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Contribution à  l'étude de l'activité antimicrobienne du genévrier(Juniperus phoenicea ): essai des huiles essentielles et composés phénoliques

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par Fouzia Djenadi
Université A Mira de Béjaia Algérie - Master en biologie option biochimie appliquée 2011
  

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Glossaire

Glossaire

Agar : polymère de l'agarose qui rentre dans la composition des milieux de culture solide en microbiologie. Appelé aussi gélose

Antifongique : se dit d'un médicament qui agit contre les infections provoqués par les champignons ou les levures parasites

Anti-inflammatoire : se dit d'un agent, d'un médicament qui fait dégonfler et diminuer l'irritation. La plus part des anti-inflammatoire sont aussi des antidouleurs.

Antioxydant : un antioxydant est une molécule qui diminue ou empêche l'oxydation d'autres substances chimiques

Antiseptique : se dit d'un agent, d'un médicament propre à prévenir les infections.

Arthrite : (du grec arthron : articulation) est une inflammation aiguë ou chronique des articulations dont l'origine est rhumatismale ou infectieuse. Elle ne désigne pas la pathologie répertoriée sous le nom d'arthrose, mais un signe clinique d'une des nombreuses maladies articulaires.

Cytotoxique : se dit d'un agent ou d'un produit qui a un effet nocif sur les cellules.

Insecticide : substance active ou une préparation ayant la propriété de tuer les insectes, leurs larves et/ou leurs Sufs.

Larvicide : substance active ou une préparation ayant la propriété de tuer les larves.

Monoterpéne : sont une classe de terpènes constitués de deux molécules d'isoprène C5H8 et ont pour formule de base (C5H8)2. Ils peuvent être linéaire ou contenir des cycles.

Sesquiterpène : sont une classe de terpène formée de 3 unités isoprènes et a comme formule moléculaire C15H24. Sont présents dans les essences végétales aromatiques ou huiles essentielles,

Annexes

Annexe 1 :

Différentes classes des composés phénoliques.

Tableau N°I : les différentes classes des composés phénoliques (Balasundram et al, 2006)

Classe

Structure

1- Phénols simple, benzoquinone

C6

2- Acide hydrox benzoïque

C6-C1

3- Acethophenones,acides phenyllacetique

C6-

4- Acides hudroxycinnamiques, phenylpropanoides (coumarine, isocoumarin, chromones, chroméne)

C6-C3

5- Naphtoquinone

C6-C4

6- Xanthone

C6-C1-C6

7- Anthraquinones

C6--C6

8- Flavonoïdes, isoflavonoides

C6-C3-C6

9- Lignanes, neolignanes

10- biflavonoides

(C6-C3)2

11- Lignine

(C6-C3-C6)2

12- Tannins condensés

(C6-C3)n

 
 

(C6-C3-C6)n

Annexe 2

Solubilité du soufre et du phosphore dans les huiles essentielles :

Comme les huiles fixes, les huiles essentielles sont des solvants de l'Iode, mais à la différence des huiles fixes, elles dissolvent le Soufre et le Phosphore en plus de l'iode (Tableau II). Ce caractère souligne l'importance que peuvent avoir les huiles essentielles en désinfection préventive : le fait de dissoudre le soufre et le phosphore leur permet de participer aux réactions biochimiques majeures tant au niveau des membranes que lors de certaines réactions intracellulaires

Tableau N° II: Solubilité de l'iode du soufre et de phosphore dans les huiles essentielles (Roquebert 2002).

Solvant

iode

soufre

phosphore

Huiles essentielles

+

+

+

Huiles fixes

+

0

0

Annexe 3

Chromatogramme de Juniperus phoenicea

Figure N°1 : Chromatogramme de Juniperus phoenicea

Annexe 4

Activité antimicrobienne des extraits de feuilles de J.phoenicea :

Tableau N° III : Résultat de l'activité antibactérienne de l'HE DE J.phoenicea sur milieu solide

Zone d'inhibition (D)
souches

Zone d'inhibition
(D1) en mm

Zone d'inhibition
(D2) en mm

Zone
d'inhibition (D3)
en mm

Zone
d'inhibition
des trois
tests.

