C.3. Amélioration de la précocité et
de la sensibilité de la détection de la croissance
bactérienne :
· La centrifugation-lyse : le système
Isolator :
Ce système permet de recueillir 8 à 10 ml de
sang et de concentrer les micro-organismes avant d'ensemencer les milieux
gélosés adaptés à la croissance de ces
micro-organismes. La solution présente dans le tube contient de la
saponine pour lyser les leucocytes et les érythrocytes, du
polypropylène glycol pour éviter la formation de mousse due
à la saponine et du SPS comme anticoagulant.
Après centrifugation du tube dans un rotor à
angle fixe de 35° pendant 30 minutes à 3 000 tours/min, le
surnageant est éliminé et le concentré est
homogénéisé au vortex puis ensemencé sur
différents milieux gélosés appropriés. Isolator
(1,5) est le même système sans étape de centrifugation.
Pratiqué avec des tubes de 1,5 ml, il est utilisable en
pédiatrie.
Le système Isolator est très performant pour
l'isolement des micro-organismes suivants: mycobactéries, levures
à croissance difficile et champignons filamenteux, bactéries
exigeantes (Bartonella, Legionella).
Le système Isolator permet en outre de quantifier la
bactériémie, ce qui serait utile pour mettre en évidence
une infection sur cathéter. Ce système a cependant quelques
inconvénients. Le risque de contamination lors des manipulations oblige
à travailler sous hotte, mais surtout c'est une méthode manuelle
très consommatrice du temps du manipulateur, ce qui est un facteur
limitant.
· L'aération des flacons aérobies avec un
dispositif adapté favorise la croissance des Pseudomonas.
· L'agitation des flacons aérobies pendant les
premières 24 heures d'incubation accélère la croissance
bactérienne, mais elle est difficile à mettre en pratique si l'on
ne dispose pas d'un automate.
· Les systèmes diphasiques permettent la
croissance précoce de colonies sur le milieu gélosé. Ceci
est intéressant pour les espèces bactériennes à
croissance délicate.
C.4. Réaliser les
hémocultures :
Devant un tableau clinique évoquant une
septicémie, les hémocultures sont prélevées en
quelques heures. Mais les délais de réponses se situent entre 1
et 20 jours (environ 48 heures, si le prélèvement est fait au bon
moment).Ces délais sont beaucoup trop lents et en général
un traitement de premier intention est institué.
* Respect des précautions standard,
avec friction hydro alcoolique des mains.
* Trois hémoculture au moins, lors
des frissons ou à l'accès fébrile.
* Désinfection large et
prolongée de la peau, ponction d'une veine non perfusée.
* Prévenir le laboratoire en cas de
suspicion d'endocardite ou de brucellose.
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