1-1-4-1- Prélèvements et transports
Les prélèvements pour l'analyse
bactériologique ont été faits dans des flacons en verre de
500 ml qui sont lavés et rincés avec de l'eau distillée.
Après séchage, l'ouverture des flacons est bouchée avec du
coton cardé et emballée dans du papier craft en aluminium. Ils
sont ensuite stérilisés à l'autoclave. Les bouchons sont
aussi
lavés, rincés de la même manière,
séchés, emballés dans du papier craft en aluminium et
stérilisés dans les mêmes conditions que les flacons.
Le prélèvement dans les puits a
été réalisé à l'aide des flacons
stérilisés, au bout desquels est fixée une ficelle
permettant de faire descendre le flacon dans le puits. L'eau est
prélevée à environ 50 cm de la surface libre. La figure
n° 1 illustre la technique de prélèvement.
Pour le prélèvement au robinet et à la
pompe, on a laissé couler l'eau du robinet ou de la pompe pendant
environ deux (02) minutes. Ensuite on a procédé à un
prélèvement aseptique dans les flacons stériles ouverts au
dernier moment et rebouchés aussitôt après le remplissage.
Le flacon est tenu par la main, et à une certaine distance (environ 30
cm) du robinet ou de la pompe.
Une fois le prélèvement fait, les flacons sont
numérotés et rangés dans une glacière pour
être immédiatement acheminés au laboratoire pour des
analyses.
Quant aux analyses physico-chimiques, les
prélèvements ont été faits dans des bouteilles en
plastiques des eaux minérales (de capacité 1,5 L). Chaque
bouteille est rincée 3 fois par l'eau qu'elle doit contenir. Les
échantillons ont été aussitôt acheminés au
Laboratoire.
Figure 1 : Technique de
prélèvement
1-1-4-2- Analyses bactériologiques
Les analyses bactériologiques de l'eau ont pour but de
mettre en évidence la présence ou non des bactéries qui
modifient l'aptitude d'une eau à une utilisation donnée.
L'existence de bactéries ne saurait être tolérée,
car elle présente de risques pour la santé de l'homme.
Au cours de cette étude, nous avons estimé
indispensable d'apprécier la pollution en recherchant la présence
de certains micro-organismes de l'eau au laboratoire de la SONEB. Nos analyses
n'ont concerné que quelques paramètres bactériologiques
qui sont contenus dans l'eau tels que :
· Les coliformes totaux ;
· Les Escherichia coli ;
· Les salmonella et les Shigella ;
· Les streptocoques.
Les milieux de culture utilisés afin d'identifier ces
germes sont : le bouillon de Mac Con Key, le milieu Gélose nutritive,
Gélose d'ENDO, Gélose EMB et le milieu Slanetz et Bartelet.
* Le bouillon de Mac Con Key et le milieu Gélose
nutritive
Les coliformes fécaux sont des germes de contamination
fécale ; les germes banals constituent les levures et les moisissures de
même que les champignons.
Le bouillon de Mac Con Key sert de test de présomption
pour la recherche de coliformes dans l'eau. La présence de coliformes
est mise en évidence par la formation de gaz et par le virage au jaune
de l'indicateur, dû à l'acidification du milieu. Les germes banals
sont recherchés sur le milieu Gélose nutritive
pré-coulé dans les boîtes de pétri.
Le dénombrement des germes banals se fait 24 h et 48 h
après incubation.
* Gélose d'ENDO
La gélose d'ENDO est un milieu solide utilisé
pour l'isolement des coliformes et des autres entérobactéries.
Après 24 h d'incubation à 48°C, les colonies des coliformes
comprenant celles des Salmonella et des Shigella apparaissent
incolores sur le milieu.
*Gélose EMB
La gélose EMB est préparée pour
l'isolement des Echerichia coli. Sur ce même milieu, on peut
observer les Salmonella et les Schigella de même que
les coliformes fécaux.
Après 48 heures d'incubation à 44°C, les
colonies des Salmonella et Shigella apparaissent incolores ou
légèrement teintées et transparentes tandis que celles
d'Echerichia coli sont bleu foncé et présentent un
reflet métallique lorsqu'on les examine en lumière
réfléchie. Les autres colonies formant des muqueuses convexes et
brunâtres sont des coliformes fécaux.
*Milieu Slanetz et Bartelet
Les streptocoques s'identifient dans le milieu Slanetz et
Bartelet à des colonies rouges, violettes ou roses visibles sur la
boîte maintenue à l'incubation pendant 48 heures à
37°C.
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