation :

? Selon les résultats obtenus nous trouvons que la majorité des laborantins interrogés [60%] connaissent l'intérêt de l'étalon dans les différentes paramètres biochimiques, alors que [40%] ne le connaissent pas.

? Il parait que la moitié des laborantins interrogés n'accordent pas une importance à l'étalon, du moment que [40%] ignorent l'intérêt de l'étalon.

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[PARTIE PRATIQUE] [ANALYSE GLOBALE]

II.2 Analyse globale :

Notre enquête montre que le dosage biochimique est confronté aux nombreux problèmes vis-à-vis de l'utilisation de l'étalon.

Les résultats obtenus (question n°2, et n°4) montrent que la technique du dosage biochimique n'est pas correctement contrôlée, du moment que la totalité des laborantins (100%) n'utilisent pas le contrôle normal et pathologique pendant le dosage, ainsi que 40% des laborantins (question n°11) ne connaissent pas l'intérêt de l'étalon dans le dosage biochimique, En plus les réponses de la question n°10 montrent que la majorité des laborantins( 80%) ne procèdent pas à l'étalonnage à chaque nouvelle série de dosage, ce que signifie que les laborantins ne respectent pas la fiche technique et ignorent les facteurs qui influent sur l'étalon.

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[PARTIE PRATIQUE] [VERIFICATION DES HYPOTHESES]

II.3.Vérification Des Hypothèses :

D'après les résultats obtenu dans nos recherches, on peut conclure que la première hypothèse qui énonce : « Les laborantins ne respectent pas la fiche technique » est totalement confirmée et cela à d'après les questions n°2, 5, 6 ,10.

Aussi la deuxième hypothèse qui énonce : « les laborantins ignorent l'intérêt de l'étalon dans les paramètres biochimiques » est confirmée d'après les résultats des questions N° 5, 6, 10, 11.

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Donc pour obtenir l'objectif « la qualité des résultats » on doit respecter toutes les conditions nécessaires de la phase pré analytique et la phase analytique.

Conclusion :

Une analyse médicale de qualité commence toujours par un prélèvement correct de l'échantillon à examiner. Ce prélèvement doit être réalisé par un personnel qualifié, ayant reçu une formation adéquate ; capable de prendre en charge les patients avec gentillesse, calme et sérénité.

Dans la plupart des laboratoires, les moyens mis à disposition pour procéder aux divers prélèvements sont d'une haute sécurité et fiabilité. Ils garantissent une protection maximale contre les risques d'infection. Pour une meilleure exploitation du matériel mis à disposition, les échantillons doivent être traités avec le plus grand soin et transportés au laboratoire dans les meilleures conditions de conservation. La qualité est une exigence absolue de l'analyse médicale. Il est donc nécessaire que tous les laboratoires adhèrent à une démarche de qualité. Ceci implique la soumission de toutes les analyses à des contrôles de qualité, ainsi que ces laboratoires doivent réaliser les analyses médicales en respectant toutes les étapes analytiques notamment l'étalonnage, car sa réalisation a chaque série du dosage des paramètres biochimique est un facteur important dans l'obtention des résultats justes et fiables.

En effet, les résultats de notre enquête que nous avons obtenus, montrent que les dosages biochimiques sont confrontés à plusieurs problèmes à savoir le non-respect des étapes d'analyse, le non utilisation des contrôles de qualité, la négligence de l'étalonnage à nouvelle série du dosage.

Suggestions :

A partir des éléments recueillis et d'après les résultats que nous avons obtenus durant notre étude, nous suggérons aux laborantins de respecter les précautions suivantes :

1. Respecter les différentes étapes d'une analyse biochimique.

2. Faire un étalon à chaque nouvelle série pour garantir des résultats fiables et justes.

3. Utiliser le contrôle normal et pathologique pendant le dosage des Paramètres biochimiques.

4. Utiliser le matériel propre à usage unique (consommable) pour éviter la contamination des réactifs et les échantillons.

5. Respecter les conditions de préparation et la conservation des réactifs.

Bibliographie :

Livre :

? BEAUDEUX, J. L. (2006). Biochimie Médicale - Marqueurs Actuels Et Prospectives. Lavoisier.

? LAROUSSE. (2006). Larousse Médical. LAROUSSE.

? M.AUDIGIE, G. F. (2003). Principes Des Méthodes d'Analyse Biochimique . Doin. ? M.GAVRILOVIE, M. M.-G. (2006). Manipulation d'Analyse Biochimique . Doin.



Site Web :

www.wikipedia.fr

http://www.bioltrop.fr/



ANNEXES

Questionnaire Destinée Aux

Laborantins

Page | 1

Madame, Mademoiselle, Monsieur,

Dans le cadre de la réalisation de notre mémoire de fin d'études, le recueille de certaines données vous concernant est jugé utile. Pour ce faire, je vous prie de remplir le questionnaire ci-dessous.

En vous assurant l'anonymat, je vous remercie pour votre compréhension et collaboration.

Nom : Age :

Prénom : Paillasse Occupé :

Sexe : Nombre D'Année D'expérience :

Questionnaire :

Quel est votre grade ?

Biologiste De Santé

Publique

Laborantin(e) De Santé

Publique

Q-01

Q-02

Quels sont les étapes d'une analyse biochimique ?

Q-03

Page | 2

Connaissez-vous le rôle principal du blanc réactif en biochimie ?

Oui Non

Q-04

Respectez-vous les conditions de conservation des réactifs?

Oui Non

Q-05

Dans votre dosage, réaliser-vous le contrôle normal et

pathologique ?

Oui Non

Q-06

Si le résultat du contrôle normal et pathologique en dehors de la Référence, faut-il refaire le dosage ?

Oui Non

Q-07

Connaissez-vous le principe de fonctionnement de spectrophotomètre ?

Oui Non

Q-08

Page | 3

Faites-vous un rinçage de votre spectrophotomètre avec de l'eau

distillée ?

Oui Non

Q-09

Connaissez-vous comment réaliser une gamme d'étalonnage ?

Oui Non

Q-10

Devant chaque nouvelle série d'analyse, faites-vous un étalonnage

de votre appareil ?

Oui Non

Si non pourqoi ?

Q-11

Connaissez-vous l'intérêt de l'étalon dans le dosage des paramètres biochimiques ?

Oui Non

Page | 4

Signature

Les Abréviations :

PEPM : Professeur D'enseignement Paramédical.

UV : Ultraviolet.

DO : Densité Optique.

Cet : Concentration Etalon.

AS : Absorbance Solution.

CS : Concentration Solution.