CHAPITRE 3 : MATERIEL ET METHODOLOGIE
1. Matériel
a. Les matériels du
terrain
Les matériels utilisés sur le terrain
sont : les échantillons d'eau, un multimètre qui mesure le
pH, le TDS et la salinité, un thermomètre, la fiche
d'enquête et un appareil photo numérique.
b. Les matériels de laboratoire
Le spectrophotomètre DR/2400, l'autoclave, les
boîtes de pétri qui contiennent les milieux de culture, des
produits chimiques et autres matériels sont utilisés au
laboratoire pour faire les analyses.
c. Les prélèvements
La nature du matériau du récipient de
prélèvement est très importante car celui-ci ne doit pas
entrer en réaction avec l'eau à analyser ou permettre la fuite de
certains gaz. De plus, le prélèvement conditionne les
résultats analytiques et, par voie de conséquence,
l'interprétation qui sera faite.
Les échantillons d'eau à analyser sont
prélevés dans des bouteilles bien rincées avec
l'échantillon.
Pour l'analyse bactériologique, toute contamination de
l'eau par l'air ambiant et autres objets souillés est
évitée. Les flacons ne sont pas totalement remplis pour permettre
aux microbes aérobies qui se trouveraient dans l'eau de survivre
jusqu'au moment de l'analyse. L'analyse a commencé le jour du
prélèvement.
Pour l'analyse chimique, une bouteille en plastique est
utilisée.
d. Les enquêtes
L'étude étant basée sur la qualité
des eaux des puits protégés munis de pompes dans la commune de
Porto-Novo, les enquêtes sont faites auprès des populations
utilisatrices de ces eaux. Les enquêtes sont également
menées auprès des agents de santé de la commune et des
autorités communales.
2. Méthodologie
a. Protocole de recherche
Les mesures de la qualité de l'eau comprennent les
mesures in situ et les mesures au laboratoire.
v Les mesures in situ
Les mesures in situ sont des analyses réalisées
sur place en plongeant directement les matériels dans l'eau. La
température, le pH, la conductivité et l'oxygène dissous
doivent être mesurés sur place. Ces paramètres sont
très sensibles aux conditions du milieu et susceptibles de varier dans
des proportions importantes s'ils ne sont pas mesurés pas sur le site.
ü Détermination du pH, de la
température
Le pH de l'eau est déterminé à l'aide
d'un multimètre. Avant toute utilisation, l'appareil est
étalonné à l'aide d'une solution de pH= 4, de pH= 7 et de
pH=10. Cet appareil permet également de connaître la
température, la conductivité, le TDS et la salinité de
l'eau.
Après avoir allumé l'appareil, les
électrodes sont bien rincées avec de l'eau distillée et
trois fois à l'aide de l'eau à analyser. La lecture est faite
après stabilisation de l'appareil.
v Les mesures au laboratoire
Les autres mesures plus complexes ou non sont
effectuées au laboratoire dans des conditions plus confortables avec des
appareils plus sophistiqués. Il faut noter que toutes les mesures
bactériologiques sont faites au laboratoire parce que demandant des
manipulations en absence totale de microbes et des conditions d'incubation
qui ne peuvent être réalisées qu'au laboratoire.
Ø Mesures chimiques
ü Mesure du TH (Titre Hydrotimétrique ou
dureté totale)
Réactifs utilisés
-solution d'EDTA (Ethylène Diamine Tétra
Acétique) de concentration 0,104 mg/l
-solution tampon de pH=10
Mode opératoire.
On prélève 10ml d'eau dans un erlenmeyer
de 250ml. On y ajoute une pincée de la poudre NET `indicateur
coloré) puis 5 gouttes d'une solution tampon de pH=10. On titre alors la
solution obtenue à l'aide de l'EDTA jusqu'au virage au bleu
foncé. On note le volume de l'EDTA ajouté.
ü Mesure de la concentration en
nitrate
La concentration en nitrate de l'eau est
déterminée grâce au spectrophotomètre. Le
spectrophotomètre utilisé est un DR /2400.
Après avoir allumé l'appareil, le programme
à utiliser est choisi ; il s'agit du 354N qui mesure la
concentration du nitrate de 0.1 à 10 mg/l. L'appareil possède
deux cellules qui sont bien rincées avec l'eau distillée et l'eau
à analyser. Cette dernière est ensuite versée dans les
deux cellules. On ajoute ensuite un produit dans l'une des cellules - le
Nitrate Ver 5- et puis on secoue fortement pendant une minute pour
homogénéiser la solution obtenue qui prend une coloration brun
foncée. Puis on laisse au repos cette solution pendant cinq (5) minutes
avant de faire la lecture.
ü Mesure de la concentration du
nitrite
La mesure s'est faite également ave le même
spectrophotomètre et la procédure de mesure suit la même
logique sauf que le temps pour la solution au repos est de vingt (20) minutes
et le produit versé dans la cellule de mesure est différent.
ü Les analyses biologiques
Elles sont plus difficiles à réaliser que les
analyses chimiques et elles ont été réalisées dans
des conditions d'asepsie totale pour éviter de souiller l'eau. Elles ont
été réalisées au laboratoire national de la SONEB
à Vèdoko à Cotonou. Elles ont consisté à
rechercher si l'eau est contaminée par les microorganismes
pathogènes. Du fait que tous les microorganismes ne puissent pas
être examinés et dénombrés tous à la fois, on
recherche la présence de certaines bactéries indicatrices de
pollution.
b. Les enquêtes
Les puits objets de nos enquêtes sont au nombre de
sept. Les utilisateurs de ces puits sont interrogés et les
réponses consignées dans une fiche d'enquête.
| 
