ANNEXES
ANNEXE 2: Protocole de prélèvement
vaginal Conditions du prélèvement
Pas de toilette intime la veille du prélèvement.
Pas de coït au moins les 24 heures précédent
le prélèvement. Suspendre toute antibiothérapie 48 heures
au moins.
Culture
Les prélèvements sont identifiés et
traités sans délai. Un examen microscopique est
réalisé premièrement pour rechercher à
l'état frais Trichomonas vaginalis et après coloration
de Gram pour la recherche de Gardnerella vaginalis, de Mobiluncus
spp et surtout pour orienter le choix des milieux de culture. Toutefois
les milieux gélosés Bromo Crésol Pourpre (BCP), Eosine
Bleu de Méthylène (EMB), Gélose Chocolat (GC) et Sabouraud
chloramphénicol sont ensemencés pour rechercher respectivement
les staphylocoques, les Entérobactéries, Neisseria
gonorrhoeae et Candida spp.
Les milieux ainsi ensemencés sont incubés
à 37°C pendant 24 à 48 heures pour les milieux BCP, EMB,
Sabouraud Chloramphénicol et 37°C enrichie de CO2 pour la GC. Les
colonies caractéristiques sur milieu BCP (colonies jaunes dorées)
ont été soumises au test de catalase et de coagulase ; celles du
milieu EMB ont été ensemencées sur les géloses
Kligler, Citrate de Simmons, Mannitol Mobilité et Urée indole.
Une coloration de Gram a été effectuée sur les colonies
caractéristiques présentes sur la GC.
Pour la catalase, il s'agit d'un test d'orientation permettant
de différencier les Staphylocoques, qui produisent de la
catalase des Streptocoques qui n'en produisent pas.
Le test est basé sur la décomposition de l'eau
oxygénée (1T2O2) par les bactéries productrices de
catalase en eau (H2O) et en dioxygène (O2), se dégageant sous
forme de bulle d'air.
2 H2O2 2 H2O + O2
La technique consiste à déposer sur une lame
propre une à deux gouttes d'eau oxygénée (1T2O2) et
à l'aide de l'anse de Koch, prélever une portion de la colonie
suspecte et l'émulsionner dans
PREVALENCE DE LA CO-INFECTION A GARDNERELLA VAGINALIS ET
CANDIDA SPP CHEZ LES FEMMES CONSULTANTES HLD
cette eau. Lorsque la catalase est positive, il y a
dégagement de bulle d'air à la surface du mélange et donc
présence probable de staphylocoque.
Quant à la coagulase, il s'agit d'un test biochimique de
différenciation qui permet de distinguer les souches de
Staphylococcus aureus, productrices de la coagulase libre des
Staphylocoques à Coagulase Négative (SCN).
Le principe est basé sur la mise en évidence de la
coagulase libre dans le milieu de culture.
On mélange dans un tube à hémolyse 0,5ml de
plasma de lapin reconstitué selon la notice du
fabricant et 0,5ml du bouillon de 24h. Après
mélange, on incube à 37°C pendant 2 à 24h.
Lorsqu'il y a une prise en masse du mélange, la coagulase
est positive et donc, présence de Staphylococcus aureus. Mais
si le mélange est toujours liquide, la coagulase est négative et
donc présence de Staphylocoques à coagulase négative.
Annexe 3: Légende de l'organigramme de HLD
LEGENDE
DSADT : Département des Sciences d' Appui
au Diagnostic et au Traitement
CMR :Centre des maladies respiratoire
HDJ :Hopital du jour
Management général Réalisation / Technique
Appui Management de la qualité
REDIGE PAR ABDOUL WAHAB ISSA E
PREVALENCE DE LA CO-INFECTION A GARDNERELLA VAGINALIS ET
CANDIDA SPP CHEZ LES FEMMES CONSULTANTES HLD
Annexe 4: Anatomie et microbiologie de l'appareil génital
féminin
REDIGE PAR ABDOUL WAHAB ISSA F
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