Memoire Online - Activités larvicides des extraits de plantes sur les larves de moustiques vecteurs de maladies parasitaires

Rosmarinus officinalis L. est une espèce de la famille des Lamiaceae, qui est utilisée comme aromatisant alimentaire, est aussi connue pour ses propriétés médicinales (Oluwatuyi et al., 2004, Peng et al., 2005).

Les constituants identifiés de la composition chimique de l'huile essentielle de Rosmarinus officinalis sont représentés dans le tableau 9 et constituent un pourcentage de 99.67%, dont la fraction monoterpénique est la majoritaire (94.89%). 51.93% de cette fraction sont des hydrocarbures, et 41.96 % sont des composés oxygénés. La fraction sesquiterpénique est la plus faible avec 4.78% et constituée seulement de composés hydrocarbonés. L'á-pinène est l'élément majoritaire avec une teneur de 35.91%, suivi du 1,8-cinéole avec 23.64%.

Tableau 9. Composition chimique de l'HE du Rosmarinus officinalis (chemotype à á-pinène).

Constituants	(%)
á-pinène	35.91
Camphène	5.73
Sabinène	4.64
3-octanone	0.73
â-myrcène	1.58
á-terpinène	0.86
1,8-cinéole	23.64
Cis - ocimène	0.44
ã-terpinène	1.37
Terpinolène	1.40
Linalool	1.67
Chrysanthenone	0.42
Camphre	5.01
Bornéol	2.69
á-terpineol	2.04
Verbénone	4.46
acétate de bornyle	2.30
Caryophyllene	3.51
â-humulène	1.27

- Thymus vulgaris

Thymus vulgaris, cultivé au Maroc, donne une huile essentielle à thymol dont le pourcentage dépasse les 40% (Tableau 10). La fraction monoterpénique prédomine avec (97.35%) dont 46.5% sous forme d'hydrocarbures et 50.85% sous forme de composés oxygénés. Les hydrocarbures sesquiterpéniques ne représentent qu'un faible pourcentage (1.7%). Les constituants de l'huile du thym ont été identifiés avec une totalité de 98.85%.

Composé	(%)
Methyl 2-methylbutanoate	0.18
á-thujène	1.76
á-pinène	0.85
camphène	0.40
Sabinène	0.33
2-hexen-1-ol 2-ethyl	0.41
â-pinène	1.63
á-phellandrène	0.28
á-terpinène	3.25
p-cymène	15.59
ã-terpinène	22.25
p-menth-2-en-1-ol	0.65
Terpinolène	0.16
Linalol	1.79
Camphre	0.24
Bornéol	0.65
4-terpinéol	1.15
Thymol methyl ether	1.18
2-isopropyl-4-methylanisole	0.88
Thymol	41.39
Carvacrol	2.06
Isothymol	0.27
Caryophyllène	1.30
Germacrène D	0.40

Nom du gîte	Espèce	Moyen de lutte	Date	Lieu
Grand canal	- Culex pipiens - Anophèles labranchiae (faible densité)	Lutte Biologique	01/04/2010	Ville de Fès
Wed Fès	-	Lutte Biologique	01/04/2010	Ville de Fès
Merjet ouzani	-	Lutte Biologique	01/04/2010	Ville de Fès
Diamant vert	-	Lutte Biologique	01/04/2010	Ville de Fès
Ain chkef	Culex pipiens	Lutte Biologique	01/04/2010	Ville de Fès

Nous avons choisi de travailler sur le Culex pipiens et l'Anophèles labranchiae.

Nous n'avons pas pu travailler sur des gîtes à caractère permanent du faite que l'ensemble de ces gîtes sont ensemencés par la Gambusia, poisson larvivore utilisé en abondance dans les gîtes de Fès pour lutter contre les larves de moustiques.

Nous nos sommes alors contenter de travailler sur des gîtes temporaire à culex.

ï Expérimentation 1: Détermination de l'effet larvicide de 6 extraits aqueux.

