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Validation de procédé de production d'antigène viral sur culture cellulaire BHK21

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par Ghaith Ben Messaoud
Institut supérieur des technologies médicales de Tunis - Licence appliquée en biotechnologies médicales 2013
  

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INTRODUCTION

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a culture cellulaire s'est considérablement développée tant pour ses aspects fondamentaux que pour ses applications pratiques et cliniques. Cette discipline s'avère aujourd'hui d'une grande utilité dans le domaine de virologie puisqu'elle nous permet d'isoler des virus et contribuer aux diagnostics des maladies virales.

Le virus utilisé au cours de ce projet, est le virus de la rubéole. Ce virus appartient à la famille des Togaviridae. C'est un virus enveloppé, à acide ribonucléique (ARN) de polarité positive.

La transmission de ce virus peut se faire par les gouttelettes nasales expulsées par les personnes infectées lorsqu'elles éternuent ou toussent. L'homme est le seul hôte connu.

Plusieurs techniques de sérodiagnostic de la rubéole nécessitent la présence de l'hémagglutinine (HA) rubéolique, comme:

· Technique d'Inhibition d'hémagglutination (IHA)

· Technique d'agglutination sur latex

· Test ELISA (Enzyme-Linked-Immuno-Sorbent-Assay) ...

Le développement des techniques immunoenzymatiques en particulier la technique ELISA a contribué à améliorer la spécificité et la sensibilité de dépistage des antigènes et des anticorps, en particulier dans le diagnostic de la rubéole.

Pour la femme enceinte, la sérologie rubéolique est demandée d'une manière systématique. Ainsi des milliers d'analyses sérologiques sont réalisées chaque année en Tunisie. Ceci représente une importante consommation des réactifs pour le diagnostic de cette virose.

C'est dans ce cadre que nous nous sommes intéressés à développer une technologie de production de réactifs pour le sérodiagnostic de la rubéole ce qui nous permettra d'éviter le cout élevé d'importation du Kit commercial de diagnostic.

Toute fois, le développement de tels Kit de diagnostic nécessite la préparation de l'antigène d'hémagglutinine rubéolique.

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I. Maladie de la rubéole

Le nom «rubéole» est dérivé de l'exanthème typique, qui signifie rouge clair à petite tâche. Le virus responsable est ubiquitaire, strictement humain (Ellakhdi et al., 2009). Le virus de la rubéole est responsable de maladie éruptive, contagieuse, épidémique et immunisante, le plus souvent bénigne. La transmission se fait par voie aérienne (rubéole acquise) ou par voie transplacentaire au cours de la grossesse (rubéole congénitale). La gravité est due à la tératogénicité du virus lorsqu'il contamine une femme enceinte surtout au premier trimestre de la grossesse. (Pebret, 2003). Au cours de la grossesse le virus peut exercer des effets dévastateurs sur le foetus en développement. Ce virus est responsable de plusieurs cas de mort foetale et de graves malformations congénitales (Dontigny et al., 2008).

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