II.4.2. DOSAGE DES SELS NUTRITIFS
A- Principe :
Le principe de détermination des sels nutritifs est
basé sur la formation de complexes spécifiques colorés
dont l'absorption de l'énergie lumineuse à une certaine longueur
d'onde (ë) est directement proportionnelle à la concentration du
sel nutritif à doser.
La quantité de lumière absorbée par la
solution, appelée densité optique (D.O) ou absorbance (Abs),
obéit à la loi de BEER-LAMBERT.
Où :
D.O et Abs: respectivement densité
optique et absorbance de la solution
I0 et I : respectivement intensité
lumineuse incidente et émergente du milieu absorbant
ë : coefficient d'extinction molaire (en
fonction de la température et la longueur d'onde)
L : longueur du milieu traversé
exprimé en cm
C : concentration de la solution absorbante
exprimée en mol/l
B- Mode opératoire :
On s'intéresse au dosage des sels nutritifs : ammonium,
nitrite, nitrate, Orthophosphate et silicium dissout. L'analyse est faite par
la méthode de colorimétrie à flux continu sur chaîne
automatisée SKALAR (Auto-Analyzer SAN PLUS) selon le protocole
décrit par le fabricant (SKALAR, 1998). Schématiquement, cet
analyseur automatique est composé de 3 éléments : un
échantillonneur qui permet d'aspirer les échantillons, une
cassette où se déroulent le développement des complexes
colorés et le spectrophotomètre proprement dit.
Un système de pompe crée un flux continu entre
les différents éléments de la chaîne, flux qui
entraîne automatiquement l'échantillon au travers du
système (voir le circuit analytique pour le dosage de chaque
paramètre en annexe III) pour son analyse.
Le dosage de chaque paramètre est passé en revue
ci-après :
II.4.2.1. DOSAGE DE L'AMMONIUM
Le dosage de l'ammonium ( ~ ) est réalisé
suivant la méthode de (KOROLEFF ,1969 in AMINOT et CHAUSSEPIED,
1983). En milieu alcalin (8 < pH < 11,5), l'ammonium dissout
réagit sur l'hypochlorite pour former une monochloramine. Ce
composé, en présence de phénol et d'un excès
d'hypochlorite (milieu oxydant) donne lieu à la formation d'un bleu
d'indophénol. La réaction est catalysée par le
nitroprussiate de sodium. Le maximum d'absorption se fait à une longueur
d'onde de 630 nm (LOURGUIOUI, 2006).
II.4.2.2. DOSAGE DE NITRITE
Le dosage de nitrite ( ~) est réalisé selon la
méthode de GRIESS qui repose sur la formation d'un complexe
coloré par réaction de diazotation entre l'ion nitrite, une amine
primaire aromatique, la Sulfanilamide et une autre amine aromatique, le
Dihydrochlorure de N-(1-naphthyl)-éthylène diamine (NED). En
effet, Il s'agit de la réaction de GRIESS, réaction de
diazotation spécifique de l'acide nitreux, qui se produit en deux
étapes :
L'ion nitrite réagit avec la sulfanilamide
(4-H2NC6H4SO2NH2) pour former un composé diazoïque (sel
de diazonium) qui se combine ensuite en milieu acide (pH<2) avec le NED pour
former un composé rosé dont l'absorbance à 540 nm (SKALAR,
1998) est proportionnelle à la concentration des ions nitrite.
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Sulfanilamide
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Phényldiazonium
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Dihydrochlorure de N-(1-naphthyl)-
Éthylène
diamine (NED)
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Figure II.16 : Réactifs de GRIESS pour
le dosage de nitrite
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