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Validation de procédé de production d'antigène viral sur culture cellulaire bhk21

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par Ghaith BEN MESSAOUD
Institut supérieur des technologies médicales de Tunis - Licence appliquéee en biotechnologies médicales 2013
  

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III.3. Contrôle de stérilité du milieu de culture et des additifs

Le milieu de culture DMEM (0%, 2%, 5% et 10% SVF) et les autres additifs doivent subir un test de stérilité avant d'être utilisé en culture cellulaire.

1 ml de chaque lot (milieu DMEM et des additifs) est ajouté dans 5ml des milieux de contrôle de stérilité (Thioglycolate, Bouillon Trypto-caséine soja et gélose sabouraud) avec un témoin de chaque solution. La lecture des tubes pour la vérification de la contamination se fait pendant 14 jours à 37°C dans l'étuve.

Figure 17: Contrôle de stérilité du milieu de culture et additifs

? Bouillon Trypto- caséine soja

Le Bouillon Trypto-caséine soja (BIOKAR Lot/Batch 9M577) (annexe 2) permet de détecter et révéler une contamination par des germes aérobies.

La lecture pour le contrôle de stérilité se fait quotidiennement pendant 14 jours.

? Thioglycolate

Le bouillon Thioglycolate (Scharlau Ref.03-187) (annexe 2) est utilisé pour le contrôle et la détection d'une éventuelle contamination par les bactéries anaérobies.

La lecture pour le contrôle de stérilité se fait aussi quotidiennement pendant 14jours.

? Gélose Sabouraud

La Gélose Sabouraud a été préparée est fournie par le Laboratoire général de L'institut Pasteur de Tunis. C'est un milieu solide utilisé pour détecter une éventuelle contamination par les champignons (levures et moisissures).

ISTMT-IPT 2012-2013

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L'incubation de la gélose sabouraud se fait entre 20 à 25 °C. La lecture du test de stérilité se fait chaque jour pendant 14 jours.

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