Esherichia coli ATCC 25 928

12 mm

10 mm

06 mm

9,33mm

Pseudomonas aérugenosa ATCC 27853

-

-

-

-

Staphylococcus auréus ATCC 4330D

21 mm

18 mm

11 mm

16,66mm

Bacillus sp

17 mm

15 mm

15 mm

15,66 mm

Tableau N° IV : Résultats de l'activité antibacterienne en fonction du taux de dilution

Dilutions
Souches

1/2

1/4

1/8

1/16

Esherichia coli ATCC 25 928

00

00

00

00

Pseudomonas aérugenosa ATCC 27853

NT

NT

NT

NT

Staphylococcus auréus ATCC 4330D

19

11

7

00

Bacillus sp

10

7

7

00

Tableau N° V : Résultats de l'activité antifongique des extraits de J.phoenicea :

Souche

Méthode

Extraits

Aspergillus flavus NRRL

HE

CPM

CPD

D après 24heures

D après 48heure

Méthode des disques

14mm

17mm

20 mm

14 mm

NT

NT

Méthode des puits

12mm

10 mm

8 mm

00 mm

-

-

Microatmosphére

00 mm

00 mm

00 mm

00 mm

NT

NT

- Pas d'activité. NT : Non testé.

Structure et morphologie bactérienne

Structure de la paroi des bactéries à Gram positif

Annexe 5

Structure de la paroi des bactéries à Gram négatif

Annexe 6

Tableau N°VI : Solvants et réactifs utilisés

Réactifs

Produit

Fabriquant

Méthanol

PROLABO de France

NaCl

NM

NaOH (2N) et HCl (2N)

NM

H2O2

NM

Violet de Gentiane - Lugol- Alcool et Fuchsine

NM

Milieux utilisés

Milieu Chapman

Institut Pasteur d'Algérie

Milieu Hektoen

Institut Pasteur d'Algérie

Gélose Nutritive (GN) Gélose PCA

Institut Pasteur d'Algérie

Gélose Mueller- Hinton Bouillon Nutritif

Institut Pasteur d'Algérie

Gélose Sabouraud

Institut Pasteur d'Algérie

NM : non mentionné

Annexe 7

La composition des réactifs et des différents milieux de cultures utilisés (Guiraud et Galsy, 1979 ; Odré et a l, 1982)

Gélose nutritives

Bouillon nutritif

Macération de viande & & & &1 litre (ou eau distillée +extrait de viande) Peptone trypsique& & & & & &15 g NaCl ou KCl& & & & & & & &5 g Agar &&&15 à 20 g

pH =7,2

Macération de viande & & & &1 litre (ou eau distillée +extrait de viande Peptone trypsique& & & & & &15 g NaCl ou KCl& & & & & & & &5 g

pH =7,2

Mueller-Hinton (g/Litre d'eau distillée)

Chapman (G/litre d'eau distillée)

Infusion de viande de bSuf &&&&.300g

Hydrolysat de caséine&&&&&&&17,5

Amidon&&&&&&&&&&&&&1,5

Gélose&&&&&&&&&&&&&...17

pH= 7,4

Peptone&&&&&&&&&&&&...11 Extrait de viande &&&&&&&&...01 Chlorure de sodium&&&&&&&...75 Mannitol&&&&&&&&&&&&.15

Agar&&&&&&&&&&&&&&15

Rouge de phénol&&&&&&&&0,025

pH =7,8

Eau physiologique

Gélose Sabouraud

Eau distillée&&&&&&&&&&..1litre Chlorure de sodium&&&&&&&&.9g

pH= 7

Peptone&&&&&&&&&&&&&..10g

Glucose&&&&&&&&&&&&&..20g

Agar&&&&&&&&&&&&&&...15g Eau distillée 100ml Vitamine et facteurs de croissance

pH =6

Hektoen (g/Litre d'eau distillée)

PCA Formule en g/litre d'eau distillée.

Proteose peptone &&&&&. 12

Peptone de caséine&&&&&&&&&5

Extrait de levure&&&&&&&&&&03

Extrait de levure&&&&&&&&&.2,5

Chlorure de sodium&&&&&&&&...05

Glucose&&&&&&&&&&&&&.1

Thiosulfate de sodium&&&&&&&...05

Agar&&&&&&&&&&&&&&.18

Sels biliaire&&&&&&&&&&&&09

pH=7

Citrate de fermmoniacol&&&&&...&1,5

 

Salicine&&&&&&&&&&&&&..02

 

Lactose&&&&&&&&&&&&&..12

 

Saccharose&&&&&&&&&&&&.12

 

Fushine acide&&&&&&&&&&&0,1

 

Bleu de bromothymol&&&&&&&0,065

 

Agar&&&&&&&&&&&&&&...14

 

pH =7,5

 

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"Enrichissons-nous de nos différences mutuelles "   Paul Valery