II- MATERIEL ET METHODES
II-1-MATERIEL
II-1-1 Matériel
biologique
Comme matériel biologique nous avons utilisés
les gésiers de poulet cuits et non cuits ; les oeufs de poulet,
trois souches de Salmonella (Salmonella Hadar,
Salmonella Enteritidis, Salmonella Typhimurium).
II-1-2
Matériel de manipulation
Le matériel de manipulation est constitué de
matériel usuel, régulièrement utilisé pour les
manipulations en microbiologie des aliments.
Ce sont: un autoclave, un bec bunsen, des boîtes de
Pétri de 90mm de diamètre, du papier aluminium, trois
étuves de 37, 42 et 80°C, des bains maries réglés
à 37°C, 55°C, 60°C et 48°C, un bain de glace, des
flacons stériles, des Erlenmeyers, des éprouvettes
graduées, des tubes à essais avec ou sans vis, une balance
électronique, un distillateur, un réfrigérateur, des
portoirs, un marker, de l'eau de javel (12°chl), des fourchettes et des
couteaux, des pipettes, une plaque chauffante, du coton cardé, des tubes
à hémolyse, un poupinel, des barreaux aimantés, une
spatule, des pinces, des lames et lamelles, une anse de platine, un microscope
optique, des tubes capillaires en verre sodocalcique de diamètre 6.5 mm
et d'hauteur 15mm, etc.
II-1-3 Les milieux de
culture
Les milieux de cultures utilisés pour l'étude
sont:
-les milieux ordinaires (gélose TCSA, gélose
PCA, bouillon Müller Hinton, gélose Müller Hinton, eau
peptonée tamponnée, tryptone-sel) de l'eau distillée
stérile.
-les milieux sélectifs (géloses SS et Hektoen,
bouillon rappaport de Vassiliadis, bouillon Müller-kauffmann).
-les milieux d'identification de Salmonella
(gélose kligler-Hajna, milieu urée indole, milieu au
glycérol, milieu à la lysine de Taylor).
II-1-4 Les
réactifs
Les réactifs utilisés pour notre étude,
sont ceux qui ont servi à effectuer la coloration de Gram. Ce sont: le
violet de gentiane phéniqué, le Lugol, La Fuschine de Ziehl
dilué, le réactif de Kovacks.
L'éthanol est utilisé comme solvant.
II-2- METHODES
II-2-1- Echantillonnage
Nous avons mené une enquête préliminaire
qui nous a permis de recenser les vendeurs de gésiers de poulet dans
la commune de Cocody. Parmi ces vendeurs nous avons retenu ceux qui vendaient
le plus grand nombre de gésiers.
Un prélèvement de 5 échantillons
(gésiers cuits) est effectué par semaine chez les vendeurs
retenus.
Une fois collectés, les échantillons sont
transportés immédiatement au laboratoire (environ 20 minutes)
dans des sachets plastiques stériles pris individuellement.
Dix grammes sont prélevés à partir de
chaque gésier pour ainsi constituer l'unité d'analyse ou la prise
d'essai. Le gésier est manipulé avec du matériel
stérile. Entre deux dissections les mains sont soigneusement
lavées avec de l'eau de Javel à 12° diluée au
dixième et abondamment rincées avec de l'eau de robinet, tandis
que les couteaux sont stérilisés par flambage à l'alcool.
Le support utilisé comme tare au niveau de la balance (papier aluminium)
est utilisé une seule fois par pesée. Les mains, ne rentrent
jamais en contact avec l'unité d'analyse pour éviter toute
contamination par le manipulateur.
Le nombre d'échantillon analysé est de 60
gésiers cuits, qui s'est effectué pendant trois mois.
Les trois souches de Salmonella serviront à
contaminer un produit alimentaire, pour ensuite réaliser l'étude
de la thermorésistante de ces souches.
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