Tableau 12. Mortalité (%) des larves de Culex pipiens en fonction de la concentration des extraits aqueux (%) de 6 espèces végétales après 24 heures d'exposition

Espèce végétale	Doses testées %		Conditions de T° et H.R		%Mortalité après 24h
	Dose %	Concentration %	T °c	H.R %	%Mortalité Témoin	%Mortalité
*Artemisia absinthium L.*	10	5	30,4	25	0	0
		6				0
		7				0
		8				0
		9				0
*Mentha piperita L.*	10	5	30,4	25	0	3,7
		6				4
		7				0
		8				0
		9				11,54
*Mentha pulegium L.*	10	5	23,6	40	3,57	741
		6				0
		7				0
		8				6,66
		9				3,57
*Nerium oleander L.*	10	5	30,4	25	0	0
		6				0
		7				0
		8				10,71
		9				12,5
Rosmarinus officinalis L.	10	5	23,6	40	0	0
		6				0
		7				0
		8				5,55
		9				5,55
*Myrtus communis L.*	10	5	30,4	25	0	0
		6				0
		7				0
		8				0
		9				3,57

Tableau 13. Mortalité (%) des larves de Culex pipiens en fonction de la concentration des extraits aqueux (%) de 6 espèces végétales après 24 heures d'exposition.

Espèce végétale	Doses testées %		Conditions de T° et H.R		%Mortalité après 24h
	Dose %	Concentration %	T °c	H.R %	%Mortalité Témoin	%Mortalité
*Artemisia absinthium L.*	10	5	29,2	30	0	0
		6				6,89
		7				0
		8				0
		9				6,89
*Mentha piperita L.*	10	5	29,2	30	0	11,11
		6				6,66
		7				16
		8				12,5
		9				15,38
*Mentha pulegium L.*	10	5	29,2	30	0	0
		6				0
		7				0
		8				0
		9				8
*Nerium oleander L.*	10	5	29,2	30	0	0
		6				2
		7				26,92
		8				21,74
		9				44,44
Rosmarinus officinalis L.	10	5	29,2	30	0	8,33
		6				8,33
		7				16,66
		8				12
		9				28,57
*Myrtus communis L.*	10	5	29,2	30	0	0
		6				0
		7				0
		8				0
		9				0

Tableau 14. Moyenne de Mortalité (%) des larves de Culex pipiens de 2 répétitions en fonction de la concentration des extraits aqueux (%) de 6 espèces végétales après 24 heures d'exposition.

Espèce végétale	5%	6%	7%	8%	9%	Témoin
*Artemisia absinthium L.*	0	3,44	0	0	3,44	0
*Mentha piperita L.*	7,40	5,33	8	6,25	13,46	0
*Mentha pulegium L.*	3,70	0	0	3,33	5,78	1,78
*Nerium oleander L.*	0	1	13,46	16,22	28,47	0
Rosmarinus officinalis L.	4,16	4,16	8,33	8,77	17,06	0
*Myrtus communis L.*	0	0	0	0	1,78	0

Figure 21. Pourcentages de mortalité suivant les extraits aqueux des 6 espèces végétales testés.

Après avoir exposé des larves du stade 3 et 4 de l'espèce Cx. pipiens aux différentes concentrations des six extraits aqueux pendant 24 h, le taux de mortalité varie selon les concentrations (Tableau 12,13 et 14). Pour tous les extraits la mortalité des larves atteint des taux inferieur à 50%.

De l'ensemble de ces résultats un premier classement de l'efficacité toxique des extraits testés est mis en évidence (figure 21), ainsi les extraits les plus toxiques sont ceux des feuilles du Nerium oleander, du Rosmarinus officinalis et du Mentha piperita et le moins toxique celui des feuilles du Myrtus communis.

Les testes ont montrés que parmi les 6 extraits testés, aucun ne s'est révélé intéressant en terme de toxicité. Ces résultats, bien qu'ils soient préliminaires, illustrent bien l'intérêt que présentent les extraits aqueux des plantes dans la lutte anti-larvaire.

ï Expérimentation 2: Détermination de l'effet larvicide de 6 huiles essentielles.

Tableau 15. Mortalité (%) des larves de Culex pipiens en fonction de la concentration des huiles essentielles (%) de 6 espèces végétales après 24 heures d'exposition.

Espèce végétale	Doses testées %		Conditions de T° et H.R		%Mortalité après 24h
	Dose %	Concentration %	T °c	H.R %	%Mortalité Témoin	%Mortalité
Rosmarinus officinalis L.	2	0,4	21,9	42	7,14	100
		0,6				100
		0,8				100
		1				100
	0,1	0,05	24,1	41	9,52	3,29
		0,06				3,89
		0,07				11,58
		0,08				47,37
		0,09				47,14
	0,5	0,1	26,7	32	13,33	69,23
		0,2				96 ,14
		0,3				96,14
		0,4				100
		0,5				96,14
*Eucalyptus camaldulensis L.*	2	0,4	21,9	42	3,45	100
		0,6				100
		0,8				100
		1				100
	0,1	0,05	24,1	41	13,63	27,63
		0,06				62,7
		0,07				20,78
		0,08				93,89
		0,09				65,69
	0,5	0,1	31,5	28	4,16	8,33
		0,2				9,52
		0,3				3,84
		0,4				7,41
		0,5				20,83
*Salvia officinalis L.*	0,1	0,05	21,1	41	13,63	10,53
		0,06				14,41
		0,07				65,69
		0,08				73,27
		0,09				96,13
	0,5	0,1	31,5	28	4	8
		0,2				5
		0,3				81,82
		0,4				82,76
		0,5				96,43

Tableau 15. Mortalité (%) des larves de Culex pipiens en fonction de la concentration des huiles essentielles (%) de 6 espèces végétales après 24 heures d'exposition (suite).

