II. Méthodes
II.1. Méthodes d'extraction
Avant toute extraction, le séchage des feuilles du
matériel végétale est effectué dans l'étuve
durant 72h à 40C° dans le bute de compléter le
séchage.
II.1.1. Extraction de l'huile essentielle de Juniperus
phoenicea
L'HE est extraite par hydrodistillation en utilisant un appareil
de type Clevenger: l'extraction a duré 3h30' en plaçant 200 g de
feuilles sèches dans un ballon avec de l'eau distillée, puis
chauffer, les vapeurs sont condensées dans un réfrigérant
et les huiles se séparent de l'eau par différence de
densité.
L'huile essentielle obtenue est mise dans un flacon à
l'abri de la lumière et stockée à 4C° jusqu'aux tests
antimicrobiens.
Calcul du rendement : le calcul du rendement est définit
comme étant le rapport entre la masse de l'huile essentielle obtenue et
la masse de matière végétale à traiter
(Belyagoubi ,2006) :
R HE = MHE/ MS . 100
R : Rendement en extrait fixe en g/100g
MHE : Quantité d'extrait
récupéré en g
Ms : Quantité de matière
végétale utilisée pour l'extraction exprimée en
g.
II.1.2. Extraction des composés
phénoliques
a. Broyage et tamisage
Avant l'extraction des composés phénoliques, les
feuilles séchées sont passées dans un broyeur
mécanique de laboratoire, et tamiser la poudre dans un tamiseur à
mains (cents= 250um). Puis garder à l'abri de
lumière le temps d'extraction.
b. Protocol d'extraction
Le Protocol d'extraction des composés phénoliques
par macération dans le méthanol est schématisé dans
la figure 6.
1g de poudre de feuilles
Macération dans 50ml de
méthanol
(60mn)
Extrait methanolique
Centrifugation à 500tpm/
10mn
|
|
|
|
|
|
Culot
|
|
Surnagent
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Filtration sous vide à ( 0,22
um)
|
|
Extrait sec
|
|
Séchage à
40C°
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Reconstitution;
1- Méthanol: eau (80
:20)
2- dans le DMSO
|
|
|
|
Extrait phénolique
|
|
|
|
Figure N°6: Protocol d'extraction des
composés phénoliques : (Hayouni et al,
2007)
| 
