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Mise au point d'une technique de dosage de l'activité de la catalase dans les tissus

( Télécharger le fichier original )
par Guy NYA NJOMEN
Université de Yaoundé I - Rapport de travaux de recherche 2006
  

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III-2 ADAPTATION DE LA METHODE.

Nous avons modifié les deux méthodes précédentes en nous basant sur les connaissances bibliographiques.

III-2-1 :Mesure de la DO à 240 nm

La réaction sera déclenchée en ajoutant H2O2 dans la cuve et non le surnageant comme dans les cas précédents. Le plus grand volume ajouté (300 uL au lieu de 50 uL) devrait favoriser un mélange rapide des réactifs dans la cuve de mesure et le déclenchement instantané de la réaction. Les cuves de mesure ayant une contenance de 1500 uL, le volume réactionnel plus grand (1250 uL au lieu de 950 uL) assurera un mailleur passage du faisceau de mesure dans la solution.

0

Solution

 

Blanc

Echantillon

MR (uL)

1200

900

Surnageant (uL)

50

50

H2O2(uL)

 

300

Résultats :

Mesure

K ( sec -1)

1

2,98 x 10

-3

3

2,57 x 10

-3

4

2,36 x 10

-3

5

3,24 x 10

-3

6

1,74 x 10

-3

7

2,92 x 10

-3

8

1,75 x 10

-3

9

1,81 x 10

-3

10

1,31 x 10

-3

11

2,69 x 10

-3

La moyenne est K = ( 2,64 #177; 0,2) x 10 -3 sec -1 , avec un coefficient de variabilité de 8,3%. Conclusion : Bonne reproductibilité de cette méthode

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"Enrichissons-nous de nos différences mutuelles "   Paul Valery