I.7.2-Principe
Les disques d'antibiotiques sont
déposés à la surface d'un milieu de culture
préalablement ensemencée avec une dilution calibrée de la
bactérie à tester [15].
Un gradient de concentration s'établit dans la
gélose et après 18 à 24 heures d'incubation la croissance
de la bactérie dessine des halos d'inhibition ou de non inhibition
autour du disque d'antibiotique qui seront mesurés avec une règle
spéciale (pied à coulisse) [15].
Ces diamètres, seront notés
Sensible(s), Intermédiaire(I), Résistant(R), comparativement aux
livres de référence [15].
MENES-USS-FM-DBV Mémoire n°2 59
présenté par ONDENOT Yann Christian
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Surveillance de la résistance aux antibiotiques
de Streptococcus pneumoniae et Haemophilus
influenzae
I.8-La Concentration Minimale Inhibitrice(CMI)
I.8.1-Définition
La concentration minimale inhibitrice correspond
à la plus petite concentration d'antibiotique qui inhibe toute culture
visible d'une souche bactérienne après 18 heures de culture
à 37°C. Cette valeur caractérise l'effet
bactériostatique d'un antibiotique
[16].
Différentes techniques sont possibles ; en milieu
gélosé par diffusion avec des disques ou
languettes chargés d'antibiotiques ou
en milieu liquide avec différentes concentrations
d'antibiotiques dans les méthodes automatisées
[16].
I.8.2-Principe
La méthode de diffusion en gélose
consiste à déposer des disques de papier imprégnés
d'antibiotiques sur une gélose ensemencée avec la bactérie
à étudier [16].
Il s'établit dans la gélose
un gradient de concentration d'antibiotique autour de
chaque disque ou languettes. Après 18 heures d'incubation, il se produit
un halo d'inhibition autour de chaque disque ou languettes qui permet de
mesurer un diamètre [16].
Ce diamètre reflète la valeur de la
CMI. La comparaison de ce diamètre aux diamètres critiques
publiés par le CASFM (Comité de l'antibiogramme de la
Société Française de Microbiologie) permet de
répondre qualitativement si la souche étudiée est
sensible, intermédiaire ou résistante [16].
C'est la méthode de référence
pour mesurer l'activité d'un antibiotique vis-à-vis
d'une souche bactérienne donnée, elle consiste à
déterminer, dans des conditions bien standardisées (de milieu et
d'inoculum), la concentration minimale d'antibiotique capable d'inhiber la
croissance bactérienne.
Pour ce faire, on réalise une gamme de
dilutions (habituellement de raison 2) de l'antibiotique, soit en milieu
liquide, soit en milieu solide. Les différentes dilutions sont
ensemencées avec la bactérie étudiée et l'on peut
déterminer après 18h d'incubation, où se situe la CMI
[16].
MENES-USS-FM-DBV Mémoire n°2 59
présenté par ONDENOT Yann Christian
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Surveillance de la résistance aux antibiotiques
de Streptococcus pneumoniae et Haemophilus
influenzae
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