2.2.5. Préparation des extraits aqueux et
organiques
a. Extraits aqueux
Les extraits aqueux étaient obtenus
immédiatement après cueillette des plantes et l'isolement de
l'organe frais concerné. Le mode opératoire était celui
utilisé par les guérisseurs traditionnels.
La matière fraîche était obtenue par
broyage dans un mortier de porcelaine à l'aide d'un pilon. Les extraits
étaient utilisés immédiatement ou conservés au
réfrigérateur entre 2 et 6°C et dans tous les cas, la
conservation ne devait pas excéder 7 jours avant l'utilisation.
b. Extraits organiques
L'extraction organique s'est faite après un screening
chimique permettant d'identifier certaines substances présumées
biologiquement actives dans la plante.
2.2.6. Préparation et stérilisation des
disques
En se servant d'un perforateur, des disques de 5 mm de
diamètre ont été découpés sur un papier
filtre. Une fois découpés, les disques ont été mis
dans une boîte de Pétri et stérilisés au four
Pasteur à 160°C pendant 1 heure.
2.2.7. Test antibiogramme
Des disques antibiogrammes de 5 mm de diamètre ont
été découpés dans du papier filtre
stérilisés à chaleur sèche et ensuite
plongés dans la solution médicamenteuse pendant quelques heures
(extraits aqueux et organiques). Les disques étaient ensuite
séchés à l'étuve à 37°C pendant 24
heures. Une jeune préculture de 24 heures était
étalée en tapis bactérien sur gélose nutritive et
le disque était ensuite délicatement placé sur le milieu
égoutté autour d'une flamme. L'incubation se faisait à
37°C pendant 24 heures ou 48 heures. La présence ou l'absence de
zone d'inhibition renseigne sur l'activité du médicament
vis-à-vis du germe concerné.
Aussi afin de se rendre compte de l'effet bactéricide
ou bactériostatique de ces extraits aqueux et organiques, il a
été procédé au repiquage de la zone d'inhibition,
à l'aide d'une anse de platine, dans du bouillon peptone, les
résultats sont lus après 24 heures.
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