1.7.2 Test de diagnostic rapide (TDR)
Au début des années 1990, une avancée
majeure a été faite dans la recherche du Plasmodium dans
le sang par l'utilisation des TDR (Shiff et al., 1993). Ces tests sont
basés sur la détection des antigènes produits par des
parasites du paludisme dans une petite quantité (5-15ul) de sang
lysé, en utilisant des méthodes immuno-chromatographique (WHO,
1999). Le plus souvent, ils emploient une bande de jauge ou un test portant des
anticorps monoclonaux dirigés contre les antigènes du parasite
cible. Les tests peuvent être effectués en 15 min environ.
Plusieurs kits commerciaux sont actuellement disponibles.
1.7.3 Antigènes détectables par le TDR
HRP2 est un antigène abondant, soluble, stable à
la chaleur. Il est présent dans le cytoplasme et la membrane des
érythrocytes infectés et serait impliqué dans la
détoxification de l'hème (Bell et al., 2006).
La lactate déshydrogénase (LDH) est une enzyme
glycolytique soluble, exprimée à concentration
élevée au cours de la phase asexuée des parasites du
paludisme (Piper et al., 1999). Elle utilise le 3-acétyl
pyridine adénine dinucléotide NAD (APAD) comme coenzyme dans la
principale réaction de formation du pyruvate à partir de lactate
(Makler & Hinrichs, 1993). En culture in vitro comme dans le plasma des
patients infectés déterminés par microscopie,
l'activité de la LDH du Plasmodium (pLDH) serait en
corrélation avec la densité du parasite. L'aldolase du
Plasmodium est une enzyme de la glycolyse du parasite exprimée
par les stades sanguins de P. falciparum ainsi que ceux des autres
parasites du paludisme (Makler et al., 1993).
1.7.4 Fonctionnement du TDR
Quelques microlitres de sang et la solution tampon
placés sur la bande ou dans les puits correspondants, sont
mélangés avec l'anticorps marqué puis l'ensemble migre le
long de la bande vers les lignes contenant l'anticorps lié. Si
l'antigène est présent, certains anticorps marqués seront
emprisonnés sur la ligne test. L'excédent d'anticorps
marqués est piégé sur la ligne contrôle (WHO,
2004).
1.7.5 Interprétation des résultats du TDR
Le diagnostic du paludisme doit tenir compte à la fois
des résultats du TDR et de l'état clinique du patient. Un
résultat négatif ne signifie pas toujours l'absence de paludisme,
parce que la
NKAMEDJIE PETE PATRICK [14]
DETERMINANTS DE L'UTILISATION DE LA MILDA DANS LE
DISTRICT DE SANTE DE LA MIFI.
densité parasitaire pourrait être insuffisante
pour donner une réponse positive ou le TDR pourrait être
endommagé. Dans ce cas, sa sensibilité est réduite. Aussi,
il se pourrait que le patient souffre du paludisme causé par d'autres
espèces plasmodiales non détectables par le TDR. Cependant, un
résultat positif ne signifie pas nécessairement présence
d'une infection palustre, parce que l'antigène pourrait être
détecté après la mort du parasite. La présence des
gamétocytes non pathogènes ou la présence d'autres
substances dans l'organisme pourrait donner des faux positifs. De
surcroît, la présence des parasites chez un individu pourrait ne
pas avoir d'effet à cause de son immunité. C'est pourquoi,
quelque soit le résultat du TDR un protocole de traitement (WHO, 2004)
adapté à la zone, devrait être mis en place pour permettre
une meilleure gestion des cas de paludisme.
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