Espèce végétale	Doses testées %		Conditions de T° et H.R		%Mortalité après 24h
	Dose %	Concentration %	T °c	H.R %	%Mortalité Témoin	%Mortalité
*Thymus vulgaris L.*	2	0,4	21,9	42	7,14	100
		0,6				100
		0,8				100
		1				100
	0,5	0,1	26,7	32	10	96,16
		0,2				92,33
		0,3				96,28
		0,4				100
		0,5				100
*Artemisia absinthium L.*	2	0,4	23,3	33	8,51	51,20
		0,6				77,73
		0,8				67,61
		1				81,47
	0,5	0,1	26,7	32	13,33	8,47
		0,2				38,45
		0,3				68,16
		0,4				76,92
		0,5				73,07
*Origanum majorana L.*	0,5	0,1	31,5	28	0	35,29
		0,2				56
		0,3				83,33
		0,4				96,43
		0,5				100

Figure 22. Effet larvicide des huiles essentielles (0,1%) de Rosmarinus officinalis, Eucalyptus camaldulensis et Salvia officinalis sur culex pipiens.

Figure 23. Effet larvicide des huiles essentielles (0 ,5 %) de Rosmarinus officinalis, Eucalyptus camaldulensis ,Salvia officinalis , Thymus vulgaris ,Artemisia absinthum et Origanum majorana sur culex pipiens .

Figure 24. Effet larvicide des huiles essentielles (2 %) de Rosmarinus officinalis, Eucalyptus camaldulensis,Thymus vulgaris et Artemisia absinthum sur culex pipiens .

Tableau 16. Mortalité (%) des larves d'Anopheles labranchiae en fonction de la concentration d'huile essentielle (%) d'Eucalyptus camaldulensis L. après 24 heures d'exposition.

Nous avons effectués un seul teste sur l'Anopheles labranchiae, vecteur du paludisme au Maroc, avec seulement deux concentration de l'huile essentielle d'Eucalyptus camaldulensis du fait de sa présence en très faible densité dans les gîtes étudiés.

Les résultats des tests d'activités larvicides réalisés sur les huiles essentielles (Figure 22, 23 et 24 et Tableau 15) indiquent une relation directe des pourcentages de mortalité des larves avec la concentration en huiles essentielles.

Les concentrations minimales nécessaires pour obtenir 100 % de mortalité des larves de Culex pipiens ont été évaluées à 0,4 % pour Thymus vulgaris, Rosmarinus officinalis et Eucalyptus camaldulensis et à 0,5 % Origanum majorana.

Les huiles essentielles que nous avons testées sont donc toutes larvicides, avec un effet concentration-dependant.

Tableau 17. Concentrations létales CL50 et CL95 (24 h) des huiles essentielles de 6 espèces végétales à l'égard des larves de Culex pipiens.

L'effet toxique des extraits analysés est clairement mis en évidence avec les valeurs des CL50 et des CL95 : les huiles essentielles de Salvia officinalis, Rosmarinus officinalis et Origanum majorana demeurent les plus efficaces, avec des valeurs respectives de 0,065 % et 0,49 %, 0,095 % et 0,195 %, 0,17 % et 0,37 %.

Ces résultats, se sont révélés intéressants en terme de toxicité, ils illustrent l'intérêt que présentent les huiles essentielles dans la lutte anti-larvaire.

ï Expérimentation 3: Comparaison entre l'action des extraits de plantes et celle des insecticides sur les larves de moustiques.

Tableau 18. Mortalité (%) des larves de culex pipiens en fonction de la concentration d'insecticides (mg/l) du Téméphos et Malathion après 24 heures d'exposition.

