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Contribution à  la mise sur pied du laboratoire contrôle qualité du GIC Jgeprol.

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par DIEUDONNE .PATRICK AWONO BITUNDE
ENSAI de Ngaoundere - Ingénieur de conception agricole et alimentaire 2014
  

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Annexe 6: Mode opératoire du dénombrement des salmonelles

GIC JGEPROL

Réf : MO.MAL000_DS

Révision : 00

Mode opératoire du dénombrement des
salmonelles.

Date : Aout 2014

1/2

I. Objet

Cette méthode est utilisée pour dénombrer les salmonella présent dans les yaourts.

II. Définitions

Cette technique est basée sur détermination de la concentration des salmonelles contenues dans la préparation initiale. Elle nécessite une ou plusieurs dilutions décimales (au dixième) et une incubation à la température 37°C

III Principe

Les salmonelles à dénombrer présentent dans l'inoculum sont introduites soit à la surface, soit dans la masse d'un milieu gélosé. Chaque bactérie isolée donne naissance à une colonie ou UFC pour « unité formant colonie ». En effet, plusieurs bactéries peuvent être à l'origine de la formation d'une seule colonie qui ne peut plus être qualifiée de colonie (pas de clone) mais alors d'UFC

IV. Domaine d'application

Le laboratoire d'analyse contrôle qualité

V. Reference NF EN ISO 6579

VI. Réactifs et produits

Gélose de Hecktoen

Bouillon de Muller-Kauffman Eau peptoné tamponé

VII Matériel

Tube à essais Boite de Pétri Etuves

REDIGE PAR : AWONO BITUNDE DIEUDONNE.P Page vii

CONTRIBUTION A LA MISE SUR PIED DU LABORATOIRE CONTROLE QUALITE DU GIC JGEPROL

GIC JGEPROL

Réf : MO.MAL001_DS

Révision : 00

Mode opératoire du dénombrement des
salmonelles.

Date : Aout 2014

2/2

Bec de bunsen Pipette pasteur l'anse de platine

VIII. Mode opératoire

? Pré enrichissement non sélectif :

Dans un flacon, mettre 25g de produit, ajouter 75ml d'eau peptoné (dilution1/4), incubation à 37°C/24h. Le reste de la solution mère est récupéré pour être incubé à 37°C pendant 16 à 20h.Cette incubation est d'autant plus nécessaire qu'elle permet la culture des salmonelles stressées.

? Enrichissement sélectif :

Ensemencer un tube contenant 10 ml de bouillon d'enrichissement (SFB), avec un ml du milieu d'enrichissement (Müller Kauffman) bien mélanger, incubation 37°C/16à18h. ? Isolement :

Prélever avec l'anse de platine une goutte du milieu d'enrichissement qu'on semence en stries sur milieu sélectif (Hectoen) puis incuber à 37°C/24h. Les salmonelles se développent sous forme de colonies vertes ou bleutées avec ou sans centre noir

IX. Interprétation des résultats

Après incubation, on observe ou pas aucun de développement de salmonelles. Donc le produit a été effectué dans des bonnes conditions

Expressions des résultats

Volume de l'inoculum: 1 mL

Nombre d'UFC

1ère boîte

2ère boîte

Produit pur : 100

Absent

Absent

Dilution 10-1

Absent

Absent

Dilution 10-2

Absent

Absent

Si il y a présence de microorganismes identifier le nombre unité formant colonie

REDIGE PAR : AWONO BITUNDE DIEUDONNE.P Page viii

CONTRIBUTION A LA MISE SUR PIED DU LABORATOIRE CONTROLE QUALITE DU GIC JGEPROL

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"En amour, en art, en politique, il faut nous arranger pour que notre légèreté pèse lourd dans la balance."   Sacha Guitry