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Utilisation comparée de la gélose chocolat à base d'hémoglobine en granulées et de la gélose chocolat à base de sang de mouton défibriné pour la culture de trois espèces bactériennes méningées

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par Antoine A. & Fêmi Jacques H. DANSOU & SETONDJI
Université d'Abomey- Calavi au Bénin - Licence professionnelle en analyses biomédicales 2008
  

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IV- LES MILIEUX DE CULTURES

IV-1-DEFINITION

Les milieux de culture sont des supports nutritifs stériles qui permettent aux microorganismes placés à leur contact d'y trouver les

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Présenté et soutenu par Antoine A. DANSOU et Jacques Fêmi SETONDJI

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divers éléments nécessaires à leur croissance : source de carbone, source d'azote, aliment énergétique, oligo-éléments.

IV-2-MODE GENERAL DE PREPARATION [6]

Pour se procurer les milieux de culture qui lui sont nécessaires le bactériologiste a le choix entre diverses possibilités, choix tenant compte :

-de l'équipement du laboratoire en personnel et en matériel,

-du rythme d'utilisation,

-du prix de revient,

-de la nature du milieu,

-des possibilités d'approvisionnement.

Sont actuellement commercialisés :

· Des milieux « prêts à l'emploi », conditionnés en boite de Pétri (milieu précoulé) ou en tube ; pour les laboratoires de petite ou moyenne importance cette solution permet une organisation simple et rationnelle du travail avec une bonne garantie de qualité.

· Des milieux « prêts à l'emploi », non conditionnés sous leur forme définitive, mais en flacon de 30mL à 1L ; le coût est moins élevé que précédemment, les délais de conservation de milieux plus longs, mais il faut prévoir un service de préparation plus important et surtout des possibilités de stockage.

· Des milieux déshydratés qui réunissent un grand nombre d'avantages : leurs constituants apparaissent assez constants d'un lot à l'autre, en raison de la fabrication à grande échelle ; la conservation est

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aisé sous un encombrement restreint ; la préparation simplifiée peut être confiée à un personnel moins spécialisé. Un large choix des milieux est proposé, permettant ainsi une excellente adaptation des méthodes bactériologiques aux buts envisagés.

IV-3- QALITE DU MILIEU DE CULTURE [6]

Certaines qualités sont indispensables à un milieu pour favoriser le développement bactérien ; elles concernent :

-La composition : Les éléments de cultures doivent contenir quantitativement et qualitativement les aliments exigés pour la croissance et l'entretien des microorganismes et assimilable par eux :

> Aliments essentiels azotés et carbonés

> Eléments minéraux

> Facteurs de croissance (métabolites essentiels que la bactérie est incapable de synthétiser)

> Facteurs stimulants ou facteurs de départ dont la présence accélère le rythme de la multiplication bactérienne

-Le pH : En général les bactéries ne se développent qu'à un pH voisin de la neutralité (7 à 7,6). Certaines espèces non pathogènes pour l'homme oxydent le thiosulfate et la soude en acide sulfurique et se développent à un pH voisin de O. A l'opposé il y a des bactéries qui hydrolysent l'urée et qui sont productrice d'ammoniaque et qui tolèrent des pH très alcalin.

Certaines espèces pathogènes tels que les pseudomonas et les vibrions se développent en milieu alcalin à l'opposé nous avons les lactobacilles qui sont les bactéries de la flore de doderlin qui se multiplie au pH 6,3 à 6,5.

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-L'isotonie : Elle comprend pour la plupart des milieux à celle d'une solution de NaCl à 9%o.

-Le potentiel redox : En ce qui concerne le potentiel d'oxydo-réduction, les bactéries ont des exigences strictes, en rapport avec le type respiratoire.

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"L'ignorant affirme, le savant doute, le sage réfléchit"   Aristote