III.3.3.3. Ensemencement
L'ensemencement s'est fait dans une plaque de marque Griner
Microtier à 96 puits à fond plat. Les différentes
solutions des extraits reparties dans ces puits sont ensemencés en
mélangeant 1ml de sang d'un paludéen à 9ml du milieu de
culture. Les plaques sont ensuite placées à l'étuve
à une température de 37°C dans une atmosphère
dépourvue d'oxygène (atmosphère à CO2) pendant
48heures.
III.3.3.4.Mode opératoire
42
À l'aide d'une micropipette Eppendorf, on dépose
dans chaque puits 50 ì l de
l'extrait à différentes concentrations qui sont
au préalable gardés à 37°C et 50ì l du milieu
de culture renferment Plasmodium falciparum. Les manipulations
s'effectuent sous la hotte à flux laminaire horizontal pour de raison
d'asepsie. Les plaques recouvertes du papier paraffine sont placées dans
une cloche à bougie vidée d'oxygène par combustion. Le
tout est maintenu à l'étuve à 37°C pendant
24heures.
III.3.3.5. Lecture des résultats
Après incubation, le contenu de chaque puits de la
plaque a permis de préparer une goutte épaisse (GE) pour mettre
en évidence les parasites par la lecture au microscope.
L'absence des schizontes indiquée par le signe (-) qui
signifie l'Inhibition totale des trophozoïtes par l'extrait à
tester à la dose considérée. Leur présence
indiqué par le signe (+) met en évidence l'absence de
sensibilité du germe vis-à-vis de l'extrait ou l'inhibition
partielle des trophozoïtes par rapport au témoin blanc ou
négatif. La lecture se fait après 24h d'ensemencement puis, au
troisième jour avant l'entretien et enfin au cinquième jour.
Ainsi donc, l'expérience s'est effectuée pendant cinq jours mais
les résultats ont été lus en trois sessions que nous
représentons plus loin en J1 J2 et J3.
.
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Quatrième partie :
PRESENTATION DES RESULTATS ET DISCUSION
1. Résultats de l'enquête
ethnobotanique
2. Résultats de screening chimique
3. Résultats de la sensibilité
plasmodiale
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Quatrième partie :
PRESENTATION DES RESULTATS ET DISCUSION
Dans cette partie sont présentés, les
résultats de l'enquête ethnobotanique, ceux du criblage chimique
ainsi que ceux de la sensibilité du plasmodium aux extraits. Une
discussion accompagne cette présentation.
III.1. RESULTATS DE L'ENQUETE ETHNOBOTANIQUE
Les résultats récoltés auprès des
Personnes ressources dans la ville de Lubumbashi sont regroupés dans les
tableaux XX, XXI et XXII qui reprennent respectivement les données
relatives aux informateurs et les espèces végétales
renseignées ainsi que les pathologies que ces dernières
soignent.
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