2-2-1- Phase pré-analytique
Il faut nettoyer la paillasse, réunir le matériel,
porter des gants et préparer les réactifs. Comme matériels
et réactifs utilisés, on peut citer :
- une centrifugeuse
- un semi-automate de coagulation
- un distributeur de billes + billes magnétiques - des
barrettes magnétiques
- une accuvette pour réactifs
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Importance de la qualité du
prélèvement sanguin en hémostase : Observations
faites au Centre National Hospitalier Universitaire Hubert Koutoukou MAGA de
Cotonou
- des cupules
- la thromboplastine calcique incubée à
37°C
Le plasma est obtenu après prélèvement
franc du sang sur citrate trisodique à 3,8% à raison d'un volume
de citrate pour 09 volumes de sang. On centrifuge à 3000 tours/minute
pendant 10 minutes.
2-2-2- Phase analytique Technique
Reconstituer la thromboplastine en diluer un flacon de
thromboplastine dans un flacon de solvant. Laisser dissoudre puis agiter par
retournements successifs pour obtenir une suspension homogène.
Introduire dans une cupule ou dans un tube à
hémolyse :
Plasma
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100 ul
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Incuber 02 minutes à 37°C
|
Agiter et incuber 03 minutes exactement à 37°C
|
Thromboplastine calcique préalablement Chauffé
à 37°C (15 minutes)
|
200 ul
|
Déclencher simultanément le chronomètre et
noter le temps de coagulation
|
|
Faire une double détermination par échantillon et
procéder de la même manière avec le plasma
témoin.
Résultat
La conversion du Temps de Quick en pourcentage (Taux de
Prothrombine) permet d'apprécier l'activité prothrombinique du
plasma à tester comparativement à un plasma témoin servant
de référence (100%).
Cette conversion se fait à l'aide d'un tableau qui est
livré avec chaque lot de réactifs. Les valeurs normales sont
comprises entre 70% et 100%. Une attention particulière doit être
accordée aux prélèvements de sujets traités par les
antivitamines K.
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Importance de la qualité du
prélèvement sanguin en hémostase : Observations
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2-2-3- Phase post-analytique
Il s'agit de ranger les réactifs ; de
décontaminer le matériel utilisé et le ranger ; de retirer
les gants et les mettre dans la poubelle adéquate ; d'enregistrer les
résultats et faire la transmission en tenant compte de la
confidentialité des résultats.
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