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Bioconversion enzymatique des composés phénoliques des effluents issus de l'extraction d'huile d'olive: une voie prometteuse de valorisation par la production de l'hydroxytyrosol naturel

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par Manel HAMZA KARRAY
Université de Sfax école nationale d'ingénieurs de Sfax - Doctorat en biologie 2013
  

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I-5-1 Milieu liquide à base de son de blé pour la production de f3-glucosidase à

partir d'une fermentation en erlenmeyer 58

I-5-2 Milieu liquide à base de son de blé pour la préculture d'A. niger 58

I-5-3 Milieu liquide à base de son de blé pour la fermentation d'A. niger pour la

production de f3-glucosidase 59

I-5-4 Milieu solide ME pour le repiquage et la conservation des champignons 59

I-6 Conditions opératoires de la préculture d'A. niger 59

I-7 Conditions opératoires de la culture d'A. niger 59

I-8 Chromatographie liquide à haute performance (CLHP) 59

I-9 Chromatographie liquide à haute performance couplée à la spectrométrie de

masse (CLHP-SM) 60

I-10 Chromatographie phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (CPG-

SM) 60

II- Méthodes 61

II-1 Techniques de culture de champignons 61

II-1-1 Extraction des spores et culture de la souche Aspergillus niger 61

II-1-2 Culture de la souche Trichoderma atroviride et de la souche Trametes

trogii 61

II-2 Techniques de récupération des enzymes et dosage de leurs activités 61

II-2-1 Préparation des enzymes 61

II-2-2 Dosage des activités enzymatiques 61

II-3 Bioconversion de la margine 64

II-3-1 Méthode de la biotransformation 64

II-3-2 Détermination du pH et de température optimaux 64

II-3-3 Effet du volume de margine 64

II-3-4 Effet de la quantité de l'enzyme 64

II-3-S Effet de l'agitation 64

II-3-6 Cinétique de la bioconversion 64

II-3-7 Bioconversion à grande échelle 65

II-4 Techniques séparatives membranaires 65

II-4-1 Procédés de séparation 65

II-4-2 Mesure de séparation par performance membranaire 66

II-5 Concentration par évaporation 66

II-6 Extraction des composés phénoliques à partir des margines 66

II-7 Analyse par Chromatographie liquide à haute performance : CLHP 67

II.7.1. Analyse des monomères phénoliques 67

II-8 Détermination de l'activité antiradicalaire 67

II-8-1 Principe de la méthode 67

II-8-2 Mode opératoire 68

II-9 Analyse des protéines 68

II-9-1 Principe de la méthode 68

II-9-2 Mode opératoire 68

II-10 Détermination de la concentration des sucres réducteurs 68

II-11 Détermination de la concentration des ortho-diphénols totaux 69

II-12 Analyse par GC-MS 69

II-13 Détermination de la matière sèche (MS) 69

II-14 Dosage de glucose (méthode enzymatique GOD-PAP) 69

II-15 Estimation de la concentration en polyphénols des margines 70

II-16 Immobilisation en Alginate de â-glucosidase 70

III. Caractérisation des margines brutes 71

Résultats et Discussion 74

I-Introduction 75

Chapitre I : 77

Optimisation de la production de â-glucosidase par le champignon : Aspergillus

niger. 77

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