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Dosage radio-immunologique

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par mehdi attia
universite mostaganem -  2008
  

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1) Introduction 

2) Définition

3) Principe et Condition de la technique

4) Phénomène de compétition entre deux Ag, l'un marqué et l'autre non marqué

5) Exemple d'un dosage de mélatonine extraite chez le mouton.

6) Les inconvénients 

7) Conclusion

Introduction :

La présence et la concentration d'un Ag spécifique ou d'un Ac spécifique à un antigène dans la solution peuvent être déterminées par les radio-immuno- dosages (radio-immuno-assays : RIA), ou par le dosage ELISA. L'antigène attaché à une surface solide capture l'anticorps avec lequel il réagit, il est dosé en utilisant un second anticorps marqué réactif au premier. Ces dosages permettent de mesurer une grande variété d'antigènes ainsi que la concentration et l'isotype des Ac spécifiques à un Ag donné.

Définition

La méthode Radio-Immuno-Aissy (RIA) a été mise au point dans les années 1950 par les américains Solomon Aaron Berson et Rosalyn Sussman Yalow. C'est une technique très précise de dosage des substances biologiques telles que les enzymes, les hormones, les stéroïdes...,dans le sang, l'urine, la salive, ou tout autre liquide corporel dont lequel la formation du complexe antigène anticorps est détectée grâce à la désintégration d'un atome radioactif (iode 125). Ce dosage repose sur l'inhibition compétitive par la substance (froide).

Principe et condition :

Principe :

La RIA classique repose sur le principe d'une liaison compétitive ,mettons en présence une certaine quantité d'anticorps spécifique d'un antigène donnée et cette même antigène préalablement marqué par radio isotope .Un complexe anticorps antigène se forme selon l'équation suivante : Ac +Ag* [AcAg*]

La réaction Ag-Ac est due à l'interaction entre les épitopes de l'antigène et les paratopes de l'anticorps. Elle fait intervenir quatre type de liaison non covalentes (des liaison : hydrogène, électrostatique, hydrophobe, et les forces de van der waals). Les Ac constituent des sondes moléculaires spécifiques vis-à-vis de n'importe quelle substance antigénique. La réaction Ag-Ac a deux grands type d'applications : la détection et le dosage des antigènes (par méthodes dont il faut vérifier la spécificité, la reproductibilité et la sensibilité). Et la détection et le titrage des anticorps (vis-à-vis d'un Ag ou d'un mélange d'Ag). L'équation dépend de l'affinité de l'anticorps pour l'antigène et la constante K rend compte de cette affinité : K= [AcAg*] /[Ac].[ Ag]

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