Insecticide	Doses testées (mg/l)		Conditions de T° et H.R		%Mortalité après 24h
	Dose (mg/l)	Concentration (mg/l)	T °c	H R %	%Mortalité Témoin	%Mortalité
Téméphos	1,25	0,00125	23,6	40	0	80,77
		0,0025				100
		0,005				100
		0,0125				100
	6,25	0,025				100
Malathion	1,25	0,00125	23,6	40	0	5
		0,0025				3,84
		0,005				3,70
		0,0125				36
	6,25	0,025				65,38

Figure 25. Effet larvicide du Téméphos et du Malathion sur les larves de culex pipiens après 24 heures d'exposition.

Les résultats obtenus (Tableau 18) montrent que les larves de Culex pipiens sont plus sensibles au Téméphos qu'au Malathion. À partir de la concentration 0,0025 mg/l en Téméphos nous avons obtenu 100 % de mortalité.

Tableau 19. Concentrations létales CL50 et CL95 (24 h) des insecticides à l'égard des larves de Culex pipiens.

L'effet toxique des deux insecticides testés est clairement mis en évidence avec les valeurs des CL50 et des CL95 : le Téméphos demeure le plus efficace avec une valeur de CL95 : 0,00219 mg/l et avec un taux de résistance de 0,82.

Tableau 20. Conditions de température et d'humidité Relative durant la réalisation des tests.

Jours	Dates	Température °c	*Humidité Relative %*
J1	06/05/10	23,3	33
J2	14/05/10	21,9	42
J3	18/05/10	23,6	40
J4	20/05/10	30,4	25
J5	24/05/10	24 ,4	54
J6	26/05/10	24,1	41
J7	31/05/10	26,7	32
J8	01/06/10	31,5	28
J8	03/06/10	29,2	30

Les valeurs représentées dans le tableau 20 et figure 26 montre les variations de température et d'humidité relative notés au cours des testes, ces deux paramètres peuvent avoir un effet sur les larves et par conséquence sur le taux de mortalité.

La température idéale pour la réalisation des tests doit être de 25 à 27°c et l'humidité relative doit être de 70 à 80 %.

Au début de nous testes nous avons travaille avec l'eau distillée à la place de l'eau du gîte, or les résultats des testes était invalides. Cela peut être expliqué par le fait que les larves on besoin l'eau dans laquelle elles trouvent leur nourriture c'est à dire riche en particule organique. L'eau distillée est une eau qui a subie une distillation et qui est théoriquement ainsi exempte des minéraux et organismes que l'on pourrait retrouver dans l'eau « naturelle ».

Parmi les testes effectues, les résultats obtenus par les huiles essentielles montrent que celle-ci possèdent un effet larvicide intéressant sur des larves au stade 3 et 4 et particulièrement les huiles essentielles de Salvia officinalis, Rosmarinus officinalis et Origanum majorana qui demeurent les plus efficaces, avec des valeurs de CL50 et CL95 respectives de 0,065 % et 0,49 %, 0,095 % et 0,195 %, 0,17 % et 0,37 %.

Les résultats obtenus par les extraits aqueux des poudres végétales, ont montré qu'aucun des 6 extraits testés ne s'est révélé intéressant en terme de toxicité, malgré cela ces résultats illustrent bien l'intérêt que présentent les extraits aqueux des poudres végétales dans la lutte anti-larvaire. L'extrait de Nerium oleander et celui de Rosmarinus officinalis présentent les taux de mortalités les plus importants par rapport au autres extraits avec des valeurs respectives de 28,47 % et 17,06 %.

Par ailleurs, la toxicité de l'extrait de Nerium oleander a été étudiée sur des larves au stade 4 de Culex pipiens dans les travaux de Aouinty et al. (2006) les essais ont démontré une activité insecticide avec une CL50 de 3130 mg/l.

Pour les insecticides le Téméphos reste le plus important en terme de toxicité avec une CL95 de 0,00219 mg/l.

Les conditions de température et d'humidité relative peuvent avoir un effet sur les résultats obtenus, ainsi que l'émergence des larves du stade 4 en nymphes.

L'ensemble de ces résultats montre que les insecticides utilisés dans la lutte antilarvaire se sont révélés très efficaces contre Culex pipiens par rapport aux extraits aqueux et aux huiles essentielles.

Néanmoins, les huiles essentielles en particuliers celles de Salvia officinalis, Rosmarinus officinalis et Origanum majorana, ont présentés une activité importante vis à vis des larves.

Nous ne pouvons pas conclure quant à l'action de l'huile essentielle de l'Eucalyptus camaldulensis sur l'Anophèle labranchiae du faite de la faible densité utilisé dans le test.

Activités larvicides des extraits de plantes sur les larves de moustiques vecteurs de maladies parasitaires

- Rosmarinus officinalis

- Thymus vulgaris