Mesure de l'efficacité d'extraits d'algues sur la vigne (Vitis vinifera L.), en conditions contrôlées et au vignoble, validée par la mesure de l'activité photosynthétique et les analyses chimiques

3.3.4. Dosage des éléments minéraux dans les feuilles

Préalablement aux analyses minérales, les échantillons de végétaux ont été séchés à 60°C jusqu'à poids constant et ensuite broyés au moyen d'un broyeur planétaire de manière à obtenir une mouture très fine. Le mode opératoire complet des différentes manipulations nécessaires au dosage des éléments est disponible en annexe (annexe 4, page A5) .

3.3.4.1. Dosage de l'azote

Le dosage de l'azote contenu dans les feuilles a été fait au moyen de la méthode de Kjeldahl. Il s'agit d'une méthode universelle s'appliquant à bon nombre de matières (sol, eau, plantes, tissus animaux).

P Principe

Cette méthode consiste à transformer l'azote organique en azote ammoniacal par minéralisation avec de l'acide sulfurique et un catalyseur ; l'azote se trouvant sous forme nitrique reste inchangé. Après minéralisation, la solution est rendue alcaline par addition de soude permettant une libération de NH₃ volatil. L'ammoniaque peut ensuite être dosé par méthode titrimétrique après distillation (Pauwels et al., 1992). L'azote minéral peut, quant à lui, être dosé sans passer par l'étape de minéralisation.

P Appareillage

Nous avons utilisé le Kjeldahltherm (minéralisation) et le Vapodest 30 (distillation) de la société Gerhardt (figure 22).

Figure 22 : photographies du matériel utilisé pour le dosage de l'azote
a) Minéralisation sous hotte	b) Distillation

3.3.4.2. Dosage des autres éléments majeurs (P, K, Ca, Mg)

Afin de doser ces éléments minéraux avec les moyens classiques d'analyse (spectrophotométrie, colorimétrie) il nous a fallu les solubiliser. La méthode utilisée dans ce but consiste en une destruction des composés organiques par calcination (3h à 500°C) suivie d'une solubilisation des éléments par une attaque avec un acide minéral fort, en l'occurrence HNO₃ ( Pauwels et al., 1992).

P Phosphore

Le dosage du phosphore a été obtenu par méthode de colorimétrie. Le principe est d'ajouter au phosphore présent dans l'extrait, sous forme d'ortho-phosphate, des ions vanadate et molybdate formant un complexe phospho-vanado-molybdate de couleur jaune. Ce complexe coloré est ensuite mesurable par colorimétrie à 430 nm ( Pauwels et al., 1992).

P K, Ca, Mg

Nous avons dosé les K, Ca et Mg obtenus dans l'extrait minéralisé au moyen d'un spectrophotomètre d'absorption atomique (figure 23).

Figure 23 : photographie du spectrophotomètre utilisé pour le dosage de K, Ca et Mg