II.2.3.1.2 Mode opératoire (BORGHINI et al., 2013)
:
- Homogénéiser (mélanger) correctement
l'urine en tournant lentement, à plusieurs reprises, le pot.
- Après avoir sortie la bandelette de son étui
sans toucher les zones réactives, l'immerger 1 seconde (au maximum) dans
l'urine en humectant entièrement toutes les zones réactives. Ne
jamais verser l'urine avec une pipette sur la bandelette.
- Egoutter rapidement en passant la tranche de la bandelette
sur un papier absorbant afin de supprimer l'excédent d'urine.
- Enclencher le chronomètre.
La lecture est faite dans les 1 min qui suivent le retrait de
la bandelette de l'urine par comparaison par rapport à l'échelle
colorimétrique, matérialisée par des croix.
L'échantillon urinaire de choix est la seconde miction du
matin;
Le seuil de détectabilité pour les
protéines est de 60 mg/l (albumine) et ne peut donc pas
révéler une micro albuminurie et celui des glucides est de 0,4
g/l (2,2 mmol/l).
On peut observer des faux positifs si les urines sont trop
alcalines (pH supérieur à 7,5) ou trop concentrées, ou si
elles contiennent des agents désinfectants (ammoniums quaternaires,
Chlorhexidine).
Chaque résultat était obtenu par
détermination de la moyenne après deux essais.
II.2.3.2 Dosage de la créatinine sérique
La créatinine est un composé que l'on dose dans
le sang, et parfois dans l'urine pour évaluer la fonction
rénale.
La créatinémie est dosée selon la
méthode de Jaffé, décrite par DELATOUR et al.,
(2011). Une fois les échantillons de sang prélevés,
le dosage de la créatinine se fait dans le sérum, qui est obtenu
après centrifugation du sang total.
II.2.3.2.1 Principe
Le dosage de la créatinine respecte la méthode
colorimétrique cinétique à deux points, basée sur
la réaction de Jaffé. La méthode consiste à mesurer
à 510 nm l'intensité de la coloration du complexe
rouge-orangé formé par la créatinine et l'acide picrique
en milieu alcalin ; la vitesse de formation de la coloration étant
proportionnelle à la concentration en créatinine dans
l'échantillon (DELATOUR et al., 2011).
Mémoire de Master en Biologie Clinique
rédigé par: MIMBOE BILONGO CELINE SYLVIE
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Filtration glomérulaire chez des patients
diabétiques et/ou hypertendus suivis à l'Hôpital de
district de la Cité Verte:
dosages de la créatinémie,
protéinurie et urémie
L'équation de la figure 8 illustre la réaction qui
se produit au cours du test.
Créatinine Acide picrique Complexe coloré rouge -
orangé
Figure 8 : Réaction de Jaffé
(CABE, 2006).
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